MS检测结果的一些疑问

丽晶

一批34周的产蛋鸡，MS25周ELISA抗体检测阳性，33周有付关节肿胀的，关节液为黄色脓性，PCR检测为MS阴性，甘露醇琼脂培养有金黄色菌落生长。疑问1:ELISA抗体阳性代表什么？鸡群感染了MS？疑问2:若感染了MS，为什么33周做疾病检测的时候，PCR做出来的是阴性？

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常老师1

看抗体检测结果一定要了解是否用过疫苗？根据11周阳性率不高的结果，应该是没接种疫苗。从11，25，33周阳性率逐渐增加的趋势，应该是自然感染了。
一般情况下，微生物感染后抗体的保留时间比抗原的保留时间长。如果想检测到抗原核酸，建议把采样时间提前到11～25周之间。
MS继发或并发金葡菌很常见。你看

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常老师1

你看到的严重关节肿胀应该是金葡菌所致。

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tsmc

疑问1:  ELISA抗体阳性代表什么？鸡群感染了MS？

1.ELISA结果阳性代表：被检测鸡群曾经或者正在被MS感染；或者这个鸡群采样前做过MS疫苗免疫。

2.在做抗体之前，你需要明确你做抗体的目的是啥。如果你想知道这个鸡群是不是被MS感染了，那么你需要明确这个鸡群是不是免疫过MS疫苗，如果没有免疫过，那么抗体指标阳性就是说明该鸡群正在或者已经被MS感染。

疑问2: 若感染了MS，为什么33周做疾病检测的时候，PCR做出来的是阴性？

1.分子检测MS病原的方法很多，比如传统PCR，荧光定量PCR，以及环介导等温扩增法（LAMP）等。这些方法各有特色，但在检测的时候需要阴阳性对照，以及单个样品重复3-5次，才能确定样品究竟是阴性还是阳性。

2.另外，样品的采集、保存、处理，以及引物的设计和反应条件均会影响检测结果。

疑问 3：甘露醇琼脂培养有金黄色菌落生长

1.分离培养MS需要专门的培养基，可以购买商品化的，也可以自己制备，但都含有抗生素，目的是抑制细菌的生长，但不影响MS的生长。你用的培养基居然能长出金黄色菌落，这说明你的培养基有问题。

2.一般常用来分离MS的培养基是“弗雷培养基”，含有灭活的马/猪血清（15%），酵母提取物（2.5%），葡聚糖（0.3%），醋酸铊（0.05%），青霉素G（200IU/ml），酚红（0.002%）和胱氨酸盐酸盐（0.01%）。

小浩浩

常老师1 发表于 2022-10-22 14:38
看抗体检测结果一定要了解是否用过疫苗？跟据11周阳性率不高的结果，应该是没接种疫苗。从11，25，33周阳性率逐渐增加的趋势，应该是自然感染了。
一般情况下，微生物感染后抗体的保留时间比抗原的保留时间长。如果想检测到抗原核酸，建议把采样时间提前到11～25周之间。
MS继发或并发金葡菌很常见。你看

谢谢常老师的回复，22周注射过易邦的支原体灭活苗

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tsmc

单看你的抗体结果（抗体水平高，离散度低），有可能是MS感染。

如果想做分子鉴定，最好同时取口咽棉拭子、泄殖腔棉拭子以及关节液棉拭子样品，进行PCR鉴定。在做PCR的时候，一定要有对照，一定要有重复，否则说服力不强。

小浩浩

tsmc 发表于 2022-10-22 15:29
疑问1:  ELISA抗体阳性代表什么？鸡群感染了MS？

1.ELISA结果阳性代表：被检测鸡群曾经或者正在被MS感染；或者这个鸡群采样前做过MS疫苗免疫。

2.在做抗体之前，你需要明确你做抗体的目的是啥。如果你想知道这个鸡群是不是被MS感染了，那么你需要明确这个鸡群是不是免疫过MS疫苗，如果没有免疫过，那么抗体指标阳性就是说明该鸡群正在或者已经被MS感染。

