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粪便检验用于诊断寄生虫病,了解消化器官的功能、有无炎症、出血或其他病理变化。
一、粪便的采集
1.新鲜:粪便检验必须采集新鲜未被污染的粪便(最好是刚排便后,未与地面接触的部分),然后盛于洁净容器内。
2.量:依试验所需而定。
3.采取好的粪便,最好立即送检。当天不用的,应放在阴凉处。
二、粪便物理学检验
主要包括粪便的颜色、气味、异常混合物等。
1.颜色 因饲料种类、疾病、所服药物等不同而有所不同。如黄色、白色、绿色、黄白色、黄绿色、棕色、灰色、灰褐色等。
2.气味 猪粪较臭,但当消化不良时,由于肠内容物的腐败发酵,而带有酸臭或腐败臭。鸡粪一般无难闻的臭味。
3.异常内容物
(1)粘液 正常的粪便表面有极薄的粘液层。粘液量越多,表示肠管有炎症或排粪迟缓。
(2)伪膜 由纤维蛋白、上皮细胞和白细胞所组成,多见于纤维素性或伪膜性肠炎。
如仔猪副伤寒、鸡坏死性肠炎等。
(3)脓汁 多见于直肠内脓肿破溃。
(4)未消化的饲料 当消化不良及发生其他病时,在粪便中带有未消化的饲料。
(5)血液 如猪痢疾、胃肠出血、出血性肠炎、猪瘟、鸡球虫病、鸡组织滴虫病等。
(6)寄生虫或虫卵 如蛔虫、绦虫、球虫等。
三、粪便的化学检验
(一)、酸碱度的测定
1.试纸法 取粪2—3g,置于试管内,加中性蒸馏水8—10ml,混匀,用广谱试纸测定其PH值。
2.试管法 取粪2—3g,置于试管内加中性蒸馏水4—5倍水,混匀。置37度温箱或室温中6—8h,如上层液透明清亮,为酸性;如液体混浊,颜色发暗,为碱性。
猪、禽的粪为弱碱性。
(二)、蛋白质检查
试剂
1.20%醋酸液。
2.20%三氯醋酸液。
3. 7%氯化高汞液。
方法
1.取粪3g,置研钵中,加蒸馏水100ml,适当研磨,使成3%粪乳状液。
2. 取中试管4支,编号,放在试管架上。按下表进行。
表
试管号 1 2 3 4
| 3%粪乳状液 15 15 15 15
试剂 20%醋酸液 20%三氯醋酸液 7%氯化高汞液 蒸馏水
2 2 2 2
| 混匀后,静置24h,观察上清液的透明度,与对照管比较
| 透明—有粘蛋白 透明—有渗出的 透明—有渗出的血
结果判定 浑浊—无渗出的 血清蛋白或核蛋白 清蛋白或核蛋白 对照管
血清蛋白 红棕色—有粪胆素
绿色—有胆红素
|
临床意义 1.可用来判断胃肠有无炎症。正常家畜的粪便中,一般只含有极少量的蛋白,对一般蛋白沉淀剂不呈明显反应。当胃肠有炎症时,粪中有血红蛋白渗出,上述试验为阳性反应。
2.健康家畜粪便中没有胆红素,仅有少量的粪胆素。当小肠炎症及溶血性黄疸时,粪中可能出现胆红素,粪胆素也增多;阻塞性黄疸时,粪中可能没有粪胆素。
四、粪便显微镜检查
(一)、标本的制备
粪便直接显微镜检查涂片是临床常规检验项目。可以从中发现病理成分,如各种细胞、寄生虫卵、真菌、细菌、原虫等,并可通过观察各种饲料残渣以了解消化吸收功能。为此,必须熟悉这些成分的形态。
一般采用生理盐水涂片法,以竹签直接挑取粪便中可疑的部分,置于载玻片上,加少量生理盐水,涂成薄片,厚度以能透视纸上字迹为度,加盖玻片,先用低倍镜观察全片有无虫卵、原虫包囊、寄生虫幼虫及血细胞等,再用高倍镜详细检查病理成分的形态及结构。
(二)、饲料残渣检查
1.植物细胞 形态多样性,呈螺旋形、网状、花边形、多角形或其他形态。临床上一般无意义。
2.淀粉颗粒 一般为具有同心环纹或不规则放射线纹的大小不等的圆形、椭圆形或多角形颗粒,无色,具有一定折光性。滴加碘液后呈未消化的淀粉颗粒呈蓝色,部分水解的则呈棕红色。粪中若大量发现,则表示消化机能障碍。
