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张秀美,王莉莉,艾武,牟建青,黄兵,李峰,宋敏训
(山东省农业科学院家禽研究所,济南250023) 摘要:4株不同毒力鸡传染性法氏囊病(IBD)活疫苗,分别接种30dSPF公雏,4d后再接种鸡新城疫(ND)Lasota系活疫苗,同时每组捕杀5只,观察法氏囊损伤情况;另4组用同1d的SPF公雏,先接种ND-Lasota系疫苗,4d后再接种不同毒力的IBD疫苗。试验结果表明,4株IBD活疫苗对雏鸡法氏囊均有不同程度损伤,并且对ND免疫抗体产生有明显抑制作用。
关键词:IBD活疫苗;SPF鸡;ND抗体
本试验选用几种法氏囊活疫苗免疫SPF鸡,并在此前和此后免疫鸡ND活疫苗,观察不同毒力疫苗对法氏囊的损伤程度和对鸡ND抗体水平的影响,为合理的制定免疫程序提供理论依据。
1材料与方法
1.1试验用疫苗 IBDV-MB43,以色列ABIC大药厂生产,批号:2.14211.1;IBDV-228E,英特威(香港)有限公司提供,批号:110286C;IBDV-3,美国富道动物保健提供,批号:29604L;IBDV-B87,齐鲁动物保健品厂提供,批号:9910;ND-Lasota系活疫苗由齐鲁动物保健品厂提供,批号:9910。
1.2强毒株 IBD组织毒,采自45d人工感染发病的SPF鸡,本室提供。
1.3试验鸡 30dSPF公雏,本所禽病室提供。
1.4试验分组 将120只SPF鸡随机分两舍饲养,每舍各分成4组,共8组。第1~4组鸡先免疫不同毒力的IBD活疫苗,4d后再免疫ND-Lasota系活疫苗;第5~8组鸡先免疫ND-Lasota系活疫苗,4d后再免疫不同毒力的IBD活疫苗。第9组为空白对照组,饲养在SPF鸡舍内,试验结束时取出,采血测ND、IBD抗体水平,并用IBDV强毒攻击。
1.5囊指数测定 免疫IBD疫苗4d后,第1~4组每组剖杀5只鸡,观察法氏囊病变,计算囊指数:
囊指数(B/W)=囊重(g)/体重(g)×1000
1.6抗体检测8组试验鸡分别于免疫ND疫苗后第4d,7d,14d和20d检测ND-HI抗体;攻毒前检测IBD-AGP抗体。
1.7攻毒取45日龄人工感染发病的SPF鸡病变明显的法氏囊组织,研磨后冻融3次,3000r/min离心20min,取上清用生理盐水以1∶20稀释,每只鸡经滴鼻点眼接种0.2mL,连续7d观察记录其发病死亡情况。
2试验结果
2.1第1~4组鸡,免疫IBD活疫苗4d后,其法氏囊均有不同程度的损伤,见表1。
表1 免疫鸡法氏囊损伤情况 | 组别 | 试验鸡数(只) | (B/W) | 囊出血数(个) | 1 | MB[sub]43[/sub] | 5 | 5.69 | 4 | 2 | 228E | 5 | 5.89 | 2 | 3 | IBD-3 | 5 | 6.49 | 5 | 4 | B[sub]87[/sub] | 5 | 6.86 | 2 | 5 | 对照 | 5 | 7.27 | 0 |
2.2第1~4组鸡免疫抗体产生时间明显滞后于第5~8组鸡。见表2。
表2 不同免疫程序ND抗体水平测定结果 | 组别 | ND-HI抗体滴度(GMT,log2) | 免疫前 | 4d | 7d | 14d | 20d | 24d | 1 | MB43 | 0 | 0 | 5.0 | 7.6 | 6.8 | -[sup]A[/sup] | 2 | 228E | 0 | 0 | 3.9 | 8.4 | 6.8 | - | 3 | IBD-3 | 0 | 0 | 6.4 | 7.0 | 7.4 | - | 4 | B87 | 0 | 0 | 6.4 | 6.8 | 7.0 | - | 5 | MB43 | 0 | 6.2 | 6.8 | 6.6 | 6.4 | 6.4 | 6 | 228E | 0 | 5.5 | 6.5 | 7.6 | 7.0 | 6.5 | 7 | IBD-3 | 0 | 6.8 | 7.0 | 8.1 | 6.3 | 6.0 | 8 | B87 | 0 | 6.7 | 6.5 | 6.4 | 6.4 | 5.8 | 9 | 对照 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
2.3试验鸡在免疫法氏囊活疫苗20d后采血检测IBD抗体水平,同时用IBD强毒攻击。见表3。
表3 IBD抗体水平及攻毒结果 | 组别 | IBD-AGP抗体 | 攻毒结果 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | (攻毒数/死亡数) | 1 | MB43 | 1:16 | 1:64 | 1:32 | 1:32 | 1:32 | 10/0 | 2 | 228E | 1:32 | 1:64 | 1:16 | 1:64 | 1:64 | 10/0 | 3 | IBD-3 | 1:1 | 1:1 | 1:1 | 1:2 | 1:4 | 10/0 | 4 | B87 | 1:32 | 1:16 | 1:16 | 1:16 | 1:8 | 10/0 | 5 | MB43 | 1:64 | 1:64 | 1:64 | 1:32 | 1:32 | 10/0 | 6 | 228E | 1:32 | 1:64 | 1:32 | 1:8 | 1:16 | 10/0 | 7 | IBD-3 | 1:2 | 1:1 | 1:2 | 1:4 | 1:4 | 10/0 | 8 | B87 | 1:32 | 1:16 | 1:8 | 1:8 | 1:16 | 10/0 | 9 | 对照 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 5/5 |
3小结与讨论
3.1IBDV主亲嗜未成熟的B淋巴细胞,使B淋巴细胞受损,从而导致鸡群发病或对其它致病因子的易感性增强。IBDV引起的免疫抑制严重地造成鸡只对其它疫苗的免疫应答能力降低。本试验结果表明,目前山东省临床常见的几种IBD活疫苗对免疫鸡的法氏囊均有不同程度的损伤。因此,对于雏鸡的IBD活疫苗免疫,人们不得不考虑其生物安全问题。
3.2第1~4组试验结果表明,4种不同毒力的IBD活苗对ND抗体水平的产生均有明显影响,ND-HI抗体产生时间至少滞后3d以上,但对抗体滴度的高低无太大影响。这说明上述疫苗对法氏囊的损伤是可以恢复的,仍可发挥其正常功能。
3.3从囊指数可以看出,本试验所使用的4种疫苗中,MB43和228E毒力偏强,B87和IBD-3毒力则相对较弱。用IBD活苗免疫20d后,检测各组鸡只IBD-AGP抗体,结果MB43、228E组的抗体水平明显高于B87和IBD-3免疫组,差异显著。这些结果表明IBD活疫苗的毒力强弱能够影响鸡体特异性抗体产生水平。
3.4试验结果提示我们,雏鸡ND活疫苗免疫应先于IBD活苗免疫之前进行;在用中等毒力或中等以上毒力的法氏囊疫苗免疫鸡群后,最好间隔1周再进行其他疫苗的免疫。
3.5试验采用滴鼻点眼方法接种4种法氏囊活疫苗,免疫3周后,攻毒鸡群得到百分之百保护,免疫效果确实。
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