用这个方法看病能好点

巨头 · 发表于 2008-4-24 12:09:32

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药敏试验方法
一、药敏片的准备
1、药敏片的制备：取定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片，取圆纸片每100片为一包，放入烧杯中，用报纸封口，放在高压灭菌锅内121℃灭菌15-20分钟后，放在电热恒温箱中，使完全干燥。
2、药液的制备（用于商品药的试验）：按商品药治疗量20倍比例配制药液；如治疗量为100g药兑水200kg，配制药液时就是0.01g药加1ml水。取药品0.01g放入平皿内，加入1ml水，使药品全部溶解，然后放入100片药敏片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂，用摄子把药敏片平铺于平皿内，放入培养箱内置37℃烘干，然后放入灭菌的空青霉素瓶内，在瓶上记录药物名称，放在冰箱内冷藏备用，有效期3-6个月。
备注：2项操作全过程应在酒精旁操作。
二、普通营养琼脂培养基的制备
市场上有配制好的普通营养琼脂培养基粉，按说明取用适量的培养基粉，加入蒸馏水，边加热边搅拌，使之溶化，溶化后，用电炉子加热至煮沸，倾注到洗净干燥后的空吊瓶中，放入高压灭菌锅内121度灭菌15—20分钟，取出使用或放入4℃冰箱中备用。琼脂平板的制备：把制备好的营养琼脂（如已凝固的应先熔化）倾注到灭菌的平皿内，厚度约5—6mm，冷却使凝固。
三、细菌培养物的制备
对病死畜禽解剖时，用镊子、手术刀等在酒精火焰上烧烙，切取肝、脾、心脏等器官一小块，使用新鲜创面在培养基上涂满，倒置。
四、药敏纸片的粘贴
将镊子于酒精灯火焰上灭菌后略停，取市购的药敏片贴到培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻轻按压几下药敏纸片。每个培养皿所用药敏纸片的数量和分布可根据培养皿的大小确定，一般采用中央贴一片，周围等距离贴5—6片，每种药敏片的名称要记住。
五、恒温培养
将平皿培养基倒置放于37℃温箱中培养12—24小时后，观察效果。
六、结果观察
在涂有细菌的琼脂平板上，抗菌药物在琼脂内向四周扩散，其浓度呈梯度递减，因此在纸片周围一定距离内的细菌生长受到抑制。过夜培养后形成一个抑菌圈，抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性。其直径大小与药物浓度、划线细菌浓度有直接关系。
七、判定标准：
药敏实验的结果，应按抑菌圈直径大小作为判定敏感度高低的标准。

药物敏感实验判定标准
抑菌圈直径（毫米）敏感度
20以上极敏
15-20 高敏
10-14 中敏
10以下低敏
0 不敏
药物敏感实验判定标准参考表1，抑菌圈直径在15毫米以上为高敏，10毫米以下为低敏，无抑菌圈为不敏。