禽病总论

逆境EQ

[center]禽类胃肠道的防御机制
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[center][center]罗绪刚 刘 彬?
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　?摘 要：本文重点概述了禽类胃肠道的解剖组成、胃肠道 的微生物学、非免 疫性防御机制(微生物的竞争排斥、胃肠道pH值)、免疫性防御机制和影响消化道完整性的因 素(霉菌毒素、单宁、蛋白黑素、生物胺、肌胃糜烂素、铜、疾病及氧化产物)，对于家禽生 产中预防各类胃肠道疾病，改善家禽健康，促进养禽业向高产、优质和高效益持续发展，有重要意义。

1 前言

? 禽类胃肠道可被看作是一条从口腔延伸至肛门，并能储存食物、消化和吸收养 分以 及排泄废物的柔性管道。但是，务必记住的是，进入消化道的食物从某种意义上讲仍然处于 机体之外。任何动物在其出生或孵出并与其环境接触后不久，就有特定的微生物菌群在其表 面，如皮肤、羽毛、鳞片等上繁衍，同时肠道微生物菌群建立。

? 胃肠道是由数十亿个代谢率很高的上皮细胞组成。这种高的代谢率对支持这些上皮细胞的分 泌和吸收功能所必需。尽管胃肠道在孵出之前已经在物理和功能方面得到充分发育，但仍然 不成熟。在生命的开始几周中，胃肠道的生长远远超过其它器官系统的生长。禽类的生长要 想 达到其最大遗传潜力，胃肠道的表面积就必须快速增加。在孵出后的最初5-7天中，胃肠道 的 生长超过身体其余部分的生长5倍之多。胃肠道物理、功能和免疫特征的早期发育对青年鸡 的健康及其生命的整个其余阶段都是必需的。从孵化开始，胃肠道就一直面临着化学、物理 和微生物学的挑战，因此，它已经发育出能对付这些挑战的防御体系。本文重点概述禽类胃 肠道的防御系统。

2 胃肠道的微生物学

? 自然环境下，在所有温血动物的肠道中建立微生物菌群，是不可避免的。多数 情况 下，首先建立的微生物类别，就是那些能最终定值并能在动物生命的整个成年阶段持续存在 的最终微生物的先行者。各种类别的定植细菌均对宿主胃肠道的变化很敏感。因此，胃肠道 必须提供任何将要定值微生物的生存所必需的因子。这些因子包括：适宜的温度、恒定提供 的养分和必需的液体。在这些条件下，微生物在宿主肠道提供的环境中繁衍，宿主动物则从 这些非致病性微生物菌群中得到益处。Metchnikoff(1907)是首先提出动物的肠道微生物系 统对维持其健康起关键作用的科学家之一。所以，维持微生物菌群的最优“平衡(Balance) ”，通常与宿主动物良好的健康状况相关联。

? 在饲喂平衡饲粮健康动物的消化道中有许多不同种类的微生物。肠道某些区域的一些微生物 菌群可超过1000亿个细胞/克肠内容物。即便肠道中的微生物菌群保持相对稳定，但其数量 和种类仍会受到环境条件、大量外源性物体和诸如拥挤和高温这样的应激因素的影响。这个 巨大的微生物菌群对宿主动物的组织有影响，并在营养和生理上与动物组织发生相互作用。 由于肠道对环境是开放的，故任何特定时间在肠道发现的一些微生物都仅仅是随所采食的食 物进入的暂居微生物。这些微生物只是通过消化道而不定植，且最终死亡。有时，这些暂居 类微生物可能因宿主组织及已建立的微生物菌群的正常生物控制机制的失败而在消化道短暂 停留。

? 一般情况下，有两类不同的菌群能在禽类胃肠道中定植。第一类是与上皮细胞有密切关系的 菌群，例如，嗜酸性乳酸杆菌(Lctobacillus acidophilus)就是这类很好定植的微生物。第 二类是游离于肠腔的细菌群，如粪链球菌(Streptococcus faecium)。这些肠腔细菌以足够 快的速率繁殖，以便不被肠蠕动排出。如果是非致病的有益微生物定植，且只要它们处于优 势菌群，那么，宿主动物就应得到有益作用。

? 关于家禽乳酸杆菌区系的研究显示，嗉囊是用于维持肠道微生物平衡的乳酸杆菌的主要来源 。这些乳酸杆菌附着于嗉囊的上皮细胞组织上。在这个部位，乳酸杆菌能接种新进食的食物 ，以确保这些细菌压抑大肠杆菌和其它病原菌而成为优势菌群。据报道，嗉囊上皮中的乳酸 杆菌层对雏鸡有明显好处。这些微生物形成一～三层厚的细胞层，且在鸡的整个生命阶段持 续存在。

? 大多数单胃家畜肠道微生物的定植是相似的。健康肉鸡肠道中的微生物已被特征化，前肠( 嗉囊和小肠)微生物与后肠(盲肠)微生物有明显的区别。一般地，前肠细菌以耐氧的革兰氏 阳性菌为主，而后肠含的是不能在氧存在下存活的厌氧微生物。肉鸡嗉囊和小肠的混合微生 物菌群产生大量的乳酸，而其盲肠的混合微生物菌群主要产生挥发性脂肪酸(VFA)，即乙酸 、丙酸和丁酸。这些有机酸被普遍称作革兰氏阴性病原菌的抑制剂。

? 已研究了用不同的方法调控肠道内的微生物菌群，以改善宿主动物的性能、总体健康及福利 。人们对调控胃肠道微生物区系的各种方法作了详细讨论。在所有家畜消化道中维持各种保 护性有益微生物菌群，是很重要的。这种正常微生物系统的破坏会增加宿主动物对其后开始 在肠道定植的病原微生物的易感性，从而引起动物疾病的发生。保护性微生物菌群对饲粮和 环境的侵害反应敏感，因此，必须尽一切努力将这些侵害减少到最低程度，以确保动物消化 道的健康。

3 非免疫性防御机制

? 微生物的竞争排斥。任何功能完好的肠道的极重要方面是由微生物菌群的平衡 决定 的。正常情况下，象乳酸杆菌和链球菌这样的乳酸产生菌占优势，将有助于维持胃肠道的健 康。这些有益微生物尤其在动物很年幼时在肠道中的定植，有助于保护动物免受游动的沙门 氏菌及致病大肠杆菌侵害的影响。应激和抗菌药物的使用已表明可改变肠道的正常微生物菌 群。在Metchnikoff(1907)提出肠道微生物区系在维持动物健康中起重要作用的假说之后， 其他学者报道，大剂量口服链霉素导致动物对鼠伤寒沙门氏菌的易感性增加100，000倍，因而支持了Metchnikoff的假说。上述发现后来进一步得到证实，从而开辟了肠道微生物学的 主要研究领域。这些发现激发了研究者们深入探讨应用微生物控制肠道有害微生物区系，尤 其是沙门氏菌定植的可能性。肠道的正常微生物菌群通过创造对病原菌有害的环境而对宿主 动物起防御屏障作用。干扰宿主动物与其正常微生物区系间保护平衡的任何因素，均可使病 原菌更易接触其在肠道中的目标细胞，或让其大量繁殖，以更易竞争目标细胞。

? 这种“竞争排斥”，是指一类微生物菌群因另一类正在定植微生物菌群的存在而不能在肠道 定植。这意味着，一类微生物菌群能更好地适应在特别的肠道环境中定植，或者说，它能产 生对竞争微生物有毒的代谢产物。最后，人们对有益微生物竞争排斥有害微生物提出了几种 机理解释。例如，VFA的产生导致pH值降低，进而创造了不利于一些有害微生物的环境。对 影响家禽微生物竞争排斥的所有因素进行综述后得出结论，VFA的产生不如有害微生物(如沙 门氏菌)附着、定植及入侵肠位点的物理占领重要。自从关于竞争排斥的首篇报道发表以来 ，人们对此领域已做了大量的研究。有益菌不仅能竞争肠道附着位点，产生对有害菌不利的 pH，竞争养分，还能产生抑制病原菌的被称作细菌素的局部抗菌素。已有关于竞争排斥的重 要性及家禽上使用直接饲喂微生物(Direct-Fed Microbials)研究的讨论和综述。

? 据报道，给刚孵出的雏鸡喂以成年鸡粪，结果限制了婴儿沙门氏菌在盲肠中的定植，从而首 次报道了青年鸡肠道微生物菌系的保护效应。研究结果表明，沙门氏菌感染能通过给青年鸡 喂以正常成年鸡肠道微生物区系的厌氧培养物来加以预防。人们后来把这种发现称作“努尔 米概念(Nurmi Concept)”，并做了详细报告和讨论。其它研究结果显示，如果使用无特定 病原菌鸡的肠匀浆，就能保护其免受病原生物体的侵害。如果保护微生物区系免受氧的影响 ， 那么，就可将它们直接喷洒于鸡上，而且当鸡还在孵化时，这种方法能接种整个鸡群。已研 究出用于评价给鸡口服预防非宿主特异性沙门氏菌在肠道定植的活的培养处理材料的特异性 测试方法。此方法简单，重复性好，而不试图模拟变异很大的实际条件。此法能估价实际应 用前处理材料的潜在保护能力，因为在测试条件下对沙门氏菌无效的任何制备物，在控制生 产实际条件下的沙门氏菌方面也很可能是无效的。

? 胃肠道(嗉囊、前胃、股胃)的pH值：嗉囊、前胃和肌胃的pH值分别是4.5、3～4和2～3。这 种 极端的酸性环境能限制进入小肠的活的病原微生物的数量，因而是一种很重要的非免疫性防 御机制。

? 小肠：能在低pH值下生存并进入更为碱性pH、对养分吸收所必需的小肠的病原菌，会立即面 临胃肠道这一区域的非免疫性防御机制。由于这里的条件更适于微生物的生长，故维持这种 非 免疫性防御机制的功能完整性，是必需的。小肠中的微生物对胆汗分泌的反应敏感。含有蛋 白酶的胰腺分泌物能水解细菌细胞壁。上皮本身用作肠细胞间很紧密连接的屏障。肠绒毛上 的肠细胞3～5天的快速周转率也可预防病原菌的定植。肠移动(蠕动)有助于扫除小肠上段的 微生物。称作杯状细胞的特别肠细胞能分泌用作润滑剂和肠“凝胶”的粘液，诱捕微生物并 使蛋白酶和上皮酶能攻击这些微生物。

4 免疫性防御机制

? 微生物定植：如前面讨论的那样，胃肠道微生物对通过竞争排斥来发育和维持 “物 理屏障”极为重要，而竞争排斥使得病原微生物不能附着于粘膜内皮细胞上。而且，有益微 生物能在粘膜和系统水平上促进免疫机制的发育和有效性。在无菌动物上，所有主要免疫器 官都发育不良，直到感染微生物后才会得到充分发育。孵化时鸡肠道的免疫系统是很不成熟 的。要想使鸡能对付将在肠道定植的微生物菌群，这一系统就必须非常快速地发挥其功能。 鸡胃肠道有关的淋巴组织(GALT)主要有法氏囊、盲肠扁桃体、派伊尔氏淋巴集结、麦克氏盲 管和内上皮及固有膜中的弥散淋巴集结。GALT由免疫球蛋白(Ig)分泌细胞、调节T-细胞(帮 助和诱导细胞)、胞毒抑制T-细胞和天然杀伤细胞组成。参与宿主免疫反应的其它细胞有树 突状细胞和巨噬细胞。宿主对抗原刺激的反应是淋巴组织、其它细胞、可溶性产物和生理因 子间各种互作的总合。完整的食物抗原被排出，而小分子养分被吸收。微生物抗原产生的刺 激反应比食物抗原产生的要强烈得多。IgA和IgM是肠道分泌中的主要Ig类抗体，而IgG被认 为是来源于肠损伤后的血液循环中。IgA在抑制病毒及中和微生物产物方面十分有效。胆汁 被认为是来源于循环的IgG。在青年家禽上，卵黄囊中的母体IgG经循环到达肠道。

5 影响消化道完整性的因素

? 禽类和任何其它动物消化道的完整性决不应受到损害。消化道从头到尾都必须 总是 保持健康和发挥正常功能。消化道完整性的破坏将导致疾病的发生，进而影响养分的消化和 吸收。下面将列出并简要讨论一些因素是如何对禽类胃肠道的完整性产生负面影响，进而损 害其防御机制的。

? 霉菌毒素：不论何时饲料污染了真菌，这些真菌的次级代谢产物都可能在饲料中积累，并对 家禽产生毒性。迄今已鉴别出200多种真菌代谢产物(霉菌毒素)。这些霉菌毒素即便摄入量 很少，也常会导致家禽性能的降低。但仅发现几种霉菌毒素对禽类肠道的完整性有直接的不 良影响。棕曲霉毒素A对禽类肝和肾造成的损害最为明显。这种霉菌毒素还能引起肠道脆性 增加。肠道壁很薄，常常在加工期间破裂，引起胴体粪便污染。棕曲霉毒素A已表明通过降 低禽类肠的耐切强度而增加其脆性。这种脆性的增加据认为是由于肠壁的正常胶原蛋白的合 成受到破坏引起的。镰刀菌毒素已报道引起产蛋鸡和肉鸡口腔和胃肠道损伤。据报道，镰刀 菌毒素中毒的口腔损伤症状为干酪样坏死。

? 单宁：据报道，可水解单宁对肠道有如下影响：(1)食管和胃水肿；(2)出血性溃疡、坏死、 糜烂和胃及十二指肠粘膜的粘蛋白分泌过多；(3)食管和结肠粘膜的过量脱落；以及(4)嗉素 壁变厚。

? 蛋白黑素：氨基酸的一些Maillard类衍生物已报道对肠道的结构完整性有不良影响。人们已 对这种褐色反应后期阶段出现的褐色素(蛋白黑素)进行了广泛的研究，大鼠上尤其如此。大 鼠当喂以4%蛋白黑素(葡萄糠+甘氨酸)的饲粮时，其肠壁发生了形态学变化。蛋白黑素引起 小肠绒毛的上端坏死和绒毛上皮细胞的脱落。形态学变化据认为不是由于炎症引起，而是由 于与饲喂高纤维饲粮相似的机械磨损所致。Maillard类衍生物已知发生在过度加工的豆粕中 。

