【分享】不同禽传支病毒对鸡法氏囊的病理影响

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导言


传染性支气管炎是一种由传染性支气管炎病毒（IBV）引起的严重疾病，影响着世界各地的禽群。IBV属于冠状病毒家族，是家禽业造成经济损失的主要原因之一。这种病原体很容易发生突变，许多血清型证明了这一点。新的血清型和变异不断出现，这对预防和控制这种疾病提出了挑战。

IBV感染主要导致鸡的上呼吸道疾病，但该病毒也可在其他非呼吸道上皮细胞中复制，包括肾脏、生殖器官和消化道的许多部分的细胞。生殖道的致病性取决于鸡在感染时的年龄。

早期感染可能会导致母鸡生殖系统的永久性损害，并可能影响后期的产蛋量。它还会损害泌尿系统，主要特征是肾脏中的尿酸沉积，显示"斑点肾",对鸡是致命的。

20世纪90年代末，我国免疫鸡发生了大规模的传染性支气管炎疫情，表明IBV菌株的抗原性发生了显著变化（Zhao et al.，2016）。QX和TW基因型菌株是目前我国主要的流行菌株。比较不同基因型菌株的致病性，发现马萨诸塞型（肿块样）菌株主要引起鸡呼吸道体征和气管纤毛损伤，而QX和TW菌株对鸡肾脏造成严重损害（Cheng等，2018；Xu等，2018），有时导致严重的肾脏尿酸沉积和生殖系统发育不全。

本实验室前期的研究发现，感染QX型IBV的鸡对鸡的重要免疫器官法氏囊也有一定程度的损伤（Yan et al.，2016；Zhao等，2019）。其他研究人员也报告了从法氏囊中分离出的IBV，以及大体的组织病理学病变，在实验性H52和H120感染后，已经显示出明显的组织病理学损伤。

法氏囊是一种淋巴上皮结构的淋巴器官。它是B淋巴细胞分化和成熟的部位，位于鸟类泄殖腔的背侧区域。关于冠状病毒感染对鸡淋巴器官影响的信息有限，对IBV的研究主要集中在鸡淋巴器官的主要临床感染器官。本研究的主要目的是研究不同基因型IBV菌株对法氏囊的损害。我们的发现为进一步描述IBV的免疫逃避策略和发病机制铺平了道路。

材料和方法（略）结果临床特征
  
观察IBV毒鸡1-14dpc的临床体征和评分（图1(A)）。sd感染组5 dpc开始出现明显的临床体征，1/10只鸡出现呼吸困难（呼吸间断）。在6 dpc时，5/10只鸡摇了摇头。在7 dpc时，其中一只病鸡进一步出现抑郁，闭着眼睛站着，4/10出现呼吸短促，并摇头。在10 dpc时，1只鸡死亡，1只鸡出现呼吸困难。12 dpc后，症状减轻，鸡群健康状况得到改善，存活率为90%。

m41感染组的症状相对较轻，在6 dpc上开始出现明显的临床症状，2/10只鸡出现摇头症状。1只鸡在9 dpc时短暂出现抑郁，在10 dpc时恢复正常，存活率为100%。gd感染组中，3/10只鸡开始出现6 dpc摇头、流泪、鼻渗出等明显临床体征。从7只dpc的鸡中显示出持续性


图 1. 感染禽流感病毒株SD、M41和Gd的平均临床评分(A)和生存曲线(B)( n?=10)评价标准:

正常情况:0;

轻微流泪、轻微颤抖、水粪便或气管裂裂: 1;

流泪、流鼻液、抑郁、水粪便、打喷嚏或咳嗽: 2;

有更强烈的症状和更严重的水粪便:3;

死亡:4。


图2. 感染SD型、M41型和GD型禽的法氏囊的大体病变

在3-14天，IBV感染组均出现清晰或灰白色黏液（黑色箭头），SD感染组、M41、GD感染组（1、3和7 dpc）均出现点状出血或充血（白色箭头）。

法氏囊的组织病理学变化

在5-7例IBV感染鸡的器官中主要检测到轻微到严重的病变。如图3所示 暴露于SD菌株的鸡在5DPC时可见轻微的间质细胞增殖,在7DPC时可见淋巴滤泡萎缩和中度的间质扩张。M41感染的鸡5-7天均出现淋巴状卵泡萎缩和间质扩大。GD感染的鸡出现下列病变:黏膜上皮细胞剥落,5DPC时间质细胞增殖,5、7DPC时间质扩大。

Figure 3. 感染SD型、M41型和gd型乙型肝炎病毒后法布里丘斯囊内的病理学病变。可见间质细胞增生,开放箭头表示淋巴滤泡萎缩,立体箭头表示间质扩大,固体箭头表示黏膜上皮细胞脱落。


图3. 感染SD型、M41型和gd型乙型肝炎病毒后法布里丘斯囊内的病理学病变。可见间质细胞增生,开放箭头表示淋巴滤泡萎缩,立体箭头表示间质扩大,固体箭头表示黏膜上皮细胞脱落。

在5-7天时的M41和GD型鸡中,观察到少量阳性细胞。法氏囊部分上皮细胞的细胞质具有免疫反应性。然而,尽管与对照组有明显的差异,但在SD组第5天均可在单细胞中检测到少量细胞质染色( 见图4 ).


图 4. 法氏囊5-7天免疫组织化学检测。固体箭头显示病毒抗原免疫反应。单位=40um。

气管、肾脏和肺囊中的病毒载量

在1、3、5、7、10和14天时，从收集的组织中提取RNA，采用RT-qPCR检测病毒载量，方法如下。如图5(A)所示，各组鸡在攻毒后第一天的气管中均检测到病毒，病毒载量随时间增加。在SD组中，它在3 dpc时迅速增加，在5和7 dpc时在105/mg时达到峰值，然后逐渐下降。在1、3、7 dpc时，M41组气管病毒载量显著高于其他两组，在10 dpc时峰值保持在105.5/mg以上。在GD感染组中，气管内的病毒载量在早期缓慢增加，在5、7和10 dpc时维持在104/mg的中等水平，在14 dpc时下降。肾组织中不同菌株的病毒载量如图5(B).所示SD挑战组的鸡在5 dpc时迅速达到/104.8mg的峰值，并在7和10 dpc时保持高水平。M41攻毒组鸡肾脏病毒载量始终低于102/mg，在3、5、7 dpc时均显著低于其他两组。


图5。IBV菌株SD、M41和GD感染后的病毒载量（A-C）和细胞因子表达水平（D-I）。

测量A、气管、肾脏和C、法氏囊中的病毒载量，并显示为log10拷贝/mg组织。IL-6 (D)、IFN-α (E)、IFN(F)、IFN-?(F)(G)、IL-1?(H)、IFN- γ (I)和TNF-α (J)囊中的细胞因子表达水平为相对于对照组的相对表达水平。条形图表示平均±标准差。

不同菌株在肾脏组织中的病毒载量见 图5 (b)。

来源：鸡保姆，作者：Xinyan Tang等

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很好的文章，感谢分享