左旋咪唑对鸡马立克氏病疫苗免疫效果的影响

少林寺

左旋咪唑为咪唑衍生物，是兽医临诊广泛应用的驱线虫药物，具有广谱、高效、药源充足、性质稳定等优点。Renouｘ等（1971）发现该药能增强小鼠布氏杆菌菌苗免疫效果后，引起了人们极大的兴趣，对左旋咪唑的免疫调节作用进行了广泛的研究。
　　一、材料和方法

　　1. 动物：1日龄健康黄羽雏鸡，购自中国农业科学院畜牧研究所养鸡场。

　　2. 药品与试剂：左旋咪唑，南京第二制药厂生产，批号970901；HVT冻干疫苗，1 000羽/瓶，北京中海动物保健科技有限公司生产，批号990413；鸡新城疫（ND）LoSta弱毒+传染性囊病（IBD）弱毒冻干二联疫苗，1 000羽/瓶，北京中海动物保健科技有限公司生产，批号990513。伴刀豆球蛋白A（ConA），Sigma C-2631；噻唑蓝（MTT），Sigma M-2128。

　　3. 分组：将鸡随机分为10毫克/千克·天左旋咪唑给药组和空白对照组，每组20只。

　　4. 给药与免疫接种：从1天龄开始，按分组要求饮水给药，早晚各1次，连用3天。1天龄时肌肉注射HVT冻干疫苗0. 2毫升（含2 000蚀斑单位）/只。通过饮水正常免疫ND-IBD二联疫苗，每鸡各1羽份。

　　5. 观察指标：

　　（1）用微量法淋巴细胞转化试验检测鸡外周血T淋巴细胞功能：分别在7、14、21、28、35天采集肝素抗凝外周血，按常规方法分离外周血淋巴细胞，用RPMI 1640培养液配成1×10个/毫升淋巴细胞悬液。淋巴细胞悬液涂片，瑞氏染液染色观察，淋巴细胞纯度在95%以上。96孔细胞培养板，每孔加入淋巴细胞悬液100微升，分别加入100微克/毫升伴刀豆球蛋白A 50微升（终浓度33微克/毫升）。将培养板置37℃恒温箱内培养56小时，加入5毫克/毫升MTT溶液15微升，摇匀，继续培养4天，加入0.04摩尔/升酸化异丙醇100微升，在测定波长570纳米处测定OD值。

　　（2）ELISA检测抗MD抗体滴度：采集非抗凝外周血，分离血清。将火鸡疱诊病毒（HVT）在鸡成纤维细胞上培养48小时，消化和收集培养病毒后的鸡成纤维细胞，2 500转/分离心15分钟，弃去上清液，用0.5摩尔/升 pH9.6碳酸盐缓冲液配制成每毫升含细胞5×10个。96孔酶标反应板，每孔加5×10个细胞/100微升，抗原包被液，4℃过夜，去上清液，用固定液在室温固定，甩干后洗涤。

　　待检血清作1:100稀释，每孔100微升，每样3个重复，同时每板用标准参考阳性血清及阴性血清对照，3个重复。依ELISA常规方法测定抗MD抗体滴度，结果以OD450纳米值表示。

　　6. 统计学处理：采用t 检验法比较各处理组与空白对照组的差异显著性。

　　二、结果

　　10毫克/千克·天左旋咪唑用药后14～28天，鸡外周血T淋巴细胞转化比空白对照组明显升高（结果见表1）。

　　表 1 左旋咪唑对HVT免疫鸡外周血T淋巴细胞转化的影响（OD570nm） n＝20

药物 剂量
（mg/kg） 日龄
7 14 21 28 35
左旋咪唑 10 0.527±0.036a 0.768±0.058b 0.910±0.080b 0.776±0.046b 0.543±0.049a
空白对照 0 0.440±0.038a 0.548±0.044a 0.654±0.078a 0.550±0.051a 0.545±0.040a


　　（同列数据角号不同者差异显著，P<0.05，下同）

　　10毫克/千克·天左旋咪唑用药后7～14天，鸡血清抗HVT抗体滴度也比空白对照组明显升高（结果见表2）。

　　表 2 左旋咪唑对HVT免疫鸡血清抗HVT抗体滴度的影响（OD450nm） n＝20

　　