3.脂肪球和脂肪酸结晶 粪便中的脂肪有中性脂肪、游离脂肪酸和结合脂肪酸三种形式,中性脂肪亦即脂肪小滴,呈大小不一圆形折光性强的小球状。脂肪酸为片状、针束状结晶,加热溶化,如苏丹Ⅲ染为红色。
粪中见到大量脂肪球和脂肪酸结晶,为摄入的脂肪不能完全分解和吸收,或胆汁及胰液分泌不足。
(三)、体细胞的检查
粪中的体细胞,包括白细胞、脓细胞、吞噬细胞、红细胞 上皮细胞。(见图12-6)由于粪中的细胞在粪渣涂片上分布不匀,差别较大,故粪中细胞计数意义不大。在此不再赘述。
五、粪便中寄生虫与虫卵的检查
(一)、虫卵检查法
1.直接涂片检查法 先在载玻片上滴一些甘油与水的等量混合液,再用火柴棒或牙签挑取少量粪便加入其中,混匀,夹去较大的或过多的粪渣,最后使玻片上留有一层均匀的粪液,其浓度的要求是将此玻片放于报纸上,能通过粪便液膜模糊地辨认其下的字迹为合适。在粪膜上盖上盖玻片,置显微镜下观察。
2.饱和盐水漂浮法 分为三种。
(1)取粪便10g,加饱和盐水100ml,混合,通过60目铜筛,滤入烧杯中,静置0.5h,则虫卵上浮;用一直径5—10mm的铁丝圈,与液面平行接触以沾取表面液膜,拌落于载玻片上检查。此法适宜于检查线虫卵。
(2)取粪便1g,加饱和盐水10ml,混匀,筛滤,滤液注入试管中,补加饱和盐水溶液使试管充满,上覆以盖玻片,并使液体与盖玻片接触,其间不留气泡,直立0.5h后,取盖玻片,覆以载玻片上检查。
在检查比重较大的后圆线虫时,则可先将猪粪按沉淀法操作,取得沉渣后,在沉渣中加入饱和硫酸镁溶液,进行漂浮,收集虫卵。
(3)取被检粪便2g置于平口试管中,加饱和盐水少许,用玻棒将粪便捣碎混匀,再加饱和盐水将满,改用滴管加至液面凸出于管口,但不溢出为止。静置30min后,用玻片轻触液面,迅速提起翻转,盖上盖玻片,显微镜下检查虫卵。
附饱和盐水的配制:1000ml水中加380—400g食盐,边加热边搅拌,直至完溶解,然后过滤,备用,比重为1.18。
3.沉淀法 取粪便5g,加清水100ml以上,搅匀成粪液,通过60—80目筛过滤,滤液收集于三角烧瓶或烧杯中,静置沉淀20—40min,倾去上清液,保留沉渣,再加水混匀,再沉淀,如此反复操作直到上层液体透明清亮为止,吸取沉渣检查。此法特别适宜用于检查吸虫卵。
(二)、虫卵计数法
1.司徒尔氏法 用特制的三角烧瓶(或普通三角烧瓶),如右图,容量为65ml左右,在烧瓶的颈部相当于56和60ml处有两个刻度各作一标记。先把0.4%NaOH溶液倒入瓶内至56ml处,再慢慢地加入粪便,到液面上升到60ml处,然后放进玻璃珠10余颗,用橡胶塞塞紧瓶口,充分摇动,使其成为十分均匀的混悬液。
计数时充分摇匀,用有刻度的1ml小吸管取0.15ml粪液置于载玻片上,加盖片,在低倍镜下计算全片的虫卵数。因0.15ml粪液中实际含原粪量0.15*4/60=0.01g,因此,所得虫卵总数乘以100即为每克粪便中的虫卵数。本法适用于大部分蠕虫卵的计数。
2.麦克马斯特氏法
本法是将虫卵浮集于一个计数室中。计数室是由二片载玻片制成。制作时为了使用方便,常将其一片切去一条,使之较加一片窄一些。在较窄的玻片上刻以1cm见方的刻度两个,而后选取厚度1.5mm的玻片切成小条垫于两玻片间,以环氧树脂粘合。
方法:取粪便2g,放于乳钵中,先加水10ml,摇匀,再;加饱和盐水50ml。混匀后,吸取粪液,注入计数室,置显微镜台上,静置1—2min。而后在镜下计数1cm2刻度中的虫卵总数;求两个刻度室中虫卵数的平均数,乘以200棘为每克粪便中的虫卵数。本法只适用于可被饱和盐水浮起的各种虫卵。 |