? 生物胺：生物胺的浓度通常很低，正常情况下对动物不会有问题。但是，当饲料原料发生细 菌腐败时，这些胺类的数量增加，对动物尤其是家禽可能产生毒性。这些胺类包括腐胺、尸 胺、组胺、酪胺、亚精胺、苯胺和色胺。生物胺，特别是组胺，引起：(1)前胃肿大，其中 的腺乳凸出；(2)肌胃衬总体糜烂；(3)肠道上部产生过量含有大量上皮细胞的粘液；(4)肠 粘膜的总体破坏。

? 肌胃糜烂素：给雏鸡饲喂过度加工的鱼粉可影响消化道上段的完整性。日本科学家从过热加 工的鲭鱼粉中分离到一种很强力的致肌胃糜烂的物质，他们把此物质称为“肌胃糜烂素”。 他们测得这种毒性氨基酸是由组氨酸和赖氨酸结合生成的。肌胃糜烂素是鸡胃酸分泌的强力 促进剂，作用机理与组胺相似。但其作用比组胺强，作用持续时间比组胺长。

? 铜：嗉囊霉菌病影响胃肠道的完整性，是多见于火鸡上的一种散发病。这种疾病由存在于所 有火鸡舍中的一种很常见的酵母菌引起。受污染的饮水设备是更为常见的诱因之一。与嗉囊 霉菌病有关的损伤包括嗉囊衬上长出白色绒毛、肌胃糜烂和严重的粘液样肠炎。肠炎由肌胃 延伸至肠中部区域。解决此问题的方法通常是使用硫酸铜。抗菌素也用于治疗这种霉菌病， 但更为昂贵。在肉鸡饲粮中铜用量过多(大于200ppm)时，已报道可引起“前胃炎或前胃中毒 ”综合症。此综合症的特征是前胃和胃峡部总体肿大，伴随有嗉囊充满液体和半固体饲料。 正常情况下，在每吨肉鸡饲料中添加硫酸铜454克，即添加铜元素约100ppm。为预防胃肠道 疾病，建议肉鸡饲料中应慎用150ppm以上的铜剂量。

? 疾病：有大量致病因子均对消化道的完整性有不良影响。引起家禽肠炎最常见的因素之一是 球虫。正常情况下，垫草上饲养的健康禽类对球虫应能产生免疫反应。由这种寄生虫低水平 的恒定刺激对发育和维持免疫功能所必需。抗球虫药物在控制这种疾病方面是有效的。肠炎 也能由线虫和绦虫引起。这种寄生虫当其在肠道中的浓度很高时常常导致肠梗阻。坏死性肠 炎最常见的诱因之一是细菌，而与此有关的最常见细菌为产气荚膜梭状芽胞杆菌。这种微生 物产生的毒素可引起肠衬的大面积破坏。坏死性肠炎已表明与亚临床球虫病及当给家禽喂给 黑麦、大麦和小麦这样的谷物时常发生肠道粘性增加有关。这些谷物所含的非淀粉多糖能减 慢肠道食糜的正常流通速率，进而导致产气荚膜梭状芽胞杆菌的过度生长。出血性肠炎直接 由腺病毒感染引起。这种病常见于火鸡。肠绒毛尖端破坏，引起小肠上部出血。其它病毒， 如呼肠孤病毒、轮状病毒、冠状病毒、细小病毒、类肠病毒及钙质病毒，已表明可引起最终 导致肠炎的消化道衬的破坏。

? 氧化产物：单个饲料原料或全价饲粮的氧化可导致不良化合物的生成，家禽若摄入这些不良 化合物，会引起其性能的降低。这种“酸败”作用导致过氧化物的形成。过氧化物的主要作 用目标是细胞膜脂肪分子中脂肪酸的不饱和键。这些脂肪氧化的结果导致膜流动性及受体排 列的丢失，甚至引起细胞裂解。已用家禽进行了少量的旨在专门识别过氧化物对消化道完整 性产生有害影响的试验研究。这一领域尚需做更多的研究工作，因为消化道的微生物菌群首 先要面对这些氧化产物。一些学者强调了对此领域开展更多研究的重要性。据报道，氧化后 的脂肪对肠绒毛的长度、正常微生物菌群、养分吸收及与肠有关的免疫系统有有害影响。更 好地理解氧化产物在消化道中产生的影响，将大大有助于解释当禽类摄入这样的产物时引起 其性能降低的确切机理。

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[center]用SDS-PAGE进行鸡败血霉形体结构蛋白分析
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[center][center]于圣青 刘晓文 徐 步 丁 铲?
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??摘 要：利用SDS-PAGE方法对禽败血霉形体R，S6，F 株和6株国内分离株进行了结构蛋白比较分析，电泳凝胶染色扫描结果显示，各株之间结构 蛋白差异较大。R、S6株p64蛋白表达量较高，D9604株与其相似性较高。D9601、D9603和D96 05与F株均有一条特异的75kDa条带，提示我国分离的MG强毒株可能存在着多样性。

? 关键词：SDS-PAGE 鸡败血霉形体 结构蛋白

? 败血霉形体(Mycoplasma gallisepticum,MG)通常引 起鸡的慢性呼吸道病(Chronic Respiratory Disease,CRD)和火鸡传染性窦炎(Infactious S inusitis,IS)，与病毒或细菌混合感染时可引起严重的并发症，给养禽业带来极大的损害。 我们自江苏和江西两省的数个发病群中分离了8株败血霉形体，分别命名为D9601～D9608。 在以往的研究中，我们发现国内分离株无论在生物学特性，还是在对鸡的致病力方面均存在 不同程度的差异性。本研究通过SDS-PAGE方法对其结构蛋白差异性进行分析，进一步验证国 内分离株与国际对照株之间的关系，为免疫预防慢性呼吸道病进行基础研究。

1 材料和方法

1.1 败血霉形体毒株? 自江苏、江西两省的鸡场分离的6株鸡败血霉形体代号分别为D9601、D9603、D9604、 D9605 、D9606、D9608，参考株为国际标准抗原株S6，弱毒疫苗株F株以及国际标准强毒株R。这三 个参考株均自美国ATCC获得。见表1。

表1. 鸡败血霉形体各株的背景情况

MG株 分离部位 类别 分离者

D9601 鸡气管 野外分离株 自行分离

D9603 鸡气管 野外分离株 自行分离

D9604 鸡气囊膜 野外分离株 自行分离

D9605 鸡气囊膜 野外分离株 自行分离

D9606 鸡气管 野外分离株 自行分离

D9608 鸡气囊膜 野外分离株 自行分离

R 鸡气管 标准株 D.J.Ritchie

S6 火鸡脑 标准株 D.V.Zander

F 鸡气管 疫苗株 R.Yamamoto

1.2 电泳样品的制备

? 将上述9株败血霉形体分别接种Frey&#39s液体培养，置37℃培养48小时后，以15000RP M离心30min沉淀菌体，以超纯水悬浮离心洗涤3次，以岛津uv2205型紫外分光光度计分别测 定蛋白浓度，然后逐一调节蛋白浓度至30mg/mL。

? 取25μL样品分别与等量的样品缓冲液(含5% SDS、10% 2-巯基乙醇、30%丙三醇、4PPM溴酚 蓝、0.2M PH6.8 Tris-Hcl)混合。同时将低分子量标准蛋白溶于0.5mL样品缓冲液中，并以 超纯水补足至1mL。将上述9个样品与标准蛋白溶液各取100mL，置100℃水溶5min，置室温冷 却后备用。

1.3 SDS-PAGE

? 按Kheyer等方法配制10%分离胶和5%浓缩胶。浓缩胶胶厚为1mm。取S6等9株MG 电泳样品各20μL，加入凝胶梳孔中。低分子标准蛋白分别为磷酸化酶、牛血清白蛋白、肌 动蛋白、碳酸酐酶、烟草花叶病毒外壳蛋白五种。以20mA稳流，待溴酚蓝到达分离胶后 电流增加到30mA。溴酚蓝到达凝胶底部时，即停止电泳。取下的凝胶以考马斯亮蓝R250置 60℃染色15min，然后以10%醋酸脱色至背景无色。电泳结果以数码扫描留存。

1.4 结果分析方法? 在本试验条件下，以标准分子量蛋白电泳相对迁移率为横轴，以蛋白分子 量为纵轴，因为蛋白分子量与迁移率的自然对数量线性关系，用其相对应的两组数据进行直 线回归分析，对回归系数和相关性检验后，得出直线回归方程，再根据各蛋白条带的迁移率 代入方程，取反对数即可得出蛋白的分子量。比较各MG株蛋白图谱之间的差异性。

图1 9株败血霉形体的电泳图谱

Lane 1 S6； Lane 2 R； Lane 3 D9606； Lane 4 D9608； Lane 5 D9604； Lane 6 D9601； Lane 7 D9603； Lane 8 D9605； Lane 9 F.

2 结果

? 由图1可以看出，各MG株均出现了数量不等的蛋白条带，数量均在30余条左右， 其中绝大多数是共有的，但少数也有不同。其中R与S6株表现出高度的相似性，其64kDa蛋白 表达量明显高于其它株。在电泳图上，D9608与D9604株相似程度最高，R和S6株与野外分离 株为D9606、D9608和D9604相似性也较高，82.7kDa蛋白条带为这些MG株所特有的。D9608和D 9604株的97.4kDa蛋白，即pMG1的表达量较高。与疫苗株F株相似的有D9601、D9603和D9605 ，其中75kDa蛋白(粘着素之一)为这些MG株所特有，并出现较高的表达量，而R、S6、D9606 、D9608和D9605株缺乏这种重要的粘着素。D9605具有与S6株相同的87kDa蛋白条带。D9601的64kDa蛋白条带与R株和S6也有差异。D9603 和D9604的97.4kDa蛋白条带的染色强度明显强于其它株。F株43kDa蛋白条带染色最弱，而29 kDa蛋白条带染色则最强。

3 讨论

? 应用SDS-PAGE电泳进行鸡败血霉形体的结构蛋白分析，能够发现不同株种之间 的细微差别。p64蛋白是MG的主要免疫原和和主要构膜蛋白，本项研究结果 表明，标准株R和S6株64kDa蛋白的表达量明显高于其它株，这就证实了在体外培养中强毒株 (如S6、R株等)与弱毒株(F株等)相比能够表达大量的p64蛋白，从而为 制造MG灭活疫苗提供了理论根据。野外分离株中D9604与R和S6株相似性最高，生物学特性研 究证明其属于强毒株。

? 75kDa蛋白是一种粘着素，对鸡红细胞表现有血凝活性。本试验无论是标准强毒株还是强毒 分离株结果均未出现该条带，而这种蛋白在强毒株R株应存在，这是否说明不同的强毒株之 间该蛋白的存在有此差异，须应用单抗作进一步研究。疫苗株F株及部分分离株均有75kDa蛋 白，并表现出较高的表达量，这可能表明它们之间存在一定的相关性。

? 值得注意的是，野外分离株D9601、D9603和D9605与疫苗株F株之间有较高的相似性，这些分 离株均表现出了一定的致病力，而这些发病场均曾在以前使用过MG弱毒苗。这就提示我们， 弱毒疫苗毒株是否会在野外条件下发生毒力返强??

另外，在我们以往的用RAPD技术分析MG株之间DNA的多态性的研究中，毒株之间的相似性在 该试验中也得到了证实。野外分离的强毒株的生物学特性不同，它们表现出的对鸡的致病力 也不同，这说明在我国MG对鸡群的感染存在着多样性。

? 败血霉形体的结构蛋白存在高度的差异性。不少学者对与MG粘附过程有关的几种蛋白作了深 入的研究，Kahane等(1984年)用神经氨酸糖肽亲和层析法自MG S6株分离了一种70～75kDa的 粘附蛋白。Thomas等(1988年)用多克隆抗体方法研究表明在MG毒株之间存在着一种63KD的蛋白，与此同时，Bradley等(1988年)发现特异性针对S6株的单克隆抗体能与69KD的血凝素多 肽起反应。Avakian等(1991年)用针对R株64kDa条带特异的鸡血清研究表明，19株MG均存在 主要免疫原64kDa蛋白，这种位于末端结构底部的蛋白对鸡显示出高度免疫原性、血凝特性 ，并且是滑液霉形体所不具有的。Markham等(1992年)用两种单抗鉴定了MG的一种p67蛋白， 这种蛋白(pMGA)位于细胞表面，单抗与之反应时也能抑制血凝活性，这种pMGA或p67表面具 有高度可变性，可能在MG的免疫逃逸中起决定性的作用，虽然这种可变膜蛋白不能由它的pM GA附着基因共同表达，但单克隆抗体测定结果表明其仍具免疫显性和保护性表位。Kheyer等 (1995年)表明，p64抗原为一种脂蛋白，是一种细胞粘着素(cyladhesin)，包括有血凝活性 和生长抑制两种截然不同的表位，虽然只具有约50%左右的粘附作用，但作为主要免疫原和 主要膜蛋白，在免疫学上仍具有重要意义。

? MG主要寄居于宿主组织上皮表面，由MG粘着素与其相应的宿主细胞受体特异结合而完成粘附 ，而粘着是MG使宿主细胞发生变化和发病的前提。以富含p64蛋白的MG株制备疫苗，应获得 较好的免疫效果。进一步研究MG结构蛋白及粘附机理，对研制粘着素亚单位疫苗，从而控制 慢性呼吸道病的发生及传播具有十分重要的意义。

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[center]禽霍乱蜂胶疫苗在养鸡业中的应用
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[center][center]韩洪义
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[center]付维山?
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　?禽霍乱是由多杀性巴氏杆菌引起的接触性传染病，主要侵害家禽和野禽，广泛 分布于世界各养禽地区。此病有高度的传染性和很高的死亡率。多年来，此病给养禽业带来 了很大的危害，阻碍了养禽业的发展。1997年6月滨州市某个体养鸡户发生了一起禽霍乱病 例，采用禽霍乱蜂胶疫苗紧急免疫，配合药物治疗的防治措施，有效地控制了疫情，现将诊 疗情况报告如下：

