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(1 山东省临沂师范学院农林学院 276003 ; 2山东省郯城县畜牧局 276100)
摘 要:用茜草秧、蒲公英等11味中药组方对鸡大肠杆菌耐药菌株和非耐药菌株作体外抑菌及临诊治疗试验。结果,中药组方对两菌株都有较好的体外抑菌效果;临床治疗有效率100%,治愈率达96%以上。
关键词:中药;鸡大肠杆菌;耐药性;菌株
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验药物:中药组方由茜草秧、黄芪、地芋、白术、苦参、穿心莲、白芍、大青叶、蒲公英、茯苓、白头翁11味中药组成(购于临沂市医药公司药材供应站)。按配方比例称量粉碎,混匀。庆大霉素、环丙沙星由临沂市畜牧兽医技术服务中心提供。
1.1.2 药敏试纸:购自山东农业大学动物科技学院兽医药理教研室(批号05.12.8)
1.1.3 试验菌种:采自发病鸡场。根据临床症状、病理剖检、细菌培养鉴定为大肠杆菌。并经药敏试验筛选出敏感菌和不敏感菌,分别定为Ⅰ号大肠杆菌和Ⅱ号大肠杆菌,动物回归试验确定为致病性大肠杆菌。
1.1.4 试验药液的制备:取中药10g,加水1000mL, 煮沸30min取汁,余药再加水稀释至800mL,煮沸20min取汁,将两次药液混合加热浓缩,使每毫升含生药1g。
1.1.5 受试动物:临沂农校郯南基地养鸡场22日龄健康AA商品肉仔鸡300只,随机分为10组,每组30只,受试期间饲养管理条件一致。
1.2 试验方法
1.2.1 中药组方体外抑菌试验按《养禽场禽病检验手册》细菌对药物敏感性测定方法进行。
1.2.2 试验分组
Ⅰ组为空白对照组:不感染不给药;
Ⅱ组为Ⅰ号大肠杆菌阳性对照组:感染不给药;
Ⅲ组为Ⅱ号大肠杆菌阳性对照组:感染不给药;
Ⅳ组为Ⅰ号大肠杆菌中药混饲组:接种Ⅰ号大肠杆菌使其发病后,用1%中药混饲;
Ⅴ组为Ⅰ号大肠杆菌庆大组:接种Ⅰ号大肠杆菌发病后,用庆大霉素1IU /只饮水, 2次/d;
Ⅵ组为Ⅰ大肠杆菌环丙沙星组:接种Ⅰ号大肠杆菌发病后,用0.5%的环丙沙星饮水给药;
Ⅶ组为Ⅱ号大肠杆菌中药组:接种Ⅱ号大肠杆菌发病后,用1%中药混饲给药;
Ⅷ组为Ⅱ号大肠杆菌庆大组:接种Ⅱ号大肠杆菌发病后,用庆大1IU/只饮水给药,2次/d;
Ⅸ组为Ⅱ号大肠杆菌环丙沙星组:接种Ⅱ号大肠杆菌发病后,用0.5%环丙沙星饮水;
Ⅹ组为安全试验组:不感染,按中药使用剂量的8倍给药混饲。
1.2.3 人工感染 除对照组及安全试验组外,按组每鸡皮下注射Ⅰ号大肠杆菌或Ⅱ号大肠杆菌悬液0.5mL,活菌数不少于5×10[sup]8[/sup]个/mL。
1.2.4 治疗 感染大肠杆菌8h后,按各组设计用药剂量、途径。连续用药4d,停药观察3d。用药期间每日观察各组鸡临诊症状情况,记录死亡鸡数,剖检确定死因。试验结束后,Ⅰ组鸡与Ⅹ组鸡全部剖杀,记录病变情况。
1.2.5 疗效判定标准 治愈:经治疗而症状消失,粪便、饮食欲及精神恢复正常;有效:症状明显减轻,粪便、精神、饮食欲有好转;无效或死亡:经治疗其症状无好转或死亡,剖检有明显的心包炎,肝包膜炎病变。
2 结果与分析
