【求助】急！黏膜免疫如何取组织粘液检测IgA?

花花0415

我最近要做黏膜免疫的实验，在鸡体进行滴鼻免疫，使用的是DNA疫苗以及用生物材料包裹DNA所制备的纳米粒进行免疫

回头的检测指标要检测IgA抗体，我有IgA的ELISA试剂盒

但是因为我不是学免疫学的，对这个方面了解欠缺，所以不知道如何取鸡体内的组织粘液进行检测

迫切希望广大友人多加指点，除了血清，我还可以取什么的组织液啊？？？？？？要怎么获取这些组织液？？？

花花0415

没有人知道大概的么？？欲哭无泪啊~~~~
为了这个试验设计，已经绞尽脑汁，焦头烂额好久了……
拜托大家~~~~

fei2176

取实质器官研磨后取其上清液

花花0415

意思就是比如我想要肠粘液，就是取小肠，进行研磨，离心要上清呗？

花花0415

我后来又想了一下，这把组织研磨了，得到的是组织块啊，我只想要外边的粘液，莫非剪一段小肠然后浸泡在PBS中？

问心无愧

首先，使用的ELISA试剂盒必须是进口的，价格昂贵，中国目前没有这个。
第二，检测IgA属于专家教授的科学研究才做，单凭一个一般水平的实验室根本做不到。
第三，即便是搞研究的中国著名专家也是常常检测失败。
第四，如果你非要做，那就只能刮去肠道和呼吸道的粘膜。才能检测IgA.
第五，检测IgA对于评价家禽的抗体没有意义。IgA在抗体中起到多大作用，目前没有确定。

所以，劝你放弃，没有意义。

noah

个人观点：1 DNA疫苗免疫效果不是很好，它通过在体内转录翻译为蛋白片段来进行免疫，而且蛋白量的多少不好说，进而免疫效果也不好说，更说明一下，此免疫以体液免疫为主。
2 不知道你用的国产还是进口的盒子，你要确定它的检测限，国外会好一些，但是也不定能检出，建议最好用流式细胞仪检测。
3 获得IGA最好给鸡注射一种刺激哈德氏腺和上呼吸道黏膜分泌的药物。然后获取粘液来进行检测。