疑问2: 若感染了MS，为什么33周做疾病检测的时候，PCR做出来的是阴性？

1.分子检测MS病原的方法很多，比如传统PCR，荧光定量PCR，以及环介导等温扩增法（LAMP）等。这些方法各有特色，但在检测的时候需要阴阳性对照，以及单个样品重复3-5次，才能确定样品究竟是阴性还是阳性。

2.另外，样品的采集、保存、处理，以及引物的设计和反应条件均会影响检测结果。

疑问 3：甘露醇琼脂培养有金黄色菌落生长

1.分离培养MS需要专门的培养基，可以购买商品化的，也可以自己制备，但都含有抗生素，目的是抑制细菌的生长，但不影响MS的生长。你用的培养基居然能长出金黄色菌落，这说明你的培养基有问题。

2.一般常用来分离MS的培养基是“弗雷培养基”，含有灭活的马/猪血清（15%），酵母提取物（2.5%），葡聚糖（0.3%），醋酸铊（0.05%），青霉素G（200IU/ml），酚红（0.002%）和胱氨酸盐酸盐（0.01%）。

我们当时检测病料时，用PCR测MS为阴性用营养琼脂，伊红美蓝，高盐甘露醇划线，伊红美蓝没长菌落，营养琼脂和甘露醇长了

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小浩浩

tsmc 发表于 2022-10-22 15:29
疑问1:  ELISA抗体阳性代表什么？鸡群感染了MS？

1.ELISA结果阳性代表：被检测鸡群曾经或者正在被MS感染；或者这个鸡群采样前做过MS疫苗免疫。

2.在做抗体之前，你需要明确你做抗体的目的是啥。如果你想知道这个鸡群是不是被MS感染了，那么你需要明确这个鸡群是不是免疫过MS疫苗，如果没有免疫过，那么抗体指标阳性就是说明该鸡群正在或者已经被MS感染。

疑问2: 若感染了MS，为什么33周做疾病检测的时候，PCR做出来的是阴性？

1.分子检测MS病原的方法很多，比如传统PCR，荧光定量PCR，以及环介导等温扩增法（LAMP）等。这些方法各有特色，但在检测的时候需要阴阳性对照，以及单个样品重复3-5次，才能确定样品究竟是阴性还是阳性。

2.另外，样品的采集、保存、处理，以及引物的设计和反应条件均会影响检测结果。

疑问 3：甘露醇琼脂培养有金黄色菌落生长

1.分离培养MS需要专门的培养基，可以购买商品化的，也可以自己制备，但都含有抗生素，目的是抑制细菌的生长，但不影响MS的生长。你用的培养基居然能长出金黄色菌落，这说明你的培养基有问题。

2.一般常用来分离MS的培养基是“弗雷培养基”，含有灭活的马/猪血清（15%），酵母提取物（2.5%），葡聚糖（0.3%），醋酸铊（0.05%），青霉素G（200IU/ml），酚红（0.002%）和胱氨酸盐酸盐（0.01%）。

用甘露醇的目的是看是否有葡萄球菌，而不是看MS

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tsmc

明白你的意思。

高盐甘露醇---葡萄球菌

伊红美蓝----大肠杆菌

营养琼脂---常见细菌

但是，这样划线意义不大，即使长出细菌，你依然无法客观的判定病原。

回到你的问题，你既然免疫过MS，那么你现在做MS抗体的意义是什么？看看疫苗的免疫效果吗？

为什么做PCR呢，说明你怀疑MS感染，既然你怀疑，为什么不做MS病原分离呢？

小浩浩

tsmc 发表于 2022-10-22 15:47
单看你的抗体结果（抗体水平高，离散度低），有可能是MS感染。

如果想做分子鉴定，最好同时取口咽棉拭子、泄殖腔棉拭子以及关节液棉拭子样品，进行PCR鉴定。在做PCR的时候，一定要有对照，一定要有重复，否则说服力不强。

阴性阳性对照是有的。没去重复做，重复做的成本太高了

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tsmc

小浩浩 发表于 2022-10-22 16:06
阴性阳性对照是有的。没去重复做，重复做的成本太高了

根据你的描述可以推测，你应该是怀疑鸡群感染了MS，所以你的首要任务是确定你的判断对不对！

既然你借助了实验室手段，那么你最好做全面：分子水平（PCR）+细胞水平（分离培养）。PCR很便宜，一个样品不会超过3元，前提是有试剂盒。你既然做了，说明你有试剂盒。

