家禽抗体检测的目的及注意事项

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免疫是现代肉鸡疫病防控中的重要环节和措施，众所周知，免疫效果的评估主要是通过抗体水平的检测来进行，这也是我们对于抗体检测的日常认识。

什么是抗体检测？抗体检测就是通过定期、系统的从肉鸡群体中采取一定比例的血清样品，用特异性的血清学试验方法，检测不同疫病的特异性抗体水平。实际上，抗体检测除了免疫评估还具有其他方面的目的和意义。

综合起来看，抗体检测具有以下三个方面的作用：

1、评估免疫效果，确定免疫程序。

例如，鸡群接种新城疫灭活疫苗后，经2-3周测血清中的HI抗体效价，若提高2个滴度以上，表示鸡的免疫应答良好，疫苗接种成功；若HI抗体效价无明显提高，表示免疫失败。

正常鸡群的HI抗体水平（血凝抑制滴度）是以抽检样品的HI抗体效价log2的几何平均值表示的，同时还应计算抗体滴度的变异系数CV值。如果某鸡群的10份样品中，HI抗体效价平均水平在410g2以上，且CV值≤40%，说明该鸡群为免疫鸡群，且免疫效果良好。若在检样中HI抗体效价的最高值与最低值相差太大时，则不仅要计算平均值和CV值，更应计算临界水平以下的样品数在全部样品中所占的百分比，以此来决定免疫与否。

2、进行健康检测，辅助疫病诊断。

一般认为肉鸡的免疫临界水平为4log2，随地区和感染压力的不同而稍有差异。肉鸡ND和H9检测离散范围在4log2-8log2之间，如抗体滴度≥9 log2，提示鸡群可能受外界毒株感染所致。两者离散范围大小是评价鸡群免疫应答反应效果和野毒感染的评价的重要指标。在诊断临床疑似血凝性病毒感染鸡群时，应根据鸡群发病病程采集血清，发病初期与中后期间隔7-10天采样，然后根据HI抗体变化规律来判定是否有过感染。发病后7-14天抗体滴度升高2log2-4log2基本可以确定。若有10%以上的鸡群出现11 log2以上的高血凝抑制滴度，说明鸡群已受强毒感染。

此外，病毒经过鸡胚接种分离纯化后，通过测定其血凝价进行诊断。其他，还可利用发病鸡群的阳性血清与不同毒株单一抗原进行HI试验，以此判断鸡群是否感染变异毒株。

3、评价疫苗质量，选择高效疫苗。

通过疫苗免疫后抗体水平的变化，可以评判疫苗质量，例如疫苗效力实验，严格的实验室条件下的检测，结果具有代表性。通过疫苗免疫后抗体水平的检测，也是临床上常用的评价疫苗质量的主要方法之一。但前提是要尽量保证其他条件的一致性，如鸡来源、品种、日龄、饲养管理等等，才能得到较为准确的结果。另一种常用的方法就是大数据的积累，如某一地区使用两种不同疫苗的鸡群长期的抗体水平监测，该方法具有一定的代表性，但受到饲养管理等因素的影响可能会有较大的偏差，可以与在实验室条件下的检测结果互为对照。

目前抗体检测是肉鸡日常疫病检测最为基本的检测项目之一，但是不同实验室之间、不同检测人员之间检测结果均存在一定的偏差。因此，如何确保抗体检测的准确性和代表性，更好地指导临床应用，应该从以下几个方面：

（1）合理采样比例。大型鸡场每次进行抽测时，抽样率一般不低于0.1％-0.5%；小型鸡群，抽样率应有所增加，一般认为理想的抽样率应为2.0%。从实践和统计学分析表明，23份样是比较科学、合理的样本数量。

（2）选择匹配抗原。所选用检测抗原应与疫苗毒株相匹配，否则检测结果就会存在差异，所以除了抗体水平高低，还应该关注检测抗原与毒株之间的匹配性。随着养殖规模的不断扩大，现在疫病的变异越来越快，为了更好地预防疫病，疫苗的毒株也在不断地更新。抗原交叉实验结果表明，变异毒株抗原与标准毒株抗原之间是存在一定的差异，如La sota与A-VII。因此，最好是选用疫苗厂家提供的对应抗原。且稳定使用的抗原不易频繁更换，如果更换新类型的抗原应进行交叉实验，以确定二者之间的差异性，避免因抗原更换而导致检测误差。

（3）规范操作流程。结合国标，制定检测规范，明确关键环节的操作细则，包括环境温度、稀释手法与次数、反应时间、读数标准、红细胞采集鸡只要求、4单位抗原配制与标定，红细胞浓度配制及标定等，保证检测过程和结果的标准化、规范化。

（4）连续检测操作。抗体检测应具有连续性，系统的检测结果更具有分析意义，单次检测数据意义不大。

（5）建立自身标准。每个实验室应根据自己公司的免疫程序、疫苗种类等制定本公司抗体基准线，作为鸡群抗体是否正常、是否需要强化免疫的标准。

总之，肉鸡抗体检测是一项简单而实用的检测方法，日常的疫病防控中我们应更好地运用好这项技术，充分理解其原理，让其发挥出更多的应用价值！

作者：张永升

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