1 发病情况

? 滨州市某个体养鸡专业户，1997年4月从外地购入3006只10日龄京白Ⅲ系雏鸡， 入舍前免疫新城疫Ⅱ系弱毒冻干疫苗，1997年6月18号(75日龄)鸡突然发病，当天死亡106只 。由于鸡主有用抗菌药物治疗该病后多次复发的教训，于6月19日到我处求诊。

2 临床症状

? 病初，吃食、活动正常，次日清晨却死在舍中，有些正常吃食或在棚架上栖息 ，突然扑动翅膀，倒地挣扎几下很快死亡。倒提病鸡从嘴中流出大量粘液。部分病鸡精神沉 郁，闭目缩颈，羽毛蓬松，冠和肉髯明显紫绀。有轻重不一的呼吸困难，食欲废绝，饮水增 加。有的剧烈腹泻，粪便灰白色或淡白色，肛门被粪便污染。

3 病理剖检

? 取病死鸡5例进行剖检，病理变化基本相同。病鸡心外膜有大量散在出血点，心 包积液。肝脏肿大，质脆，表面布满针尖状灰白色或黄白色坏死点。肺充血并有出血和炎症 病变。出现了禽霍乱的典型病变。

4 实验室检查

4.1 镜检：用病鸡的心血、肝脏涂片革兰氏染色镜检，发现两端着色 的短杆菌，呈革兰氏阴性。美兰染色镜检呈两极浓染的短杆菌。

4.2 细菌培养：取病鸡的心血、肝脏组织分别接种马丁琼脂培养基，37℃ 培养24小时，长出灰白色、湿润的圆形小菌落，半透明。

4.3 生化培养：利用分离培养的菌落作生化试验，结果表明：该菌能发酵葡萄糖、果糖、甘 露糖、蔗糖、产酸不产气。不发酵肌醇、鼠李糖、水杨苷和菊糖，靛基质、过氧化氢酶、氧化酶和硝酸盐还原阳性，尿素酶阴性，在麦康凯培养上不生长，在普通琼脂培养基上发育不 良或不生长。

4.4 动物试验：取病鸡鸡肝1：10组织混悬液，肉汤培养物分别皮下接种3 只小白鼠，0.1ml /只，18-36小时全部死亡。取死亡小白鼠的心血、肝脏涂片镜检，可见革兰氏阴性两极浓染 的短小杆菌。

5 防治措施

5.1 死鸡集中深埋、病鸡排泄物，垫料全部焚烧。将鸡舍、运动场地、饲槽、 饮水器具和周围环境打扫清洁，然后用5%菌毒敌进行彻底消毒。

5.2 紧急预防接种：用禽霍乱蜂胶疫苗1.0ml对发病和未发病的鸡只统一 胸部肌肉注射。

5.3 药物治疗：紧急免疫接种的同时配合药物治疗。病鸡日粮中拌入0.4% 的磺胺甲基嘧啶，连用3天。在鸡群饮水中加入0.1%必杀灭消毒剂，连用5天。? 由于及时采取了综合防治措施，迅速控制了疫情，于第3天停止死亡恢复健康，未再复发。1 998年3月又入舍1000只，于40日龄接种禽霍乱蜂胶疫苗，至9月份未发生禽霍乱疫情。

6 小结与讨论

6.1 根据流行病学，临床症状，病变特征和实验室检查以及防治效果，确诊为 鸡霍乱。

6.2 该鸡主养鸡多年，由于消毒方式欠妥，鸡场、鸡舍累积污染，造成了鸡霍乱的暴发。

6.3 传统防治方法未能妥善解决预防和治疗的矛盾，据B.W.卡尔尼克著述，抗菌药物治疗 只 能减少死亡35%-75%，长期使用易生产耐药菌株或导致菌群失调而继发感染，且成本高，效 益低。过去用氢氧化铝灭活苗，弱毒冻干苗进行紧急预防注射，弱毒冻干苗注射前后一周不 能使用抗菌药物。

6.4 我们用禽霍乱蜂胶疫苗进行紧急免疫并配合药物治疗，取得了很好的效果，关键在于疫苗的佐剂具有广谱生物学活性，注射最初几日内能显著提高机体的非特异防病能力和药物协 同作用，起到很好的治疗和预防效果，随后(5-7)产生特异性应答而扑灭疫情。

6.5 我们采取相似措施对市内3万余羽、40-160日龄各品种鸡进行紧急防治，取得了同样的效果，证明紧急注射禽霍乱蜂胶疫苗防治效果是可靠的。

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逆境EQ

[center]自制禽霍乱油乳剂组织灭活菌苗在发病鸡群中的应用
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[center][center]孙银华 丁忠留 章正林 韩 俊?
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　摘 要：禽霍乱是养鸡业中常见的细菌性疾病，尽管治疗禽霍乱的药物很多，并且许多药物都有较好的治疗效果，但如果各项综合防制措施跟不上，极易引起复发而出现用药病停，停药又发病的所谓“拉锯式”的发病状态。近几年来，笔者在家禽门诊中，经常遇到禽霍乱多次发病而无法根除的鸡群。采用病死鸡肝、脾组织制成组织灭活苗，对全群鸡进行紧急预防接种的方法，既节约了大量的用药成本，也从根本上解决了问题，取得了较满意的效果。

1 发病情况：

? 我县某粮站鸡场一栋密闭笼养鸡舍，98年饲养罗曼父母代和商品代蛋鸡共4300 羽，自98年7月15日(即210日龄)以后，鸡群相继发生了无任何前驱症状的急性禽霍乱，曾先 后分别用过青霉素、链霉素、灭败灵、金霉素、环丙沙星等药物治疗，尽管选用上述药物后 均能不同程度地控制死亡，但停药后3-5天又出现死亡，后又全群使用某研究所生产的禽霍 乱蜂胶灭活苗，但仍死亡不断，发病一月多，共死亡鸡1100余只，死亡率达25.6%，花去药 费一万余元，造成直接经济损失数万元。

2 症状及病变：

? 除个别鸡精神沉郁、眼闭合、羽毛松乱外，均任何症状而突然死亡，尤以夜 间死亡居多，每天清晨发现有数十只死鸡，最多一天竟死亡 66只，部分死鸡鸡冠、肉髯青紫色，鼻和口中混有泡沫样粘液。剖检时几乎近一半死鸡看不 出明显变化，有些可见皮下组织和心冠脂肪等处有小出血点，肝肿大，表面散在许多针尖大 小灰白色坏死点，十二指肠有出血性炎症。

3 诊断：

? 以无菌方法取死鸡肝、脾作触片，瑞氏染色、革兰氏染色，镜 检，均见到多量革兰氏阴性、两极浓染、两端钝圆，有荚膜的短杆菌。用肝、脾组织悬液接 种小白鼠，小白鼠24-28小时死亡，并从小白鼠的心血和肝脏中分离到巴氏杆菌。生化试验 ：葡萄糖+，果糖+，甘露醇+，蔗糖+，甘露糖+，山梨糖+，木糖+，乳糖-，鼠李糖-，菊糖- ，山梨糖-，靛基质+，M·R-，V-P-，硫化氢+，氧化酶+。根据发病及用药情况、症状、剖 检病变、实验室检查，诊断该幢鸡舍鸡群发病为急性禽霍乱。

4 治疗：

? 根据饲养人员反映的多次治疗，反复发病的情况，决定用死亡 鸡肝、脾脏制成灭活苗对全群鸡进行免疫。以无菌方法收集该群死鸡的肝、脾，以1：3(W /V)的比例加入生理盐水，放入组织捣碎机中捣碎，用消毒纱布过滤，加1%甲醛灭活后按总 量加入4%吐温-80混合后即为抗原水相，将7号白油(94%)、司本-80(6%)及硬脂酸铝(2%)混匀 后121℃高压灭菌20分钟，作为油相，再将油相和水相以3：1比例于捣碎机中混匀即制成油 包水型菌苗。经安全试验确认安全后，全群每羽肌注1ml，并在饲料中适当增加多维用量， 对鸡舍进行消毒。采取上述措施两周后，再未出现死于禽霍乱的鸡只，产蛋率也恢复正常， 用药后四个月随访，该群鸡仍未有禽霍乱病例出现。

5 小结与讨论：

5.1 据文献报道，禽霍乱除日本已消灭外，世界许多国家均有发生，在我国一 直是严重危害农村养鸡生产的禽病之一。一个鸡群如果发生霍乱，尽管治疗该病的药物很多 ，并且都有不同程度的治疗效果，但如果各项综合防制措施跟不上，要想根除难度很大。因为一个鸡群经过一个疗程的治疗后，虽然临床症状得到控制，在几天内不再出现死鸡，但这 并不意味真正治愈了禽霍乱，因成千只鸡饲养在一起，个体差异较大，很可能有部分鸡仍潜 伏感染着未被消灭的致病性巴氏杆菌，而使传染源一直存在，一旦停止使用抗菌素，潜伏的 病原体在体内大量繁殖，经过数天后又再次暴发霍乱，而且一种抗菌素长期使用后又会使细 菌产生抗药性。因此，笔者认为，在各项综合防制措施难以切实落实的鸡群，一旦发生禽霍 乱，最好用自制菌苗来进行全群防疫，这样既安全可靠，又经济方便。

5.2 近年来实践证明：自制禽霍乱灭活菌苗，取材方便，成本低廉，制作工艺简单，尤其 对反复发病鸡群可收到事半功倍之效，如果发病群只饲养2-3个月，用组织灭活水苗即可 ，如果发病群饲养3个月以上，可制成油乳剂灭活苗，这样可延长免疫期。

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逆境EQ

[center]鸡马立克氏病免疫失败的原因探讨
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[center][center]王德照 杨淑琴?
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[center]仇 波 夏康平?
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??鸡马立克氏病(Marek&#39s Disease,MD)是由马立克氏病毒(MDV)引起的一种鸡传染 性肿瘤病，在世界各地均有发生、流行，除造成鸡的死亡和废弃外，还可引起免疫抑制，容 易感染其它疫病和影响疫苗免疫效果，导致许多疫病难以控制，严重危害各国的养鸡业，我 国于1978年开始应用预防MD的火鸡疱疹病毒疫苗(HVT)，对有效地控制MD起了重要作用。然 而近几年来虽然鸡接种了该疫苗，鸡群中仍有MD的发生，并造成了严重的经济损失。本文就 有关MD疫苗免疫失败原因的探讨作一综述。

1 疫苗因素

? 疫苗的质量、保存、运输和操作方法等各方面因素对鸡的保护都起着重要的作用。 目前，许多人认为国产的MD疫苗保护率低于进口MD疫苗，这也是很多孵化场愿用进口疫苗的 原因。当然，不同的生产厂家所生产的MD疫苗其保护率或疫苗的质量是不同的，但这主要看 生产MD疫苗所用的鸡胚是来源于无特定病源(SPF)的种鸡还是来源于非SPF种鸡，如果所使用 的鸡胚是来源于非SPF种鸡，则可能由于种鸡群有病毒污染，就无法保证MD疫苗的质量。另外，HVT冻干疫苗的使用剂量是根据疫苗的蚀斑单位(PFU)数来确定的。近几年，我站通过80 00余万羽份HVT冻干疫苗的实践证明每羽份至少含2500个PFU才能达到免疫效果，如果疫苗的 PFU低于2500则容易发生散在MD疫情。而且MD疫苗的PFU受以下因素的影响，进口MD疫苗在2- 8℃条件下保存为二年，如果贮存(尤其在运输过程中)疫苗的温度或时间没有达到上述要求 ，则必然降低疫苗的保护率。其次，疫苗稀释后应在1小时内注完，因为稀释后疫苗的蚀斑 量随时间延长要成倍下降，有人试验，HVT疫苗稀释1小时后，其PFU将降至原来的1/2，2小 时后则降至原来的1/4，由于PFU不足，必然降低疫苗的保护率。近年来有些地区出现了VVMD V，用HVT冻干苗不能提供有力的保护，常常发生免疫失败，因而使用细胞结合苗CVI988等的 越来越多，然而细胞结合苗运输保存需超低温条件，即用液氮(-196℃)保存。如果疫苗存放 于液氮罐中的液氮面以上，温度高于-196℃，疫苗将很快失效。细胞结合苗的使用操作技术 也较高：在疫苗使用时，将苗从液氮中取出，用37℃水浴速融约30秒，立即用稀释液稀释， 稀释好的疫苗最好在冰浴(0℃)中1小时内使用完。若因疫苗未浸没于液氮中或液氮干涸，稀 释时速融不当，注射时间过长，均会引起疫苗免疫失败。另外，对于沙门氏菌和大肠杆菌污 染率较高的种鸡群，孵化场为提高雏鸡的成活率，而在出雏后免疫MD疫苗时使用抗菌素，为 方便常把抗菌素加入MD疫苗稀释液中，这将影响MD疫苗的免疫效果，因为抗菌素的加入将使 稀释液的渗透压和pH值发生改变，对活细胞有毒性，从而引起冻干苗或细胞结合苗的保护力 降低。

2 MDV早期感染

? 试验说明，MD疫苗产生免疫的快慢因疫苗品种不同而异，细胞结合苗产生免疫 至少 需要7-10天，HVT冻干苗产生免疫至少10-14天。如果在疫苗产生免疫之前，雏鸡感染MDV， 不管用什么MD疫苗均会导致免疫失败。因为MDV，在鸡出壳后即可感染，鸡龄越小越易感。 注 射马立克氏病疫苗，鸡只主要产生抗MD肿瘤免疫，而不能防止马立克氏病的传播。大多数鸡 场的大龄鸡群，都是马立克氏病的带毒者，在自然状态下，MDV是随羽毛囊鳞状上皮细胞脱 落而排到环境中，通过尘埃扩散传播，经呼吸道侵害易感鸡群。据报道，MDV有两种，一种 是无囊膜的裸体病毒，这种病毒对外界抵抗力很低，致病能力较差。另一种是有囊膜的完全 病毒，这种病毒对外界有很强的抵抗力，它在被污染的鸡粪、垫草等在室温条件下可保护传 染性达16周之久，病鸡的干燥羽毛，在室温中感染性可保持14周，在4℃的条件下，其感染 性可达7年以上，因此这种病毒对MD的传播起着重要的作用。如果孵化室和育雏舍与种鸡舍 、成鸡舍隔离不够充分，雏鸡就有较大可能呼吸到含MDV的成鸡羽屑的空气，而发生早期感 染。早期感染是我国MD疫苗效果低或免疫失败的最主要原因。

