鸡传染性鼻炎诊断

风雨阳光

是鸡的一种急性上呼吸道传染病。其主要特征为鼻腔和窦发炎、流鼻涕、流泪、打喷嚏和脸部肿胀。病原为鸡副嗜血杆菌，染色为革兰氏阴性、呈球杆状或短杆状。本菌常与呼吸道霉毒形体病鸡痘和传染性支气管炎混合感染，能加重病情，死亡率增加。

（一）、病料采集  眶下窦渗出物、鼻腔分泌物

（二）、检验程序

1．染色镜检  用玻璃注射器无菌采取急性病例眶下窦分泌物，或用热铁片烧烙病死鸡的脸部皮肤后，无菌操作由鼻孔和眼之间剪开上腭，再以无菌棉拭子插入窦内深部取分泌物，或用鼻腔分泌物，涂片、干燥、固定后，革兰氏或美蓝染色镜检，可见革兰氏阴性，两极浓染，单个、成对或形成链状排列的小杆菌。

2.分离培养  将上述病料划线接种于含10％脱纤鸡血琼脂平板上，于空气环境下在37度温箱中培养，24h后可见长出圆形、边缘整齐、光滑透明、有光泽的细小菌落（直径0.5—1mm）；接种于巧克力琼脂平板上，于37度、10％CO2环境中培养48h，形成光滑、隆起、淡灰、半透明、直径0.5—1mm的菌落，有的菌落周围带有彩虹；将窦内分泌物于血琼脂培养基上平行划线接种。再用葡萄球菌与原先的划线作垂直交叉接种，在蜡烛缸于37度培养24—48h，在葡萄球菌菌落附近见到许多无色透明露珠样菌落，呈卫星现象；接种于普通肉汤可见呈均匀一致的混浊，管底有少量沉淀。

3．生化试验   将纯培养物接种于生化培养基，可见如下生化特性：

培养基	葡萄糖  麦芽糖  蔗糖   乳糖  木胶糖  过氧化氢酶   甘露醇糖   果糖   山梨糖
反应	+       +      +      -      -         -            +        +      +
培养基	糊精  半乳糖  茧蜜糖  阿拉伯糖  纤维二糖  水杨素   菊糖   吲哚   硝酸盐还原
反应	+      -       -        -         -        -       -      -         -

4. 动物试验  无菌取病鸡窦内分泌物通过鼻腔或眶下窦接种于健康易感鸡，36—72h后可见被接种鸡出现流鼻液、颜面肿胀等典型鼻炎症状。如含菌量少，可延长至一周左右发病。将实验鸡扑杀可分离出与上述一致的致病菌。

5．血清型鉴定  按Page的分型方法，副鸡嗜血杆菌可分为A、B、C三个血清型各型之间无交叉保护。1987年首先在北京发现A型副鸡嗜血杆菌，2003年在辽宁某鸡场又发现B型，张培君等报道我国也有C型存在。这三个血清型有一些共同的抗原成分。它们的区别如下：

           表   鸡副血杆菌三个血清型的区别

血清型	毒力                          对动物红细胞凝集作用
A	强                         凝集马、牛、绵羊、鸡和豚鼠红细胞
B	弱                         凝集少数动物红细胞
C	很弱或无毒                   不能凝集红细胞

常用的血清学诊断方法有：血清平板凝集试验（SPA）、琼脂凝胶扩散试验（AGP）和血球凝集抑制试验（HI）。

（1）血清平板凝集试验   以无菌操作取病鸡血清20--25份，用生理盐水5倍稀释，在洁净的玻片上，分别滴加传染性鼻炎抗原和被检血清各1滴（约0.05ml），充分混匀，4min后观察结果：

