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滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)感染引起鸡和火鸡传染性滑膜炎和腱鞘炎以及呼吸道症状,广泛存在于世界各地。自 2010 年以来我国鸡群中 MS 感染率不断增高,在 2010?2015 年对我国 21 省的 44 395 只非免疫鸡通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测发现 MS 能够感染任何年龄的鸡,总体流行率为 41.19%,血清阳性率在不同年份从 24.7%到 57.20%不等,2010?2015 年中国 16 个省超过 9 773个肉鸡群感染了 MS,其中 MS 在多日龄混养的中国本土种鸡中广泛流行,且 MS 在种鸡鸡胚中感染率高达 16.29%。
2018 年对宁夏石嘴山、银川、吴忠、中卫、固原 5 地区鸡MS 感染情况的调查中发现 MS 抗体总阳性率为 67.18% ,各地区抗体阳性率为46.23%?89.67%。本研究团队对 2018?2020 年福建省采集的共 2 200 余份黄羽肉鸡、蛋鸡、种鸡、本地品种鸡血清进行了 MS 抗体检测发现 MS 抗体总体阳性率超过 70%。因此,目前 MS 已广泛存在于我国不同种类的鸡群中,包括蛋鸡或种鸡、白羽肉鸡和黄鸡等。
感染过程中,不同 MS 菌株对不同组织具有不同的嗜性,从滑液囊分离的 MS 更易引起滑液囊炎,致使关节肿胀、跛行,站立困难;输卵管型菌株引起蛋壳尖端异常(Eggshell Apex Abnormalities,EAA),使产蛋鸡产蛋量下降、蛋壳质量下降、蛋破损率上升,在种鸡中感染MS则商品鸡的孵化率降低;呼吸型菌株主要造成亚临床的呼吸道疾病,本研究团队前期在福建省开展科技服务过程中发现 MS在肉鸡群中主要引起呼吸道疾病,常常与低致病性禽流感、传染性支气管炎、大肠杆菌病等形成混合感染诱发气囊炎,造成严重的经济损失。因此,MS 是目前危害养鸡业最为严重的细菌病原体之一。
本研究采用分离自上呼吸道的 MS强度FZ 株以点眼、气管注射、爪垫注射、胸部皮下注射等不同途径感染 56 日龄无特定病原体(SPF)鸡,通过临床症状和解剖病理变化观察、气管病原再分离、气管等组织病理损伤观察、感染后 MS 抗体检测比较 MS 不同感染途径对 SPF 鸡的感染能力和致病力,筛选 MS 人工感染后典型病理指征或致病力评价方法,建立 MS 人工感染 56 日龄 SPF 鸡的发病模型,以期为临床认识、诊断和有效防控 MS 在鸡群中的感染提供方法或依据。
1 材料与方法 (略)
2 结果与分析
2.1 MS 不同途径感染 SPF 鸡后临床症状及大体解剖病理变化
MS FZ 株新鲜培养物以 107CCU50/羽的剂量通过不同途径感染 56 日龄 SPF 鸡,在感染后的 20 d 整个试验过程中未发现明显的呼吸道症状,但爪垫注射感染组的鸡出现了不同程度的爪垫肿胀,发病率为 100%,在感染后 10 d 和 21 d 对肿胀的爪垫解剖发现有大量的肉芽组织增生,并出现了大量的黄色干酪样块状物质(图 1),部分还存在血红色样液体,根据肿胀程度、轻重进行评分,轻微、轻度、中度、重度分别为 1?4 分,无肿胀评为 0分,各组爪垫肿胀发生情况以及评分见表 1。
图 1 MS FZ 株以爪垫注射方式感染后与对照组爪垫损伤情况
表 1 MS FZ 株以不同方式感染 56 日龄 SPF 鸡 10 d 和 20 d 后气囊炎、爪垫肿胀、胸部囊肿发生情况及损伤评分
通过胸部皮下注射方式感染的鸡出现了严重的胸部囊肿现象,其中在感染后 10 d 时发病率为 100%,解剖后囊肿部位有大量的血红色样液体和黄色干酪样块状物质(图 2),且其余各组少数鸡也出现了轻微的胸部囊肿现象,但解剖后仅存在少量的液体,而点眼途径与其他各组相比较,在感染后 20 d 时大多数鸡(5/6)出现了轻度的胸骨囊肿现象,根据胸部囊肿程度根据轻重进行评分,轻微、轻度、中度、重度分别为 1?4 分,无囊肿评为 0分,各组胸部囊肿情况以及评分见表 1。
图 2 MS FZ 株以胸部皮下注射方式感染后与对照组胸部囊肿损伤情况
点眼和气管注射感染组在感染后 10 d 和 20 d 剖检时有不同数量的鸡出现了严重的气囊炎,其中点眼感染组在感染后 20 d 有 1 羽鸡气囊出现滤泡增多,而单次气管注射或 3次连续注射方式在感染后 10 d 时与 20 d 时相比,分别有 2 羽(2/6)和 3 羽(3/6)鸡在气囊上出现了大量的黄色块状干酪样物质(图 3)。
根据参考文献以气囊炎严重程度分别对胸气囊或腹气囊进行评分:
0 为未发现肉眼可见气囊损伤;
1 为可见淋巴滤泡病变或气囊轻度浑浊;
2 为气囊轻度增厚,通常有小的干酪样渗出物聚集;
3 为气囊明显增厚,透明度下降,有单一气囊具有大量干酪样渗出物;
4 同 3,但是气囊损伤在胸气囊或腹气囊有 2 个或 2 个以上气囊中发现,根据评分表明气管连续注射 3 次感染组在感染后 10 d 时有 50%的鸡出现了严重的气囊炎,各组气囊炎发生情况以及评分见表 1。
图 3MS FZ 株以气管注射方式感染后与对照组气囊损伤情况
MS 不同途径感染 SPF 鸡的组织病理损伤 点眼感染(G1)、胸部皮下注射感染组(G4)和阴性对照组(G6)气管组织结构正常完整,管壁分为 3 层,由内向外依次为黏膜、黏膜下层和外膜;黏膜由上皮和固有层构成,上皮为假复层柱状上皮,由纤毛细胞、杯状细胞、基细胞、刷细胞和弥散神经内分泌细胞构成;外膜正常;单次气管注射感染组(G2)和爪垫注射感染(G3)分别在感染后 10 d 和 20 d 各有 1羽鸡气管见黏膜固有层/黏膜下层轻微局灶性炎细胞浸润;但连续 3 次气管注射组(G5)在感染后 10 d 和 20 d 分别有 4 羽鸡的气管黏膜固有层/黏膜下层发生轻微至轻度灶性炎细胞浸润(4/6)(图 4)。对 G3 和 G4 组爪垫肿胀或胸骨囊肿形成的黄色干酪样块状物质及其附近病变组织进行病理学观察发现有大量的纤维组织和血管增生,同时伴有大量炎性细胞浸润,炎性细胞以单核细胞为主(图 4)。
图 4 MS FZ 株感染后气管、爪垫、胸部囊肿的病理损伤情况
作者:侯博,王晨燕,邵国青
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