3 MDV超强毒感染

? 如果环境中存在超强毒力马立克氏病病毒(VVMDV)，在注射HVT的鸡群中，仍然 发生 MD，并造成严重的经济损失。VVMDV对鸡的致病性特强，实验室研究表明，HVT疫苗对VVMDV 的预防效果很差，即使把疫苗的免疫剂量增加到10万个PFU(正常免疫剂量的40倍)免疫效果 也不能明显提高。近年来我国有分离出VVMDV报道，说明国内确有VVMDV的存在，这些毒株能 诱发雏鸡的早期免疫抑制或更易使T淋巴细胞发生转化而加速肿瘤的形成，同时由于VVMDV的 复制速度较快，而免疫系统尚未发育成熟的雏鸡不能对之作出有效的反应，引起雏鸡高度的 急性溶血性感染，表现为法氏囊、胸腺萎缩及早期无肿瘤死亡。由于VVMDV有高度的致肿瘤 能力，对经HVT免疫的鸡群也致病，美国学者经过对疫苗的免疫保护比较试验证明，CVI988 、CVI988+HVT和HVT+SB-1三种疫苗免疫均能对VVMDV的预防起到有效保护作用。

4 母源抗体的干扰

? 由于成年鸡群MDV感染普遍存在，加之HVT疫苗的广泛应用，雏鸡母源抗体水平 可能 很高。试验测定，母源抗体滴度约在3日龄时最高，在3周龄时降至相当低的水平。当疫苗病 毒进入雏鸡体内，会受到母源抗体的中和作用，因此就延迟或阻止病毒血症的发生，从而不 能产生保护性免疫。试验表明，同源母源抗体对相应各种MD疫苗的预防都是有影响的，由于 HVT冻干苗为游离病毒，表现的更为突出，有同源母源抗体存在时，可使HVT冻干苗的免疫效 力降低38.8%；同样，同源母源抗体的存在，可使SB-1的免疫效力降低26.7%。细胞结 合苗由于病毒粒子在细胞内，因细胞膜屏障不能与母源抗体直接作用，因而免疫效力受母源 抗体干扰作用小。目前孵化场为减小母源抗体的干扰作用，常常增加疫苗的PFU，或在鸡群 的世代间交替使用不同血清型的疫苗或多价苗，也有人在鸡1日龄进行首免后，于免疫功能 日趋健全的12-21日龄母源抗体对疫苗无干扰作用时，做第二次免疫，据报道效果很好。

5 免疫抑制性疾病的影响

? 在MD免疫中，完全的保护作用要求体液免疫和细胞免疫同时参与，但以细胞免 疫为 主。鸡传染性法氏囊病(IBD)不仅侵害法氏囊，而且损害脾和胸腺，导致长时间B细胞免疫抑 制和短期的T细胞免疫抑制，从而降低了HVT的免疫效力。有试验表明由于IBDV的早期感染而 使HVT的免疫效力下降20%-40%，已接种了HVT苗的鸡群感染了IBDV后，发生MD的比率超过没 有感染IBDV鸡群的7倍以上。鸡传染性贫血因子(CAA)、网状内皮增生症(REV)、呼肠孤病毒 感染和球虫病等疾病以及大肠杆菌和沙门氏菌内毒素等均可使细胞免疫受到抑制，导致疫苗 免疫失败。有人试验，鸡1日龄接种MD疫苗，4日龄感染CAA，8日龄攻击MDV，结果表明，两 个试验组的保护率分别为42%和46%，而未感染CAA的两个免疫对照组保护率分别为93%和88% ，差异显著。

6 其它因素

? 鸡舍环境中氨气和硫化氢等气体的浓度过高，鸡群由于饥渴、寒冷、过度拥 挤等 不良因素的刺激和营养缺乏或不平衡等应激作用，均可抑制机体细胞免疫和体液免疫的应答 ，从而导致疫苗免疫失败。因此，养鸡场、户要注意把饲养管理水平放在首位，这样才有利 于预防MD的发生。另外，鸡的品系对MD的易感性也不同，易感鸡群在接种后免疫力产生较慢 ，一部分鸡对MD仍易感。

? 综上所述，可以引起MD疫苗免疫失败的原因有多种，目前防制MD在很大程度上要依赖MD疫苗 ，但MD疫苗接种本身不能提供完全的MD保护，为了更好地防制MD，选用恰当的联苗和给予适 当的剂量是最基本的，搞好环境卫生以降低早期感染，消除影响鸡体免疫功能的各种因素， 才能将MD防制好。

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逆境EQ

[center]种鸡场鸡白痢的净化综合措施
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[center][center]顾国强杜泳铭史岩
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??鸡白痢是一种常见传染病，也是一种分布较广、危害较大的疾病。特别是种鸡场，一旦感染到鸡白痢，再加上控制和净化工作不力，其种鸡孵化出的雏鸡死亡率升高，严重者高达30～40%，甚至50%。至育成期尽管死亡数减少，但仍有零星死亡，造成鸡群的均匀度大大地降低。至成年鸡时，造成蛋鸡开产推迟1～2周，产蛋率降低10～3O%，当然也到不了理想的产蛋高峰，蛋壳质量不好，破壳、软壳蛋增多。产蛋期每月死淘率高达5～10%，给鸡场带来很大的损失，同时也严重影响种鸡场的经济效益和信誉。

? 养鸡业的迅速发展，各饲养场对种蛋、种雏提出越来越高的要求，这是因为种蛋、种雏的质量直接关系到饲养场能否把鸡养好的大问题。也关系到饲养场的经济效益的问题。因此，目前各饲养场都希望种鸡场能提供没有鸡白痢病的雏鸡，这样，种鸡场鸡白痢的净化工作就显得尤为重要了。长期以来，人们研究用多种方法力图将鸡白痢病从种鸡群中剔除出去，但难度很大。发达国家经过几十年的努力，在父母代以上种鸡场已基本上净化了鸡白痢。我场从德国罗曼育种公司引进罗曼褐曾祖代蛋鸡雏，这些种雏在引进时，经过有关部门的检测是没有鸡白痢病的。为了保持这良好的性状，我场在鸡白痢的净化方面做了以下一些工作。

1 种鸡场的设置与常规管理

1.1 种鸡场应做到布局合理，鸡群全进全出。

? 我场建立在地势干燥、水源充足、水质良好、排水方便，离公路、居民区、工厂、学校和其它畜禽场至少500米以外的地区。场内孵化、育雏育成、种鸡饲养被隔离成三个独立的生产区，区间隔2OO～500米，分场内的各棚舍相隔20米左右。育雏采用网上平养，种鸡饲养采用高床笼养、单鸡单笼，这种设计布局为种鸡生产创造了一个良好的卫生防疫环境。育雏育成场和种鸡场都做到全进全出，每年鸡群转出或淘汰后，场内进行彻底清理和消毒工作，然后空棚一段时间(约1个月左右)，最后再进鸡。

1.2 种鸡场要重视饲料质量的控制和饮水卫生。

? 饲料和水是养鸡的物质基础，是家禽维持生命活动的营养来源。如果不注意饲料的质量管理和饮水的卫生消毒，饲料和水都可能成为沙门氏菌、大肠杆菌的传播源。鱼粉和骨肉粉等动物性蛋白饲料，往往带有大量的沙门氏菌和大肠杆菌等病原。我场的饲料由饲料厂专门配制成颗粒料，由封闭式料车直接从饲料厂运至分场的饲料塔内。配制的饲料不含动物性蛋白，而使用豆粕等植物性蛋白。定期对饲料进行质量检测，发现饲料发霉、污染现象，立即予以清除，这些饲料决不能喂鸡。除了在饲料生产过程中添加各种维生素和微量元素外，还定期给种鸡补充各种维生素，如在饲料中添加速补一14、蛋鸡多维等。

? 鸡的饮水应清洁，无病原菌。定期对本场的水质进行检测，饮用水达到饮用的标准是：每毫升含大肠杆菌不超过3个，每升含细菌总数不超过100个。雏鸡饮水采用钟式饮水器和乳头式饮水器并用，成年鸡全部采用乳头式饮水器。

1.3 种鸡场要重视外环境的治理。

? 良好的环境是保证鸡生长发育和保持较高产蛋率的重要条件，恶劣的环境是许多疾病发生的主要原因。随着鸡场养鸡时间的增加。鸡场环境的污染会越来越严重。我场在防止环境污染方面采取了以下一些措施：?污水采用沉淀、氧化塘自然净化处理；鸡粪采用堆积发酵处理；死鸡处理：雏鸡焚烧，成年鸡挖坑深埋消毒处理；孵化废弃物无害化处理。

2 加强消毒，注意鸡场内环境卫生

? 消毒的目的是要消灭或减少传播疾病的病原微生物，消除传染的危险性，切断传播途径，因此消毒工作要切实有效，绝不能流于形式。

? 我场在消毒工作方面采取了以下一些行之有效的做法。

2.1 人员消毒饲养员在进入分场前，必须洗澡，换下随身穿着的衣裤、鞋、袜等，穿上各分场专用的工作服、鞋、袜等，饲养员在进入鸡舍前需脚踏消毒池。育雏分场饲养员在进入鸡舍前，还需第二次更换工作鞋，才能进入鸡舍内。

2.2 车辆消毒进出分场的车辆均需经过专用的车辆消毒池，非本场的车辆不准进入分场。消毒池内的消毒液每2～3天更换一次。

2.3 食具、用具的消毒饲喂和饮水的用具，每周洗刷消毒一次，炎热季节适当增加消毒次数。雏鸡用的饮水器每天用清水洗干净后使用。

2.4 蛋托和转群用鸡笼的消毒从生产区内蛋库装运种蛋的蛋托和从孵化厅返回的蛋托，被放入外蛋库旁的蛋托消毒池内，用消毒液浸泡，由专人负责消毒，防止了病原菌的交叉传播。蛋托被送回分场后，再进行第二次消毒，然后再使用。转群用的鸡笼为专用鸡笼，不得外借。在鸡笼消毒池内，用2～3%烧碱浸泡消毒，用一次消毒一次，不允许脏鸡笼进入鸡舍。

2.5 鸡舍消毒每批鸡饲养完毕后，立即将鸡舍内的粪便清理干净，用高压水枪将顶棚、墙壁、地面、笼具、辅助设备等冲洗干净，不留下任何污物，然后进行消毒。冲洗消毒的程序为：清水冲洗——干燥——2～3%烧碱水消毒——清水冲洗一0.2～0.5%过氧乙酸消毒——清水冲洗——干燥——甲醛加高锰酸钾熏蒸。

2.6 带鸡消毒鸡舍内饲养的种鸡，用一定浓度的消毒液(卫康或百毒杀)喷雾消毒，一般每周喷雾1～2次，雏鸡、青年鸡、成年鸡均可使用，免疫前后3天不用。

2.7 种蛋消毒种鸡产下蛋后2小时内，将初选的种蛋放入种蛋消毒室内，用甲醛加高锰酸钾熏蒸半小时，然后送入蛋库。种蛋运入孵化厅后，在人孵前、落盘及出雏时都要进行熏蒸消毒。工作人员对种蛋和孵化过程中的每个环节定期采样，监测消毒效果。

3 环境卫生监测与抗体监测

3.1 环境卫生监测我们把孵化厅、育雏育成分场、测定分场、保种分场消毒前后的环境卫生的监测工作，纳入兽医卫生科的日常工作。对检测不合格的部门，要求重新消毒，直至符合要求为止。为净化我场的环境提供科学的依据。采用清扫可使鸡舍内的细菌减少20%左右，清扫加清水冲洗可减少细菌50～60%，但仍有大量的大肠杆菌、沙门氏菌。酸碱消毒可使细菌减少96％左右，基本上查不到大肠杆菌、沙门氏菌，对某些病毒也有一定的效果。熏蒸消毒则效果更好，可使细菌减少98.5～100%。?关于空气中微生物的数量的卫生学标准，我国目前尚未见有正式规定，我场参照国外盗料，制定了场内部标准。

菌落数30以下31～7475～150151～299300以上评价清洁一般临界轻度污染严重污染

3.2 鸡群的抗体水平监测目前我场经常监测的项目是：新城疫(ND)、法氏囊(IBD)、传染性支气管炎(IB)、传染性鼻炎(IC)、传染性喉气管炎(ILT)、减蛋综合症(EDS76)、病毒性关节炎(REO)、鸡霉形体(MG)、鸡白痢(PD)和鸡白血病等。兽医卫生科对鸡群进行定期跟踪监测和不定期的抽测，了解每一批鸡群的健康状况。上海市畜牧兽医站每年二次到场采血，对鸡群进行1%抽样监测，鸡白痢的检测结果均为阴性。

3.3 制定合理的免疫程序，适时免疫制定适合本场鸡群的免疫程序，鸡群饲养时严格按照免疫程序规定的时间接种疫苗，每一世代饲养完毕后，兽医人员及时总结，并根据实际情况对免疫程序作适当的修改。

4 鸡白痢的净化方法

?目前常用的血清学检疫方法有三种：全血玻片凝集反应、试管凝集反应、琼脂扩散反应(AGP)。由于全血玻片凝集反应方法简便、反应较快、结果准确，又可在现场进行，因此，此法在生产实践中应用最广。

4.1 检疫时间种鸡一生中需检测3次，在13周龄、20周龄前、48周龄时各一次。

4.2 抗原使用的抗原为结晶紫染色多价抗原，为鸡白痢菌和鸡伤寒菌所制备。所以，检出的病鸡也包括这两种病。由于此抗原是一种悬浮液，用前必须充分摇匀。抗原从冰箱取出后，经一段时间达到室温(20℃)时再用。

4.3 采取血样在翅内侧静脉血管处，采血时针头要求一只鸡换一个针头，将用过的针头冲洗干净后消毒，防止采病鸡血后再刺种健康鸡造成新的感染。

4.4 设立对照由于全血玻片凝集反应有时出现假阳性或假阴性反应，操作时必须设立标准阳性血清做对照。

4.5 结果判定抗原和血液混合后，于2分钟内出现明显的颗粒凝集或块状凝集的为阳性反应。在2分钟内不出现凝集，或仅呈现均匀一致的微颗粒，或在边缘处由于临干前形成有细絮状物等，均判为阴性。上述反应以外，不易判为阳性或阴性的，可判为可疑。