物 剂量
（mg/kg） 日龄
3 7 14 21 28 35
左旋
咪唑 10 0.442±0.035a 0.781±0.073b 0.931±0.041b 0.683±0.105a 0.444±0.083a 0.473±0.087a
空白
对照 0 0.410±0.049a 0.608±0.074a 0.649±0.066a 0.626±0.074a 0.396±0.035a 0.362±0.034a

　　三、讨论

　　左旋咪唑为兽医临诊第一个被发现具有广泛免疫调节作用的人工合成化合物。左旋咪唑有促进细胞免疫功能，在体外可使来源于淋巴细胞转化率低下患者的淋巴细胞增殖应答反应恢复正常，在体内可使外周血淋巴细胞增殖反应增强，促进淋巴细胞释放淋巴因子。笔者以往的研究结果也表明左旋咪唑能增强鸡细胞免疫功能，可使正常鸡外周血T淋巴细胞的转化明显升高，Th细胞百分比明显升高，使Ts细胞百分比降低，Th/Ts细胞比值升高，促进鸡外周血T淋巴细胞的IL-2活性。

　　左旋咪唑也作用于机体的体液免疫，可通过调节T细胞的功能而间接影响抗体的产生。有关左旋咪唑影响抗体产生的报道差异较大，有报道左旋咪唑能促进体液免疫功能，另一方面也有认为左旋咪唑对抗体产生无影响，尚有左旋咪唑抑制体液免疫的报道。笔者以往的研究结果也表明左旋咪唑能增强正常鸡体液免疫应答反应，使鸡抗胸腺依赖性抗原SRBC和BSA抗体滴度、抗非胸腺依赖性抗原BA抗体滴度均明显升高。

　　关于左旋咪唑对鸡马立克氏病的作用，Confer等（1981）报告MDV感染鸡外周血淋巴细胞增殖反应受到抑制，左旋咪唑处理可使外周血淋巴细胞增殖反应明显增强。Kalra等（1979）报道在接种MD疫苗同时或接种后应用左旋咪唑，240天以上鸡存活率明显升高。Narang等（1994，1995）报道，鸡接种MD疫苗后应用左旋咪唑，人工攻击MDV，其鸡体MDV检出率降低，免疫保护率明显升高。本研究结果显示用疫苗免疫的同时应用左旋咪唑明显促进了马立克氏病疫苗接种鸡细胞免疫和体液免疫的功能，外周血T淋巴细胞转化明显增强，血清内抗MDV特异性抗体明显升高。

问心无愧

左旋咪唑对几乎所有疫苗包括灭活苗都有作用

热呼呼

左旋咪唑对几乎所有疫苗包括灭活苗都有作用

共赢未来

引用第1楼问心无愧于2009-05-21 17:50发表的  :
左旋咪唑对几乎所有疫苗包括灭活苗都有作用

xmyb007

左旋咪唑为广谱、高效、低毒驱虫药。
左旋咪唑可通过虫体表皮吸收，迅速到达作用部位，使延胡索酸还原酶失去活性。此外，左旋咪唑还能使虫体肌肉挛缩，加之药物的拟胆碱作用，使麻痹的虫体迅速排出体外。
左旋咪唑具有明显的免疫调节功能。
家禽：对鸡蛔虫、异刺线虫、封闭毛细线虫的成虫、幼虫及未成熟虫体均有良好驱除效果。内服或用10%溶液点眼能杀灭家禽曼氏类旋尾线虫（眼虫）。  
火鸡患气管比翼线虫（张口线虫）时，按4mg/kg量置饮水中，连用3天，能全部杀灭虫体。
鹅裂口线虫病，应用左旋咪唑（70mg/kg）也有良效。
患鸽蛔虫的肉鸽，按20mg/kg量，连服二次（间隔24小时），虫卵转阴率91.7%。

龙滨

同意1楼及4楼的管点，楼主辛苦。

紫罗兰

对疾病后抗体提高也有一定作用   我用过效果还可以不过就是原料苦点影响饮水   希望老师点评