IBD高免卵黄抗体制作方法

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IBD高免卵黄抗体的制备来源：悠然博客 作者：辛振南

　　高免卵黄属于生物制品类，需要严格的条件和质量管理，否则做不好会引起疾病的传播等负作用，因此本文章只做参考和了解其基本原理的请不要私自加工。否则后果自负。

　　1、基本原理

　　健康产蛋鸡，用IBDV活苗配合灭活苗大剂量强化免疫，蛋鸡体内产生大量抗体，垂直传递到鸡蛋的卵黄中。将卵黄中的抗体稀释后，测定效价，合格者用于临床治疗鸡的传染性法氏囊炎病。

　　2、鸡的免疫

　　1) 、基础免疫：用15个免疫剂量的IBD弱毒疫苗对产蛋鸡进行皮下注射，即为基础免疫。

　　2)、加强免疫：在基础免疫10～15天，再用同样的剂量和方法用弱毒苗进行免疫接种，同时接种IBD油乳剂灭活苗，每只鸡0.5～1ml，或灭活水苗1～2ml，皮下注射。

　　3)、超强化免疫：在加强免疫后10～15天，取免疫蛋测定卵黄中抗体效价。用IBD琼扩实验法，抗体效价达到1：256以上为合格。

　　3、高免卵黄抗体的制备：

　　1、要求：IBD高免卵黄抗体检测效价达到≥1：64时方可使用（即为合格）。在保证≥1：64的前提下制备的抗体越稀越好。

　　2、高免蛋的消毒：先用清洁水洗去蛋壳表面的粪污，再用0.5%的新吉尔灭溶液浸泡消毒20min，然后晾干。无菌条件下打破蛋壳倒净蛋清，把蛋黄倒入消毒好的大烧杯内。

　　3、蛋黄匀浆：将蛋黄置于消毒好的捣碎机内，加入一定比例的生理盐水（根据蛋黄中的抗体效价而定）进行匀浆。

　　4、加防腐抑菌剂：匀浆后的卵黄加入0.01%硫柳汞或每毫升卵黄液加入青霉素、链霉素各1000单位进行防腐抑菌，摇匀后分装于消毒好的瓶中，冻结保存。

　　4、高免蛋黄液的检测：

　　安全检测：健康雏鸡，每只皮下注射卵黄液1ml，观察一周应健康存活

　　无菌检验：取高免卵黄液分别接种于普通营养琼脂河厌氧肉汤培养基上于37℃培养24小时，应无细菌生长。

　　5、临床防治：每只鸡肌肉注射1ml。

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