4.6 对结果的处理种鸡场内不得饲养白痢阳性鸡，对反应呈阳性或可疑的鸡应全部淘汰，严格地按照要求深理或焚烧，病鸡不留在场内或在市场上销售。

?鸡白痢的净化工作是一项长期的系统工程，各部门各环节都应重视此项工作，并必须坚持数年，才能使鸡白痢的净化工作取得成效。

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逆境EQ

[center]鸡传染性喉气管炎流行情况调查与防制研究
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[center][center]孙银华 杨昌缪 黄荣斌 严 勋 周发亚 章正林
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　摘 要：通过细致的调查研究，对ILT动物易感性、 发病日龄、产蛋下降率、蛋质量降低率、潜伏期及病程、发病率与死亡率、传播途径及流行季节、康复鸡群血清抗体的阳性率及效价等10个方面作了较为详细的调 查统计，摸清了ILT在本县发生和流行的规律，并在流行病学调查的同时，进行了ILT防制的研究，通过几种ILT疫苗的免疫效果观察，筛选出了适合本县疫情的ILT疫苗，同时进行了ILT组织灭活油乳剂疫苗的试制 和应用、ILT卵黄抗体的试制及疗效观察、抗ILT中药的筛选及防治效果的研究等多项研究工作，并及时制订了适应本地防制要求的ILT综合防制措施。

1 流行病学

1.1 基本流行情况 1996年4月1日，我县某粮站从外地某鸡场先后引 进蛋鸡品种的父母代各16300羽，购回时已在外地饲养70天， 购回后一切情况基本正常。因种公鸡数量不足，4月26日 再次从外地引进100只35周龄公鸡，未进行隔离饲养观察即与原先购 回的16300羽同养一幢鸡舍，该批公鸡购回后4～5天，部分鸡开始出现 肿头、流眼泪等症状，继而出现咳嗽、喘气、呼吸困难等呼吸道症状，经 用蒽诺沙星、庆大霉素、碘伏、氢化可的松、维生素A等药物治疗，病情 不见好转，原先饲养于该鸡舍的16300羽育成鸡也从刚购进的100羽公 鸡周围逐渐向全群扩散。全群鸡饮水及采食量下降、死亡数逐日增加。经 临诊症状观察、用药情况分析、病理变化、血清学检查，结合扬州大学畜牧兽 医学院及江苏省家禽研究所进行病原分离鉴定，确诊该病为ILT。

? 该病在我县虽属首次发现，但由于该场饲养数量较大，无能力承受全 群淘汰的经济损失，只采取了几项诸如加强全群封锁消毒，禁止场内鸡只外运等相应的控制措施。时至1996年9～10月，距该粮站鸡场一公 里左右的部分农户鸡群开始零星发病，至1996年11月中旬，与该户 毗邻的另一个养鸡大乡农户鸡群也相继发生流行，1996 年12月上旬开始，距原发病场直径距离20公里以外的另两个养鸡大乡的部分村组鸡群也突然大批发病，继而蔓延至全县10多个乡镇近1000万 羽鸡。

1.2 动物易感性 从本县此次流行情况看，除各种日龄的良种蛋鸡发生本病外，疫区内也有肉鸡、乌骨鸡及土种鸡发生本病的，但其他禽类 尚未见发生本病。

1.3 发病日龄 各种龄期的鸡均能感染本病。从某乡部分门诊资 料统计，本病发生于4～10月龄的鸡群，占发病群的80%以上，其他 各日龄的鸡也有发生，但雏鸡及育成鸡的发病率较低，症状也没有产蛋鸡 典型。

1.4 产蛋下降率 产蛋鸡群发生本病后，产蛋率下降30%～40%， 但多数鸡群恢复正常3～4周后产蛋率仍能恢复到发病前的正常水平。

1.5 蛋质量降低粗略统计，产蛋鸡群发生本病期间，畸形蛋、软壳蛋、白壳蛋约占2%～5%，个别严重鸡群达5%～8%。

1.6 潜伏期及病程本病自然感染潜伏期6～12天，病程一 般10～14天，部分鸡群延长到3～4周，个别群达一月以上。

1.7 发病率与死亡率 鸡群的发病率达90%～100%，死亡率 为3%～70%不等，多数产蛋鸡群的死亡率一般在15%～23%，商 品肉鸡群及饲养管理条件较差的蛋鸡群和有其他混合感染的鸡群，死亡率 有时达50%～70%，一般蛋鸡父母代的死亡率比商品代低。

1.8 传播途径 本病只发生横向传播而不发生垂直传播，呼吸道和眼是ILT自然感染的门户。

1.9 流行季节 本病一年四季均有发生，但夏天及初秋发病较少，深秋、早春和冬季流行较多。 1.10 康复鸡鸡群血清抗体的阳性率及效价 通过对发病鸡群的抽样 调查，发病鸡群一般于发病后7天能在血清中测到ILT的AGP抗体；21 天左右，抗体水平达到高峰为1：32以上，多数康复鸡群阳性率达90%～100%。

2 症状与病变

2.1 症状 本病特征性症状是呼吸困难，可见伸颈张嘴喘气的特 殊姿势，鼻孔流出分泌物，有湿性罗音和咳嗽，咳出的分泌物带血；病重 鸡头颈卷缩，厌食、眼全闭。部分病例可见鼻炎和眼结膜炎，蛋鸡产蛋率 严重下降，表现症状后2～3天开始死亡，4～10天为死亡高峰。

2.2 大体病变 本病主要剖检病变集中在喉头和气管。喉头和气 管粘膜肿胀、充血、出血，甚至坏死，气管腔内充满血凝块、粘液、淡黄 色干酪样渗出物甚至形成气管塞。有些病例，渗出物出现于气管下部，炎 症扩散至支气管、肺和气囊，还有部分病鸡出现眼结膜和眶下窦水肿和充 血。

3 诊断

3.1 先后取患病鸡的心血、肝、肾、肺、气管分泌物分别接种于 鲜血琼脂平皿、背通平皿和厌氧培养基于37℃温箱培养48小时，未 见细菌生长。

3.2 取发病鸡的气管、肺组织及气管分泌物，经适当处理后制成 悬液，离心取其上清液，接种9～12日龄SPF鸡胚绒毛尿囊膜，接种 病料的鸡胚明显矮小或萎缩，鸡胚绒毛尿囊膜形成不透明的痘斑。用标准ILT 抗体与发病、死亡鸡的喉头、气管、肺及气管分泌物，经适当处理后，离 心后取上清液(作抗原)做琼脂扩散试验，在抗原和标准抗体之间出现明 显的沉淀线：另用标准抗原和未用过ILT疫苗免疫而发病康复后的鸡血清 做AGP试验，两者之间也出现沉淀线。

4 防制

4.1 宣传发动 在对该病进行调查研究的同 时，向社会积极做好 广泛的宣传工作，征得政府部门的支持后，以县政府的名义下发《关于加 强鸡传染性喉气管炎防制的紧急通知》电传到全县各乡人民政府，以引起 县乡两级政府的高度重视，并通过县电台、电视台向全县介绍该病的有关 知识，对发病严重的重点乡镇和村组，逐乡甚至逐村举办该病的防制专题 讲座，将适合我县的免疫用疫苗及免疫方法和程序及时传授给养鸡农户， 使全县的养鸡户能尽快认识该病的危害，及时做好相应的防制工作。

4.2 组织灭活油乳剂疫苗的试制和应用 用典型ILT发病群发 病死亡鸡的喉、气管及肺加5倍的生理盐水稀释，用组织捣碎机捣碎后， 反复冻融三次以上，离心取上清液，加福尔马林灭活后，按生产油乳剂疫 苗的方法，制成ILT油乳剂灭活苗，对ILT疫区内假定健康群进行免疫， 每羽胸肌注射0.5ml，在该免疫群周围鸡群全部发生ILT的情况下，自制ILT 组织灭活苗免疫群则安然无恙。

4.3 几种疫苗的免疫试验及推广应用 由于接种ILT疫苗的鸡 可长期带毒，而我县历史上又从未发生过ILT，因此我县以前一直未曾 推广使用ILT苗。为了控制该病在我县的流行，我们决定选用几种在国 内外具有一定影响的ILT疫苗在疫区内进行免疫比较试验，通过免疫效 果跟踪观察，从三种进口疫苗及三种国产疫苗中，筛选出了以龙马跃动物 保健公司生产的喉倍灵(LT-BLEN)为理想的推广疫苗。在近两年的免疫试 验中，证明喉倍灵比其它几种ILT疫苗更能有效地抵抗在我县流行的ILTV的 攻击，且产蛋鸡群应用该疫苗免疫后对产蛋率、蛋壳的质量无明显影响。 在疫区内使用喉倍灵疫苗进行预防接种或紧急预防接种，可使免疫鸡群在3 ～4天产生40%的保护，免疫一周后产生完全保护。推广应用喉倍灵一年 多米，ILT的社会发病率控制在0.5%以下，保护了我县养禽业的健康发展。

4.4 抗ILTV中药的筛选及防制效果的研究 我们根据该病的症状 特点，结合对鸡群的消毒和加强饲养管理， 控制并发症，同时配合使用了以清热解毒、止咳祛痰、平喘消肿为治则的 四种中药方剂进行比较试验，从中筛选出了较理想的由银花、连翘、板兰 根、桔梗、贝母等13味中药组成的“喉必清”中药方剂进行治疗。结果 证明，采用中西药结合的方法对缩短病程、减轻症状、降低死亡率有显著的 作用。

4.5 ILT卵黄抗体的试制及疗效观察 用自制的ILT组织灭活油 佐剂疫苗对健康鸡群进行二次免疫注射，首次每只胸肌注射1ml，10天 后，在胸肌两侧各注射 lml，进行加强免疫，加强免疫后15天，测得免 疫鸡血清ILT的AGP抗体达l：256以上，取其卵黄制成效价达 1：128 以上的ILT卵黄抗体。对ILT发病群进行治疗试验，试验分成卵黄抗体治 疗组和生理盐水对照组二组，试验组每只胸肌注射 2ml效价达 l：128的ILT 卵黄抗体，通过10个ILT发病群治疗比较试验，卵黄抗体治疗组较对 照组死亡可下降7～10个百分点。

5 小结与讨论

5.1 ILT是继ND、MD、IBD、IB、EDS76后又一个对我县养禽业危害 较大的禽病，由于该病的病原属于疱疹病毒，临诊康复鸡和疫苗接种鸡可 长期带毒，并向外界不断排毒，因此，在疫区内及受威胁地区的鸡群必须 将ILT的免疫列入正常的免疫程序。

5.2 ILT虽就只有一个血清型，但病毒毒力在各个每株之间存在差 异，因此，在选用疫苗时，必须在多种疫苗保护率比较试验的基础上，确 定推广应用疫苗，以免造成不应发生的免疫失败。通过几种ILT疫苗的免 疫比较试验，我们得出喉倍灵为我县防制ILT的理想疫苗，该疫苗对4～ 5周龄雏鸡及10周龄左右育成鸡进行两次免疫后，可有效地防制ILT的 发生；产蛋鸡免疫后，对产蛋率、蛋壳质量无明显影响；对感染ILTV的 鸡群，发病早期选用ILT-BLEN疫苗进行紧急预防接种可起到缩短病程、 减少死亡的目的；对发病严重的鸡群，采用对症治疗及中西药结合的方法 对缓解症状、降低死亡也有一定的作用。

5.3 用ILT高免卵黄抗体治疗ILT，其治疗效果虽然不及用IBD高 免卵黄液治疗IBD那样显著，但对减少死亡仍有一定的作用，尤其对发病 早期应用效果更显著。

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[center]蛋鸡初产期瘫痪症病因及防治
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[center][center]周彭福钱发歆?
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　??近几年来，我市、泰县里华等养鸡场常见部分蛋鸡群于初产期发生以腹泻、两腿瘫痪、输卵管阴道部宿蛋为特征的疾病，发病鸡群产蛋率上升缓慢，甚至下降，并长期不断地零星死亡，经济损失严重。笔者自1995年-1998年的5-10月份对20个发病鸡场的瘫痪、死亡鸡进行了剖检观察，结合实验室诊断，确诊为大肠杆菌所引起。但通过对发病鸡的细致观察和探索治疗，我们认为有必要对引起疾病的几个原因作以下分析探讨：

1 本病发生的特点

?本病主要发生于蛋鸡初产期，开始鸡群中每日或隔日早晨具有1-2只鸡瘫痪或死于笼内，而白天鸡群神态、饮食均无异常。随着产蛋率升高，一段时间内病鸡增多，而后又减少，当产蛋率为60%左右时发病逐渐停止。由于发病鸡均为开产鸡，造成产蛋率上升缓慢，若伴有不良应激因素或合并继发感染可延长病程，同时发病率增高。产蛋率达40%左右的鸡群发病，因开始病鸡出现较多，故有产蛋率暂时下降现象，而产蛋率达60%以上的鸡群一般仅为个别发病，对产蛋率上升无影响。

2 病因分析

? 剖检瘫痪、病死鸡，虽然可见各器官的充血或出血现象，但主要病变在直肠下段和泄殖腔以及输卵管阴道部。首先由泄殖腔炎的上行性感染引起输卵管阴道部发炎，出现粘膜水肿、管腔扩张受限。当蛋行至发炎部位，该处变得收缩无力，致使蛋宿留不下。一方面，宿留蛋压迫粪道和输尿管，阻碍了粪尿的排泄，使鸡感到严重不适而惊恐发出尖声嚎叫；另一方面，宿留蛋压迫神经造成后肢麻痹，若能及时采取人工助产，病鸡症状很快缓和，半日后即可恢复正常，否则，蛋宿留部位长时间压迫和细菌的大量繁殖而致周围组织坏死。全身症状加重，病鸡很快死亡。?由此可见，初产蛋鸡初产期瘫痪是由输卵管阴道部蛋宿留所致；而蛋宿留是由输卵管阴道部发炎肿胀，引起管腔狭窄、收缩无力所致；而阴道部发炎则由泄殖腔炎的上行性感染所导致；泄殖腔炎是由大肠杆菌病的症候群之一造成。