2.1 抑菌效果 中药组方对耐抗生素和不耐抗生素的大肠杆菌均有较好的体外抑菌作用。结果见表1。
表1 药物敏感试验结果(抑菌直径) mm
菌号
| 青霉素
| 链霉素
| 庆大霉素
| 卡那霉素
| 痢菌净
| 氟哌酸
| 氨苄青霉素
| 阿莫西林
| 头孢拉啶
| 环丙沙星
| 恩诺沙星
| 强力霉素
| 中药煎剂
| Ⅰ
| 0
| 0
| 20
| 19
| 10
| 0
| 0
| 0
| 16.5
| 20.5
| 13.4
| 0
| 19.2
| Ⅱ
| 0
| 0
|
| 0
| 6
| 0
| 0
| 0
| 0
| 3
| 11.2
| 5
| 20
| 2.2 治疗结果 人工感染大肠杆菌8h后,各感染组雏鸡精神沉郁,怕冷挤堆,闭目嗜睡,饮食减少。用药后第2d,Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ4组鸡病情较快得到控制,症状逐渐减轻,活动增加,大部分鸡饮食欲恢复;而Ⅱ、Ⅲ、Ⅷ、Ⅸ4组鸡病情进一步恶化,怕冷挤堆,饮食欲继续减退或不食,重者翅下垂,呆立或静卧,病情严重者已见死亡。停药后观察3d。治疗效果见表2。
表2 鸡大肠杆菌治疗效果统计
组别
| 治愈
| 有效
| 无效(含死亡)
| 治愈率(%)
| 有效率(%)
| Ⅰ组
| 0
| 0
| 0
| -
| -
| Ⅱ组
| -
| -
| 30(16)
| -
| -
| Ⅲ组
| -
| -
| 30(14)
| -
| -
| Ⅳ组
| 29
| 1
| 0
| 96.7
| 100.0
| Ⅴ组
| 28
| 1
| 1(1)
| 93.3
| 96.7
| Ⅵ组
| 29
| 1
| 0
| 96.7
| 100.0
| Ⅶ组
| 30
| 0
| 0
| 100.0
| 100.0
| Ⅷ组
| 0
| 4
| 26(14)
| 0
| 13.3
| Ⅸ组
| 0
| 8
| 22(15)
| 0
| 26.7
| Ⅹ组
| 0
| 0
| 0
| -
| -
| 敏感药物对大肠杆菌的治愈率无显著差异(P>0.05),说明中药对耐药菌株和敏感菌株都有较好治疗作用,与庆大、环丙沙星等常用抗生素治疗效果无差异。大肠杆菌对庆大、环丙沙星不敏感的鸡治疗作用无显著差异(P>0.05),而Ⅷ、Ⅸ组与Ⅶ组之间治疗效果差异极显著(P<0.01)。这说明中药对抗生素产生耐药性的菌株仍有较好的治疗作用。而庆大、环丙沙星对其有耐药性的菌株治疗效果极差,其治愈率与Ⅱ、Ⅲ组差异不显著(P>0.05)。
2.3 安全试验结果 8倍量给药的鸡,未发现任何不良反应,观察各脏器无异常变化,安全试验组与空白对照组间也无肉眼可见的差异。主要器官组织切片亦未见异常变化,说明该药有效安全。
3 小结与讨论
3.1 中药组方对耐药菌株和非耐药菌株都有较好的抑菌作用。
3.2 中药组方对抗生素有耐药性的大肠杆菌或无耐药性的大肠杆菌引起的腹泻症都有极好的治疗作用。治愈率达96%以上,有效率达100%。
3.3 Ⅱ号大肠杆菌对庆大霉素不敏感,而治疗试验结果有13.3%的有效率,可能与庆大用药剂量较大有关。
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