“＃”：片状凝集，均匀散在。

“+++”：颗粒凝集，均匀散在。

“++”：液滴呈边在性颗粒凝集。

“+”：液滴呈边在性轻微凝集。

“-”：无凝集现象。

介于“+”和“-”之间者为疑似，呈现“+”以上者为阳性，反之为阴性。

（2）琼脂凝胶扩散试验

①琼脂板的制备

a．0.01mol/L PBSpH6.4的制备

甲液  Na2HPO4.12H2O   3.58g             蒸馏水   1000ml

乙液  KH2PO4  1.36g       蒸馏水  1000ml

等甲乙二液充分溶解后，用脱脂棉过滤，分别保存，用时取甲液24ml加入乙液76ml混合即可。

b.制板

配方：琼脂  0.5—1.0g      氯化钠  8g      甲乙混合液   100ml

上述各成分混合，在100度水浴中充分煮沸溶化，加入0.01％硫柳汞，待冷至55度左右倾入平板，每个平皿18—20ml，待凝固后，放冰箱中保存备用。

c.打孔  从冰箱中取出琼脂板，用特制的打孔器打成梅花形排列的七个孔，即一个孔在中央，六个孔在四周，孔直径4mm，孔距4mm，用针头将孔中琼脂挑出，琼脂板即成。

②加样   用加样器或滴管将抗原加入中心孔中，周围孔加入待检血清，以加满而不外溢为度，然后，将平板放在潮湿的容器中，置37度温箱中作用24h和48h。

③判定  在待检血清和抗原孔之间出现白色的沉淀线者为阳性，反之为阴性。

在感染本病或接种本菌苗的鸡群中，在两周左右容易观察到沉淀线，此反应有时可持续到11周。

6.鸡副嗜血杆菌和禽嗜血杆菌的鉴别

在鸡的呼吸道中，常发现不致病的嗜血杆菌，最近被分类为禽嗜血杆菌，它与鸡副嗜杆菌的主要区别如下：

            表  鸡副嗜血杆菌和禽嗜血杆菌的鉴别

区别 菌名	过氧化       半乳糖       茧蜜糖         生长          菌落      氢酶         利用         利用           条件          着色
鸡副嗜血杆菌	-           -          -          需CO2          -
禽嗜血杆菌	+           +          +          需O2           +

鸡晓岚

实际生产中传鼻的诊断主要通过流行病学、临床症状、病理解剖来初诊，确诊要用实验室诊断，但是实验室诊断需要的技术、设备一般人无法满足。最常用的是试探性投药，几天后病好了就正确，病没好就不是这个病。
流行病学  鸡是副鸡嗜血杆菌的主要宿主，各种年龄的鸡均可感染，但4周龄以上的鸡易感性增强。育成鸡、产蛋鸡最易感，本病多发生在成年鸡。本病在寒冷季节多发，一般秋末和冬季可发生流行，具有来势猛，传播快，发病率高，死亡率低的特点。  慢性病鸡和康复后的带菌鸡是主要的传染来源，本病主要通过被污染的饲料和饮水经消化道而感染。鸡舍通风不良，氨气浓度过高，鸡舍密度过大，营养水平不良以及气候的突然变化等均可增加本病的严重程度。与其它禽病如霉形体病传染性支气管炎、传染性喉气管炎等混合感染可加重病程，增加死亡率，不同日龄的鸡群混养也常导致本病的爆发。   
临床症状： 潜伏期短，通常为1～3天。病鸡较明显的症状是颜面肿胀，鼻腔和鼻窦内有浆液性粘液性分泌物，结膜炎，一侧眼眶周围组织肿胀，严重的造成失明，肉髯明显水肿，上呼吸道炎症蔓延到气管和肺部时，呈现呼吸困难和杂音。成年鸡病初厌食，闭目似睡，不愿走动，流浆性鼻液，而后眼睑和面部出现一侧性或两侧性水种，鼻腔内有脓性分泌物。育成鸡主要表现开产延迟，幼龄鸡生长发育受阻。产蛋鸡群在发病后约5～6天，产蛋量明显下降，处在产蛋高峰期的鸡群产蛋量下降更加明显，可由70％降至20％～30％，一般平均下降25％左右。在本病的发生早期鸡只很少死亡，但当全群精神状态好转，产蛋量开始回升时，鸡群死淘率增加。病程一般为4～18天，死亡率约为20％，并发其它病时，死亡率增加。
病理变化： 主要病理变化是鼻腔和窦发生急性卡他性炎症，粘膜充血肿胀，表面有大量粘液及炎性渗出物凝块。严重时气管粘膜也有同样的炎症，偶尔发生肺炎和气囊炎。眼结膜充血发炎。面部和肉髯的皮下组织水肿。病程较长的病鸡，可见鼻窦、眶下窦和眼结膜囊内蓄积干酪样物质，蓄积过多时常使病鸡的眼显著肿胀和向外突出，严重的引起巩膜穿孔和眼球萎缩破损，眼睛失明。
试探用药：传鼻用SMM效果最好，头孢类、链霉素都赶不上。