3 治疗措施的探讨

? 用于治疗大肠杆菌病的首选药物(如氟哌酸、氯霉素、庆大霉素、痢特灵等)均能有效地控制本病。但是，本病常常是群体中长期零星发病，如果全群用药代价太高，且停药后又很快复发。究其原因，泄殖腔部受粪、尿、蛋三方面的刺激，粘膜炎症很难恢复。故此，仅采取抗菌消炎难以彻底治愈，而应采用综合治疗措施。

3.1 抗菌消炎：选用肠道不易吸收的抗菌药物，我们在病程后期采用了美国普强药厂产的利高霉素进行饮水，药物剂量前4天稍高于治疗量，维持量稍高于预防量，保证药物达泄殖腔部仍具有抗菌消炎作用，治疗量每公斤饮水加2克，配成0.2%药液。

3.2 涩肠止泻：用1%白矾液饮水，不但对肠道炎症部位有收敛作用，而且对致病性大肠杆菌亦有抑制作用。

3.3 人工助产：宿留于阴道部的蛋可用手指轻轻拨出，或将蛋戳破拨出蛋壳，助产可使多数鸡病情缓解，有利于药物治疗。

3.4 为了减轻病鸡的瘫痪症状，我们在饲料中添加了复合维生素B，取得了一定疗效。

3.5 我们在日常喂的饲料中降低了日粮中的粗蛋白和钙质水平，想以抑制排卵期向后推迟产蛋期，来改变这种病的发生，但没有起到抑制本病的发生，看来此病与产蛋迟早无关，而与致病的大肠杆菌有关。

3.6 通过做了以上的对比试验，笔者认为早期采用预防大肠杆菌亚单位疫苗或者用美国普强药厂产的利高霉素来防治那就不会再发生此病了。

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[center]肉鸡坏死性肠炎的诊治
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[center][center]陈金龄?
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[center]边家太?
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　?摘要：由魏氏梭菌引起的肉鸡坏死性肠炎发生广泛流行。天气持续少雨干旱，使用劣质鱼粉等是本病的诱发原因。主要侵害2～5周龄地面平养的肉仔鸡，以严重消化不良，生长发育停滞为主要特征。经实验室细菌分离培养，压片镜检确诊为本病。经药敏试验确定用痢菌净、羟氨苄青霉素等治疗，同时配合小肠球虫病的防治取得良好效果。

?关键词：肉鸡魏氏梭菌坏死性肠炎小肠球虫病诱发原因药敏试验

?1998年秋季以来，本地区发生肉鸡坏死性肠炎的广泛流行。其发生特点是，大群中有10%～20%的鸡只发病，严重的消化不良，生长停滞，饲料报酬下降。本病经常与小肠球虫病并发或继发，且一般的药物和常规剂量难以产生疗效。给广大养鸡场(户)造成了较大的经济损失，并同时带来了饲养管理上的麻烦。

1 流行特点及临床症状

?本病于7～10月份多发，涉及区域广泛，发病率为6%～38%，死亡率一般在6%左右。其显著的流行特点是，在同一区域或同一鸡群中反复发作，断断续续的不断出现病死鸡和淘汰鸡，病程持续时间长，可直至该鸡群上市。

?本病主要侵害2～5周龄地面平养肉仔鸡。2周龄以内的雏鸡也可发病。病鸡表现明显的精神沉郁，闭眼嗜睡，食欲减退，腹泻以及羽毛粗乱无光易折断。病鸡生长发育受阻，排黑色、灰色稀便，有时混有血液。有些情况下与小肠球虫病并发，粪便稍稀呈柿黄色或间有肉样便。病程稍长，有的出现神经症状。病鸡翅腿麻痹，颤动，站立不起，瘫痪，双翅拍地，触摸时尖声鸣叫。

2 病理变化

?肉眼变化主限于小肠，特别是空肠和回肠，部分盲肠也可见病变。肠壁脆弱、扩张充满气体，肠粘膜附着疏松或致密伪膜，伪膜外观呈黄色或绿色。肠壁浆膜层可见出血斑，有的毛细血管破裂形成血晕。粘膜出血深达肌层，时有弥漫性出血并发生严重坏死。与小肠球虫病并发时，肠内容物柿黄色，混有碎的小血凝块，肠壁有大头针帽样出血点或坏死灶。

3 诊断

?本病常与小肠球虫病并发，极易被后者所掩盖。最后的确诊依赖于实验室诊断。

3.1 取小肠受损病变部位的肠粘膜刮取物涂片，火焰固定，革兰氏染色，镜检发现有许多两端钝圆的革兰氏阳性肠杆菌。用该刮取物直接涂片镜检，有时可发现数个艾美尔球虫卵囊，证明有球虫病的并发。

3.2 无菌刮取有典型病变的肠粘膜(取自死亡后4小时以内的鸡)，划线接种于葡萄糖血液琼脂上，37℃厌氧培养过夜，可生成几个圆形光滑隆起，淡灰色，直径2～4mm的较大型菌落，菌落周围发生内区完全溶血，外区不完全溶血和脱色的双重溶血现象。挑取此菌落压片、染色，镜检发现与前述相同的细菌。

3.3 挑选典型菌落接种于牛乳培养基中培养8～10小时后，可见明显的“暴烈发酵”现象，凝固的乳酪蛋白成为多孔海绵状或分裂为数块。

3.4 药敏试验的结果是，该菌对青霉素类、痢菌净、链霉素高敏；对痢特灵、杆菌肽、氯霉素中敏；对复方敌菌净、土霉素、庆大霉素不敏感。

4 治疗

?该病确诊后，我们制订了以治疗坏死性肠炎为主，兼治小肠球虫病为辅的原则。依据药敏试验的结果，投喂高敏药物取得了满意的临床治疗效果。

?首先加强通风换气，全群隔日带鸡消毒一次。痢菌净0.03%饮水，一日二次，每次2～3小时，连用3～5天；饲料中拌入15ppm杆菌肽和70ppm盐霉素。2周龄以内的雏鸡，100升饮水中加入羟氨苄青霉素15g，一日二次，每次2～3小时，连用3～5天。

?用药24小时后，粪便颜色明显改观，病鸡症状减轻，采食量增加，3天后症状消失，鸡群恢复正常。以后再加强用药2天。

5 讨论、总结

?该病原菌属魏氏梭菌A型或C型，健康禽类肠道寄居菌，寄生于禽类大肠中，当遇应激因素及机体抵抗力降低时，大量繁殖侵入小肠，产生大量α和β毒素，引起发病。因此从某种意义上讲它是一种条件性致病菌。该菌易形成芽胞，对外界环境有很强的抵抗力，可随家禽粪便、尘埃、污染的饲料等传播，也可由苍蝇等昆虫传播。这是该病不易根除的原因。

?减少该病发生和流行的重要手段就是要切实做好预防工作，包括加强卫生消毒，增加通风换气量，保持垫料适宜的干湿度，降低饲养密度等。经常于饲料中添加10ppm杆菌肽或6ppm链霉素可预防本病的发生。

?1998年麦收直到春节后，本地区持续的干旱少雨天气，使空气湿度降低，漂浮于大气中的尘埃粒子增多，可携带大量病原传播。同时期由于鱼粉价高且供应趋紧张，肉鸡饲料中大量使用过期、变质、掺杂使假的劣质鱼粉和鱼块，而这些鱼粉和鱼块极易受魏氏梭菌污染，这就加重了对消化道粘膜的刺激和损伤，增加了鸡群受感染的机会。这些是本病发生和流行的诱发原因。

?能引起肠粘膜损伤的疾病，如球虫病等都可成为本病发生的诱因。实际上，本病常与小肠球虫病并发，一般被诊断为小肠球虫病而进行治疗，忽视了作为主要病症的坏死性肠炎，往往造成症状加剧或收效甚微。因此，要特别注意二者的区分和在临床治疗中的主次关系。

?此外，高纤维素性垫料，VA、VE和硒的缺乏也是易发生本病的原因之一。

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[center]减蛋综合症(EDS76)防制试验
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[center][center]刘俊华吕攀范喜章?
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　?摘要：用减蛋综合症单苗(EDS76)和新减二联苗(ND+EDS76疫苗)对鸡群做一次免疫和两次免疫的免疫效果对比试验。试验结果表明，二次免疫比一次免疫效果好，单苗比联苗效果好。

?关键词：减蛋综合征疫苗免疫效果

1 前言

?减蛋综合症是由腺病毒引起的一种以群体产蛋下降为特征的传染性疾病。该病在世界范围内养鸡业中均有发生和流行。因本病常常是在30周龄左右发病，造成产蛋率大幅度下降，给种鸡群、蛋鸡群造成严重损失，但尚无有效治疗办法。本病不但能垂直传播。还可以水平传插。因此，既要严格控制引种，又要严格执行兽医卫生措施，加强管理、免疫、淘汰病鸡等多方面进行控制，也可投给抗菌药物以防混合感染。预防接种是本病的主要防制措施。本文旨在观察减蛋综合症单苗和二联苗对该病不同免疫次数的免疫效果。

2 材料与方法

2.1 材料：试验鸡来自北京家禽育种公司的艾维茵肉种鸡，试验疫苗由英特威公司提供。

2.2 方法：(1)分组将2000只雏鸡分为5组，即试验1组、试验2组、试验3组、试验4组、对照组。每组400只鸡，在同一栋舍隔网饲养，同一饲养员管理，其它条件均相同。(2)疫苗使用试验1组用ND+EDS76疫苗在21周龄做一次免疫；试验2组在15周龄做首次免疫，在21周龄做第二次免疫。两次免疫均使用ND+EDS76疫苗；试验3组，首免在15周龄用ND+EDS76疫苗，二免在21周龄使用EDS76疫苗；试验4组采用EDS76疫苗在15周龄对鸡群做一次免疫；对照组不做疫苗免疫。(3)观察内容①临床表现：产蛋情况、蛋壳质量、受精率、孵化率。②免疫效果监测：采用HI抗体监测(用β微量法)，每次免疫后4周每组随机采血20只，对照组在16周龄、25周龄做二次采血。在鸡群52周龄每组分别采血一次。

3 试验结果和分析

3.1 临床表现：试验1组于32周龄鸡群产蛋率开始下降，将近2周时间下降10%，同时，软皮蛋、畸形蛋增多(是原来的3倍)，蛋壳颜色变浅，蛋白水样。鸡群受精率下降2%，孵化率下降3%，经过8周后产蛋恢复正常。剖检病鸡发现：病鸡卵巢萎缩或不发育；出现出血、坏死、变形卵泡，输卵管管腔内粘膜出血，滞留有粘脓性乃至干酪样渗出物。个别鸡有卵黄性腹膜炎。试验2组、试验3组临床无异常表现，产蛋情况正常。试验4组较试验2组、试验3组高峰期产蛋下降较快。对照组除有试验1组的临床症状外，在产蛋高峰期较其它组产蛋低5%。剖检发现，病鸡卵巢上卵泡变形的较多。

3.2 HI抗体监测结果：

组别          HI抗体滴度（Xlog2）

           0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

试验1组 25周 3 　 3 5 3 3 2 1 　 　 　

        52周 5   1 3 7 1 2 1 　 　 　 　

试验2组 19周 1 　 1 3 4 4 4 3 　 　 　

        25周 　 　1 4 6 7 2 　

        52周 　 　2 6 8 2 1 1 　

试验3组 19周 1 　 1 2 8 5 2 1 　 　

        25周 　 　2 6 6 4 2

        52周 　 　3 4 5 7 1 　

试验4组 19周 　 　2 3 5 4 5 1 　 　

        52周 1 3 2 4 3 4 2 1 　 　 　

试验5组 16周 1 8 1 1 　 　 　 　 　 　 　 　

        25周 1 2 0 2 4 1 1 　 　 　

        52周 1 0 1 2 3 1 2 1 　 　

?以上结果表明：前三组首免后抗体离散度较大；且有个别鸡漏免，二免后抗体较高，且较集中；第四组结果大于首免和二免效果之间，虽然没有漏免现象，但离散度和抗体水平均较二次免疫差，对照组两次采血结果抗体均有阳性，证明已有病毒感染。

4 讨论

4.1 试验2组和试验3组结果最好：即首免在15周龄，二免在21周龄。免疫效果最差的是试验1组，即在21周龄做1次免疫。总之，做两次免疫的试验比做一次免疫的试验效果好。

4.2 就经济成本分析，二联苗比单苗价格高，但免疫效果相近，甚至单苗比联苗效果更好，所以建议用单苗。

4.3 从试验HI抗体监测结果与抗病毒感染的相关性看，HI抗体水平大于4即可抵抗病毒感染。当然通过一次免疫如果能达到这个范围内较均衡的抗体，是最理想的。在生产中往往一次免疫效果不好，需做二次免疫，抗体水平上升较高，如抗体超过10以上的鸡只，很可能在免疫前已被病毒感染。

4.4 EDS76HI抗体可以持续很长时间，在开产前如果一批鸡得到了很高的免疫抗体，可终生不需再做免疫。

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逆境EQ

[center]鸡支原体与大肠杆菌病的混合感染
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[center][center]郑德富冯建民李来旭李平?
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[center]张君?
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　??初春，春冬交界，天气变化异常，昼夜温差大，许多中、小型鸡场鸡舍环境受天气影响大，导致一些鸡群发病，多表现为呼吸道及消化道症状，但死亡率较低，经诊断支原体与大肠杆菌混合感染病例较多见。

1 流行病学及发病特点

?不同日龄与品种鸡群均可发病，但从临床中发病情况来看，白羽蛋鸡及肉仔鸡发病率可能高一些。鸡群发病初期多表现为呼吸道症状，在鸡群静听，能听到个别鸡只发出似口中含水的“呼噜”声，夜间关灯后较清晰，白天则难发现，一般发病前期不易引起注意，待发现鸡群有呼吸道症状时，其实已发病1～2天了，这时白天进入鸡舍，可听到有些鸡只发出呼噜声，声音此起彼状，很难具体确定哪处鸡只发病，从精神状态上，看不出异常，夜间能听到明显的“呼啦、呼啦”声，连成一片。许多鸡只张口呼吸，时而伸脖喘。