在疾病诊断的时候，细菌培养很多时候意义不大，比如葡萄球菌是有发病条件的（如外伤等），而且几乎无处不在，所以即使检测出来，也很难确诊，还得需要毒力因子的进一步确定。

问心无愧

tsmc 发表于 2022-10-22 16:21
根据你的描述可以推测，你应该是怀疑鸡群感染了MS，所以你的首要任务是确定你的判断对不对！

既然你借 ...

很专业。

王日田

tsmc 发表于 2022-10-22 16:21
根据你的描述可以推测，你应该是怀疑鸡群感染了MS，所以你的首要任务是确定你的判断对不对！

既然你借助了实验室手段，那么你最好做全面：分子水平（PCR）+细胞水平（分离培养）。PCR很便宜，一个样品不会超过3元，前提是有试剂盒。你既然做了，说明你有试剂盒。

在疾病诊断的时候，细菌培养很多时候意义不大，比如葡萄球菌是有发病条件的（如外伤等），而且几乎无处不在，所以即使检测出来，也很难确诊，还得需要毒力因子的进一步确定。

很专业学习了

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佐君畜牧-刘典佐

疑问1: ELISA抗体阳性代表什么？鸡群感染了MS？

1.ELISA抗体阳性代表着你的鸡群已经产生了MS抗体！有两种情况:1是被检测鸡群曾经或者正在被MS感染；2是这个鸡群已经做过MS疫苗免疫，而且这种疫苗已经产生了抗体。你22周龄时已经免过MS疫苗，那抗体出现阳性就不足为奇了。而在11周龄之前所测鸡群中也出现抗体阳性，说明你的鸡群在11周龄之前已经有MS的感染！

疑问2: 若感染了MS，为什么33周做疾病检测的时候，PCR做出来的是阴性？

33周龄检测MS出现的结果是PCR阴性，说明这个鸡群的MS感染已经清除。当然也存在样品的采集、保存、处理，以及引物的设计和反应条件原因影响PCR检测结果。

疑问 3：甘露醇琼脂培养有金黄色菌落生长

33周有付关节肿胀的，关节液为黄色脓性，加上甘露醇琼脂培养有金黄色菌落生长。
说明你的鸡群的关节中存在着葡萄球菌感染的问题。

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问心无愧

佐君畜牧-刘典佐 发表于 2022-10-22 18:18
疑问1: ELISA抗体阳性代表什么？鸡群感染了MS？

1.ELISA抗体阳性代表着你的鸡群已经产生了MS抗体！有两种情况:1是被检测鸡群曾经或者正在被MS感染；2是这个鸡群已经做过MS疫苗免疫，而且这种疫苗已经产生了抗体。你22周龄时已经免过MS疫苗，那抗体出现阳性就不足为奇了。而在11周龄之前所测鸡群中也出现抗体阳性，说明你的鸡群在11周龄之前已经有MS的感染！

疑问2: 若感染了MS，为什么33周做疾病检测的时候，PCR做出来的是阴性？

33周龄检测MS出现的结果是PCR阴性，说明这个鸡群的MS感染已经清除。当然也存在样品的采集、保存、处理，以及引物的设计和反应条件原因影响PCR检测结果。

疑问 3：甘露醇琼脂培养有金黄色菌落生长

33周有付关节肿胀的，关节液为黄色脓性，加上甘露醇琼脂培养有金黄色菌落生长。
说明你的鸡群的关节中存在着葡萄球菌感染的问题。

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