峪口禽业录制的血清抗体值测定技术

wav · 发表于 2010-9-5 20:48:37

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血凝抑制试验包括HA病毒抗原效价测定和HI血清抗体值测定。本期我们主要介绍HI血清抗体值测定。
一、材料与设备
1、仪器设备
配制好的4单位抗原、1％红细胞悬液、生理盐水、96孔V型板、吸头盒、积液槽、定时器、100ml量筒、10-200ul单道移液器及配套吸头、5-50ul八道移液器及配套吸头。
二、HI血清抗体值测定
1)用微量移液器向96孔V型板每个孔加入生理盐水25微升；
2)用微量移液器取被检血清25微升，放入第1孔后倍比稀释至第11孔，弃去25微升，最后一孔不稀释，为红细胞对照；
3)每孔加入4单位抗原25微升至第11孔，第12孔为红细胞对照，不加抗原；
4)置振荡器上振荡30秒，放室温静置20分钟。
5)每孔加入1%红细胞悬浮液25微升，放振荡器上振荡30~60秒，置室温反应30分钟后，记录监测结果。
6)结果判定：
以完全抑制红细胞凝集的血清的最大稀释度为该血清的HI滴度，以2的指数表示：如8*log2
①、抗体有效
鸡群产生的抗体均值在保护值以上，且低于保护值的个体所占比例小于20%，鸡群能够抵御外界病原感染。
②、抗体均匀
免后鸡群个体间抗体值差异小、集中，抗体离散度在4个滴度以内。
例如:存栏4000只的蛋鸡舍监测新城疫（ND）抗体，监测20份样品，抗体值如下。
分析：以上鸡群抗体均值9.2（8*3+9*10+10*7/20），抗体离散度为3个滴度（8、9、10），低于抗体保护值9的个体比例为15%（3/20）。检测结果评定为“优”，能够确保鸡群健康。