?发病5～7天以后的鸡群，则表现为明显的呼吸道症状，病鸡咳嗽，喘气，打喷嚏，似鼻腔不通气，有的眼睑肿胀，有眼泪及粘液，有的发出似吃料噎住的叫声，鸡群明显表现食欲下降。有些鸡只粪便稀薄，有白色、黄色、绿色，有的水便似蛋清状。蛋鸡产蛋率下降，肉仔鸡增重减慢，雏鸡表现明显的精神沉郁，羽毛逢乱。此时，呼吸道症状几乎达到90%左右，很多鸡群出现零星死鸡。

2 病理变化

?发病1～3天，喉头、气管处有清亮的粘液，气囊稍浑浊，有的鸡只心包膜浑浊，其它症状不明显。发病4～5天，气管内大量浑浊粘液，有的气管C型环轻度出血，鼻窦肿胀、充血，气囊白色浑浊，明显增厚，囊腔内有淡黄色渗出物，有的鸡只气囊上斑块状浑浊物，肺脏充血，少数出现卡他性肺炎，灰黄色坏死灶，挤压可从切面流出泡沫状黄白色液体。心包增厚，不透明，有的纤维素性心包炎。肝脏有的稍肿大，表面黄白色条纹，质脆，有的紫黑色，表面白色包膜。成年鸡多见肠道及肠系膜变黑，肠内充有气体，小肠卡他性炎。产蛋鸡多见坠卵性腹膜炎。

3 实验室检验

?病鸡采血，或取气管或气囊内渗出物，或病变肝脏等检验。

3.1 以血凝抑制(HI)检鸡新城疫(ND)、琼扩反应检支气管炎(IB)、喉气管炎(ILT)，玻板凝集检支原体、沙门氏菌，并涂片镜检，检验结果支原体呈现玻板凝集，镜检结果发现大肠杆菌，其它结果均为阴性。

3.2 以支原体分离作进一步检验，取病鸡气管或气囊内渗出物制成悬浮液，加青霉素抑菌，接种鸡支原体培养基中，培养5～7天，菌落呈“荷包蛋”状，姬姆萨染色，镜检发现有小球状、细小、圆形的支原体形态。

3.3 以病变肝脏无菌操作，在普通琼脂上培养，37℃，24小时后，出现圆形、隆起、光滑、半透明的菌落，取菌落镜检，为中等大小杆菌，通过生化试验认定为大肠杆菌。

3.4 据临床症状，剖检变化，化验室检验结果综合诊断为支原体与大肠杆菌混感。

4 治疗

?本病从临床症状易与非典型ND、IB、ILT等疫病混淆，所以无论养殖户或兽医工作人员，不可单凭临床表现主观臆断，随便用药和防疫，以免造成更大的损失。应尽量做到早发现、早确诊，采取相应措施，准确投药。?现根据临床实践总结几点用药建议：

?发病初期，病情轻微的：用卡那霉素与病毒灵混合饮水，一天二次。成鸡每100只一次量5%10ml卡那霉素2支，5%10ml病毒灵2支，雏鸡减半。如使用原料药，效果更佳。连用三天，可控制病情，5天可治愈。

?病情稍重的：用恩诺沙星原粉饮水，一天二次，土霉素原粉拌料，用量按原料正常建议量，连用3～5天，可治愈。?病情较严重，一般发病超过5～7天且投一些常用药物未见到明显效果的，建议：

1?用纯中药制剂禽族得乐拌料，每200只成鸡1袋；

2?禽用口服液(黑龙江省生物制品一厂生产)，上午饮水，一次每250只成鸡1瓶，饮用前停水2小时左右；

3?恩诺沙星原料，下午饮水，用量按原粉建议用量，同时用速补、电解多维类药物饮水，连用3～5天，基本可治愈。如鸡群消化道病状严重，出现明显的粪便异常，可用氨苄原粉代替恩诺原粉，效果很好。

?从临床观察，本病治疗并不难，但较易复发，且易与其它许多疾病混感，因此，应重在预防。

5 防制

?本病治疗应根据药敏试验进行投药，由于支原体与大肠杆菌耐药菌株产生很快，鸡群两次发生同样的疾病，用同样的方法投药，结果却差异很大，所以，防制本病，应从根本上考虑。

5.1 引种，抓雏或进种蛋，一定要来自清洁的鸡群，因为支原体为垂直传播的疾病，要注意后备鸡的管理，避免垂直传染。

5.2 注重环境，支原体与大肠杆菌均属条件病，可水平传播，如鸡场环境差，消毒、隔离、防疫意识淡薄，就很难避免本病的发生。

5.3 定期检测支原体，及时淘汰阳性鸡，净化鸡群。

?商品鸡场如达不到净化地步，应进行预防免疫，对鸡群进行支原体、大肠杆菌灭活苗的接种。但大肠杆菌苗接种前，应先鉴定本鸡场大肠杆菌的血清型。必要时可采取分离发病鸡场大肠杆菌菌株自制灭活苗的方法进行预防控制。

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逆境EQ

[center]全面认识番鸭三周病
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[center][center]林禧龄
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　??摘要：雏番鸭2～5周龄期间发生以喘气、腹泻、腿软和肝、心、肠、胰炎症及舌尖发绀为特征的雏番鸭喘泻症（俗称三周龄病），在我省流行面广，死亡率可高达100%，造成巨大经济损失。作者通过深入流行病学调查，在病原发病学和病理组织学方面作了系统而全面研究，认为“三周龄病”是“病毒症侯群”，除病毒因素外常常并发鸭疫巴氏杆病，而后者病原致病力很强，且饲养不当为诱发因素。因此，根据中医脾胃学说，运用“舌诊”，辩证施治并采取中西医结合的防治方法、研制出388鸭灵素系列产品优化番鸭饲养程序，取得明显经济效益。

?关键词：三周龄病 病原学 舌诊 中西医结合

?自1985年以来我省莆田、福州雏番鸭中普遍发生一种以喘气、腹泻、腿软和肝、心、肠、胰炎症及舌头发绀为特征的疾病，由于该病只发于2～5周龄的雏番鸭，群众称之为雏番鸭的“三周病”。该病传染性强，发病率和死亡率均高，作者1986年实地调查164群28709只，共病死8344只雏番鸭，死亡率为29%。这种疫病的耐过鸭，其生长受阻，脱羽形成僵鸭，造成巨大经济损失。因此，对本病进行深入的流行病学调查，并在病原学，发病条件方面进行系统研究，提出中西医结合388鸭灵素系列产品优化番鸭饲养综合防治措施，为发展番鸭生产提供系统资料，兹报导如下：

1 流行病学调查

?我省莆田地区是雏番鸭三周龄病的高发区，作者于1986年4月前往现场进行流行病学调查研究发现：(1)本病流行的部分乡、镇间杂养的樱桃谷肉鸭雏、半番鸭、蛋鸭雏、雏鸡群中均无此病发生。(2)本病发生似与饲养环境污染病原的积累有一定的相关性。(3)以病料的无菌滤液接种本动物，成功地复制出本病，电镜上观察到病毒颗粒，临床上用抗菌素治疗无效。这揭示本病显然是一种病毒病。(4)本病的发生是否由病毒这单一因子造成，是否有其它病原和发病因素，诸如饲养条件因子的参与而表现临床综合症，尚需进一步调查研究。

2 病原学研究

2.1 病毒学研究

2.1.1 取病雏番鸭肝磨碎加双抗(500单位/ml)的汉克氏液作10倍稀释(W/V)置4℃冰箱30分钟，澄清接种14日龄胚绒尿膜0.2毫升并盲传六代，从第三代起于72小时胚胎开始死亡，肉眼可见胚体出血，绒尿膜增厚，肝周边出血，肺水肿，心脏松驰等病变，取尿囊液和实质器官混合研磨，冻融三次作10倍稀释，按上法重新接种至第六代，用该病毒接种鸡胚，番鸭胚，鹅胚亦规律性地在第三代72小时死亡。

2.1.2 本动物人工复制取非疫区的二日龄雏番鸭10只进行人工复制病例。二只对照，八只接毒。用86-(11-13)肝无菌滤液作脑内、皮下、腹腔、滴鼻各注射0.04毫升，结果在5～7日龄出现病状与死亡。解剖病变所见与自然病例相似。重复二次试验结果相同。

2.1.3 电镜观察将86-(11-13)肠和86-14肠道样品处理后经负染在5万倍和15万倍电镜下观察到病毒颗粒，其中86-14样品电镜照片，送北京中国医科院洪涛教授鉴定为病毒颗粒。因此，率先提出：番鸭三周龄病为病毒污染。虽然不少学者对病毒类型报导不一，但均证实有病毒感染存在。

2.2 鸭疫巴氏杆菌分离

?作者于1988年1月发现福州市郊的某鸭场的北京鸭群和康贝尔鸭群中突发一种疫病。经现场调查该病引起的死亡率可达5%～60%，1989年夏在六一村、高宅村又陆续发现此类病例遂对其病原作以下研究。

2.2.1 实验室研究从有典型病变病番鸭的肝脏采取检材接种于巧克力平板，置蜡烛缸中，在37℃培养24小时后，长出菌落，经生物学鉴定与鸭疫巴氏杆菌特性相符。将分离的4个菌株与鸭疫巴氏菌抗血清做玻板凝集试验，均出现凝集反应。菌株的药敏试验表明，它对庆大霉素、卡那霉素、红霉素、强力霉素呈高度敏感。

2.2.2 以分离到的菌株进行人工感染小鸭试验，北京鸭死亡6/12，本地鸭死亡2/3，番鸭死亡4/4。结合近年来的流行病学调查，初步认为番鸭、北京鸭、本地鸭、樱桃谷鸭、康贝尔鸭对鸭疫巴氏杆菌均有易感性。

2.2.3 将70例病雏鸭标本进行病理组织学检查，发现相当数量病料中存在浆膜炎，脾肿大及革兰氏阴性小杆菌，这些特征与鸭疫巴氏杆菌致病特征相符。

3 病理学研究

3.1 材料与方法

?将三周病雏番鸭39只解剖，取出各主要内脏，以10%福尔马林固定，石蜡包埋、切片、HE染色，部分切片作Gimesa、革兰氏染色。对照组17只7日龄雏番鸭，处死后取出脏器作相同病理学观察。

3.2 结果

?形态学肉眼观察，全部患病雏番鸭的心外膜呈程度不等的浆液纤维素性炎症。严重者整个心脏表面被复一层白膜，心外膜的血管被掩盖。此外尚可见程度不等的浆液纤维素性胸膜炎。脾脏明显肿大，包膜紧张，呈暗红色。切面脾髓肿胀隆起，呈灰红色，质软，脾小梁与白髓分界模糊不清。两肺均有程度不等的充血水肿。肝脏部分病例呈淡红带黄色，小肠、大肠、胰、肾均见充血。正常组动物末见病变。

镜检可见大部分内脏的浆膜均有程度不等的浆液纤维素性炎，尤以心外膜最为明显，严重者可见心外膜下浅层心肌呈间质性炎，心外膜的间质中可见革兰氏阴性小杆菌。肺呈淤血水肿，伴有程度不等的纤维素性胸膜炎，有的肺小静脉尚可见革兰氏阴性菌小杆菌。大多数的脾脏有明显的感染性肿大，脾窦充血，大量单核巨噬细胞，吞噬活跃，少数可见小灶性坏死，其包膜纤维素炎亦甚明显。大小肠均呈急性炎，大多数炎症严重合并，有浆膜浆液纤维素性炎，粘膜下层与浆膜下部分病例尚可见革兰氏阴性杆菌。肝脏呈程度不等的空疮性、脂肪变性与小灶性坏死。胰腺大多数有导管炎，周围伴有小灶性坏死。部分肾脏呈间质性小灶性炎。部分有脑室管膜炎。对照组(正常组)均末见病变。

内脏浆膜可见浆液纤维素性炎的比例：

　

?心 肺 脾 胃 肠

100% 81.0% 56.66% 51.51% 53.84%

n38/38 n30/37 n17/30 n17/33 n21/39

以上病理学检查均提示病鸭呈鸭疫巴氏杆菌性败血症的变化。

4 发病学证识与防治

4.1 发病学证识

4.1.1 从形态学的表现本病感染开始于肠道到迅速发生败血症引起主要浆膜与肠道的外膜，死亡原因为心力衰竭。

4.1.2 根据现场观察个体户饲养环境可见育雏室内舍内双层饲养：上层饲养小鸡，下层饲养雏番鸭，舍内空气湿度过高，鸭群密度过大，舍内空气不流通，并从上表内脏浆膜浆液纤维素性出现率(例数%)肺：81.08%，n30/37故认为呼吸道感染是主要的传播途径，在预防本病时应予以重视。

4.1.3 番鸭三周龄病的病原是多元性，既有病毒感染又有诱发鸭疫巴氏杆菌感染的条件，而后者毒力强，因此单纯抗病毒或抗菌药治疗难有殊效。而且外界因素的制约如饲养条件、卫生条件、气候变化，以及雏番鸭特定的生长周期(2～5周龄)的易感性都是发病以及流行的内、外部条件。上述证识与作者报导的“莆田雏番鸭末知病流行病学调查报告”率先提出“病毒症候群”和匈牙利教授报导的番鸭戴尔吉(Derzsy)相一致。

4.2 防治措施

?根据以上基础研究。本研究所根据中医脾胃学说的辩证施治理论作为防治该病的思路。针对番鸭出雏后至三周龄番鸭生理结构及多种病原菌的特点，经八年苦心研究和社会力量的支持将中草药和现代医学相结合研制成中西结合388鸭灵素(1-6号)系列产品经田间防治雏番鸭8645羽结果表明：雏番鸭死亡率由32%降低到3.96%，存活率由53.3%提高到90.5%，其中五号产品对二周龄番鸭细小病毒病仅三天控制疫情为我国新发现的一种广谱抗病毒感染的畜禽免疫调节剂，属国内首创。但在给药的同时，对饲养方法，环境管理，仍当列入综合程序。该项成果于1994年2月23日通过鉴定，具有重大的理论和经济价值。

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逆境EQ

[center]用仔鸡发生绿脓杆菌病的诊治
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[center][center]王培民杨锦红?
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??1997年7月2日，我公司一合同养鸡户饲养的10000余只31日龄商品代肉仔鸡突然发病。主要表现为；采食量骤然下降，饮水量增加；发病鸡眼睑、肉髯肿胀，头部异常肿大，体温较正常升高约0.5℃，嗜睡呆立。精神严重沉郁，呼吸困难，拉白色或黄色水便；死鸡均表现皮肤淤血，口吐粘液。下面是该鸡群发病前后的采食与死淘情况统计：

日期      日龄 当日存栏（只） 死淘数（只） 死淘率（‰） 计划喂料KG 实际喂料 体重X（G）

1997.7.01 30   10820          15           1.39        1.490    1.480 ≈1.2000

1997.7.02 31   10787          33           3.05        1.540    1.230 　

1997.7.03 32   10737          50           4.63        1.590    1.200 　

1997.7.04 33   10672          65           6.02        1.640    1.150 　

1997.7.05 34   10626          46           4.26        1.690    1.200 　

1997.7.06 35   10595          31           2.87        1.740    1.260 　

1997.7.07 36   10582          13           1.20        1.790    1.360 1.375

1997.7.08 37   10570          12           1.14        1.840    1.460 　

从以上表中看出，死淘总数虽不是很高，但是料肉比和体重却受到很大的损失，后经实验室快速诊断为绿脓杆菌症，积极对症治疗，很快控制住了病情，使养鸡户免受了更大的损失。

1 病理剖检症状

?头部皮下，窦腔中有胶冻样液体；眼睑、肉髯内有黄色水样渗出物，带有难闻的气味；上呼吸道充血，有粘液附着；心包积液或混浊；脾肿大；肝肿大，质脆；肾脏充血肿大，部分尿酸盐沉积；肠道有卡他性炎症；法氏囊有微量渗出液。

2 实验室诊断

?在发病当日，我们派技术人员到该场现场解剖，并采用了10只病鸡的窦腔内容物进行了细菌培养和血清学诊断。

2.1 病原菌的分离培养先后用窦腔内容物接种于营养琼脂、血液琼脂、麦康凯琼脂、NAC琼脂四种培养基。经过一段时间培养后菌落出现了一系列特征。菌落特征如下：

培养基名称 培养液条件 菌落特征

营养琼脂 培养箱37C24小时 圆形或呈锯齿状，凸起，有绿色荧光

血液琼脂 培养箱37C24小时 表面光滑湿润，边缘不规则，凸起，完全溶血

麦康凯琼脂 培养箱37C24小时 菌落周围变成暗绿色

NAC琼脂 培养箱37C24小时 菌落周围有大量的黄绿色色素产生，带有荧光

2.2 血清学诊断用已知血清型的绿脓肝菌血清，与鲜血清培养基上的典型菌落做平板凝集实验，出现凝集颗粒。

?由以上可以初步诊断为病原是绿脓杆菌。

3 药敏实验：

?经过做药敏实验，发现磺胺类药物敏感度为最高，其次是庆大霉素(抑菌直径≥18mm)，再以后是诺氟沙星、氧氟沙星、新霉素、红霉素、杆菌肽，故选用了以复合磺胺类药物和庆大霉素配伍的联合用药方法。

4 防治措施与效果

4.1 严格分群：健康鸡只与发病鸡只隔离饲养，加强带鸡消毒，使用过氧乙酸，浓度为1：300，每6个小时一遍，每天搞一次百毒杀1：4000饮水消毒。

4.2 整个群体进行COLIPRIM(复合磺胺)饮水，浓度1ML/4ML水，全天24小时用药，连服4天。

4.3 病鸡只用庆大霉素针剂进行肌肉注射，剂量为8000单位/只，每天一次，连续注射4天。

4.4 截至投药第四天，发现病情得到了控制。死淘率明显降低，采食量明显上升，趋于正常。

5 结论与体会

5.1 经过调查发现，该病的发生主要是因为鸡只饮用了不合格的水引起的。97年6月25日受厄尔尼诺现象的影响，秦皇岛地区遭受了强暴风雨袭击，造成该场深井水泵(40M深)电机烧毁。不得不改用备用浅水井(12.5M深)的饮水，而该场靠近海边，地层为砂砾结构，渗水严重，离井不远处有一座厕所，雨季很易造成水质污染；后经化验，该井水细菌指数严重超标，并发现了大量的绿脓杆菌。

5.2 水源是传染疾病的重要渠道，尤其是细菌性疾病，绝对不能使用未经消毒不合格的饮水。要定期对所使用井水的水质进行化验。

5.3 水井的选址很重要，水井深度要超过40米以上，并远离污染源，最好使用消毒过的自来水；浅层地下水一定经过消毒，确认细菌不超标情况下使用，消毒最简单易行的方法是使用CL片进行消毒，CL-浓度为5PPm，效果很好!

5.4 暑期即将来临，建议养鸡户一定要注意水质的变化，加强饮水的卫生与消毒，减少热应激，避免该病的发生。

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逆境EQ

[center]养鸡慎用抗生素
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[center][center]张学松?
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??改革开放前我国的养鸡业以个体农户散养为主，鸡病比较少，所以不常用疫苗防病和用抗生素治疗。改革开放后，情况发生了根本变化，我国从发达国家引进了大量的蛋鸡、肉鸡优良品种和先进的饲养技术，生产方式以专业户和养鸡场集约化生产为主。从散养到集约化饲养，饲养密度增加1倍，发病率要增加4倍以上，所以现在鸡病成了养鸡成败的关键。为了战胜疫病取得好的经济效益，于是大量使用疫苗和抗生素防病治病。开始使用时效果很明显，但是随着病菌耐药菌株的增加，抗生素的用量越用越大，种类越用越多。发生细菌病用抗生素治疗，发生病毒病用抗生素防止继发细菌病，无病用抗生素预防发病(如预防鸡白痢)，现在滥用到养鸡自始至终离不开抗生素。其结果是抗生素的副作用越来越明显，主要是：

    1 在鸡的回肠和盲肠中，每克内容物分别含有109和1010共生菌。这些数量庞大的共生菌不仅影响鸡的健康而且影响消化吸收，进而影响生产性能。最新的营养观点认为，未来的家禽营养不但要考虑营养需要和饲料配方，而且要考虑共生菌的种类和数量。例如肉鸡饲喂高鱼粉小麦日粮，改变了肠道微生态的分布，因而易引起坏死性肠炎。滥用抗生素，在杀灭病原菌的同时也杀死了共生菌，从而影响鸡的健康和生产性能。

2 长期滥用抗生素，使病原菌产生耐药性。有些病菌也能感染人，例如伤寒沙门氏菌，弯曲杆菌等。这些病菌产生耐药性以后再感染人，给治疗带来极大困难。4年前美国出现过人感染鸡弯曲杆菌，发病后用抗生素治疗无效而死亡的病例。现在发达国家对食品安全极为重视，美国从1998年1月开始实施“公害分析临界控制点”(HACCP)，明确规定了食品中的有害物质(包括细菌、药残等)的临界点，超标的一律不许上市。欧盟宣布从1998年12月起禁止在养鸡生产中使用螺旋霉素、杆菌肽锌、维及毒素和泰乐菌素，而且禁用范围有扩大的趋势。发达国家养鸡抗生素越用越少，我国养鸡抗生素越用越多，而且对其危害性还认识不足。再这样下去，必将给我国的养鸡业造成灾难性的影响。这决不是危言耸听!今年年底或明年年初，我国将加入世界贸易组织(WTO)，这对我国出口鸡肉大大有利，但是药残超标的鸡是没人要的。另一方面，随着我国人民生活水平的进一步提高，对身体健康更加重视，对食品中药残的要求越来越苛刻。我国加入WTO后，美国无公害鸡大腿将大量倾销到我国，到那时我们的药残超标鸡将无人问津。试想，失去了国内外市场，我们的鸡还养得下去吗?

?现在禽病这么多，不用抗生素防治怎么办呢?发达国家的经验是采用生物安全措施，即通过防疫制度和卫生措施将病原拒之门外，通过“全进全出”的生产方式斩断病原在鸡场内的传递。为了进一步发挥“全进全出”饲养方式的防病作用，发达国家已采用分段饲养法，即雏鸡、青年鸡和生产鸡分别养在不同的鸡场。这样缩短了全场清群消毒的时间，有利于防病。在此基础上适当使用疫苗和药物。

?发达国家多数已消灭了鸡白痢，而在我国鸡白痢还比较普遍，现在主要用抗生素类药物预防，不用抗生素预防，怎么办呢?自从1973年Nurmi教授等首次采用并证明给沙门氏菌易感性高的幼雏投喂无沙门氏菌感染的健康成年鸡盲肠内容物悬浮液或其厌氧培养物，可以排除再次侵入的沙门氏菌。这一现象称之谓沙门氏菌的竞争排斥法。用此法防制雏鸡白痢病，可通过新生雏第一次饮水或调喂细菌制剂，在其消化道建立保护性菌群，该保护作用在几小时内就会出现，如不遭到破坏可维持终生。

?细菌竞争排斥法也可用于其它细菌病的防治。鸡的肠道中有400多种细菌共生。它们之间也存在相互依存和相互制约的关系，例如一种细菌消化纤维素的终产物是乳酸盐，乳酸盐经另一种细菌物作用生成丙酸盐等。实验证明不同种的共生菌按一定的比例制成微生态制剂可用于防制细菌病。这一方面的工作国内外正在研究中，而且取得了一些实用成果。

?鉴于我国目前鸡病比较严重，完全不用抗生素防病治病是不现实的。本文的目的是阐述滥用抗生素的危害，希望养鸡者应慎用抗生素，逐步过渡到养鸡不用抗生素。

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[center]改进免疫操作提高免疫效果
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[center][center]刘文林?
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　摘要：免疫操作好坏，决定最终的免疫效果。只要免疫前中后各时期的细节管理妥善，在好的饲养管理和严格的防疫的前提下，必然能达到一个理想的免疫效果。

本人根据秦皇岛正大种鸡场多年无疫情的实践经验，主要总结如下：

1 高质量的疫苗是防病的根本保证

?在合理免疫程序的前提下，我们选用疫苗时，必须了解疫苗的特性、有效期、冻干瓶真空度、如何运输、保存等。确保疫苗没有什么问题之后方能选用。

2 疫苗贮存

?疫苗保存一般认为放到冷藏室就不用管了。这么做是很不够的。疫苗贮存后必须定时检测温度，看温度是否恒定。注意是否经常停电。因为温度不适或忽高忽低都会影响疫苗的活力，最终影响免疫效果。

3 疫苗接种方法正确

?常用滴眼、滴口、滴鼻、饮水、喷雾、注射等。不同的途径适合不同类型疫苗，这主要是由疫苗本身特性决定的，不同途径获得的免疫保护效果时间也是有差异的，操作手法对免疫效果也有影响。以新城疫Lasota为例，滴眼、滴口、饮水、滴鼻、喷雾几种途径所能产生保护的时间以喷雾为最快为3天，滴眼、滴鼻次之，6-7天产生保护，饮水、滴口最慢为9天。因此在选择某种途径时要结合鸡群状况、抗体水平，选择最适宜的途径，要按照疫苗的特性，选择接种途径。灭活苗必须经注射才能产生抗体起保护作用。否则可能无效。?在进行滴眼、滴口、滴鼻免疫操作时，动作要慢，等疫苗吸进之后再把鸡放下，过急操作导致疫苗流出常会造成免疫效果差或失败。每次在滴瓶中加疫苗量不要太多(150-200羽/次)。稀释过的疫苗要放在保温箱中，否则会因手温或环境温度过高影响疫苗活性，进而影响免疫效果。

?在进行饮水免疫时，先根据鸡只大小和温度情况计算出饮水量，在水中加入0.5%脱脂奶粉，静置10分钟，清除氯离子后再放疫苗，加入疫苗后搅拌均匀。在饮水免疫开始前停水3-4小时，视季节和舍温确定，舍温高停水时间要短些，舍温低则要长些。饮水免疫时水位要充足，保证在30分钟左右使全群均匀饮到疫苗水，同时注意驱赶鸡只，防止个别鸡饮不到疫苗水。饮水免疫根据鸡大小控制好舍温，特别是小鸡要适当提高舍温，否则常常造成挤堆，饮水不均或死亡，饮水槽和稀释疫苗的桶要用塑料桶，不要用铁桶，否则将影响免疫效果。

?肌肉注射是在接种灭活苗和某些弱毒活苗时常常采用的方法，尤其种鸡多用。胸肌注射一般采用双侧轮换注射，这次左，下次右，注射针头每100只鸡更换一次，针头粗细视鸡的大小来确定。针头以1.5cm短针头为宜，注射深度根据鸡体大小确定，大鸡用粗针、深扎。小鸡用细针、浅扎。因为油乳剂灭活苗扎的过浅容易从针孔流出造成免疫失败，过深容易扎到骨头或肝脏，造成应激，降低免疫效果或死亡。此外油乳剂疫苗在使用前最好预热到30℃再注射，冷藏的油剂疫苗直接注射，对鸡冷应激，影响免疫效果，预温的油苗减少对鸡冷应激，同时也能保证好的免疫效果。

4 做好免疫准备，减少应激刺激

?免疫前做好隔段，每隔段鸡数在1500只左右，拦好后防止跑鸡，光线适当暗些，滴眼、注射选择技术熟练责任心强的人员操作，免疫速度要慢，保证免疫质量，同时对免疫过的鸡进行检查，看是否有漏免的鸡，放鸡的位置，放些装有垫料的袋子，把鸡放到袋子上，不要直接扔到地上，减少对鸡的伤害，操作人员附近光线要好，在夏季免疫尽量避开一天中最热的时间。

5 加强饲养管理，加强防疫

?防疫消毒是重中之重。人员、车辆、物资严格消毒，切断病原侵入途径，避免野毒感染，定期跟踪监测抗体水平，检查免疫效果，做好鸡群的抗体水平记录，做到对鸡群健康状况全面了解。

通过以上免疫操作前中后期各细节的严格管理，使各种疫病均得到有效控制，保证了鸡群的健康和生产水平的正常发挥。

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