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发表于 2009-4-29 00:48:10
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来自： 中国山东
转]自家疫苗的制备与使用(2008-05-29 13:56:29)
标签：杂谈
一、制作过程 1、采集病料 病料取自症状典型病程较长或濒临死亡的病猪，病料组织为病原体侵害的靶器官，以高致病性猪蓝耳病为主症的，应取肺、肝、淋巴结。采集的病料迅速作冷冻处理以防变质。
2、切碎 用1000U/ml的双抗液冲洗病料表面,将冷冻的病料切成小块(除去筋膜气管及较粗的支气管,摘除心脏,但一定要取出肺门淋巴结),便于放入搅拌机中。
3、搅碎将碎块放入高速匀浆机中搅拌4-6次,搅成肉糊。 4、稀释按病料与生理盐水1：3-5的比例向肉浆糊中加入生理盐水成稀泥状。 5、过滤：将上步制成物分三次过滤，第一次用一层纱布过滤，第二次用两层纱布过滤，第三次用四层纱布过滤。（每次的滤渣丢弃，滤液待用）向滤液加入生理盐水至所需要制作的量。
6、醛化量 用适量的生理盐水稀释甲醛和溶解叠氮钠。（甲醛用量占自家苗量的千分之八；叠氮钠用量占自家苗量的万分之五） 7、混合 将第6所制作的溶液加入第5所制作的滤液中。（边搅拌边加入） 8、振荡 将第7步所制作的溶液置振荡器上1小时，放入37℃培养箱中72小时（其中每隔4-6小时拿出来置振荡器振荡20-30分钟），然后于2-8℃冷藏保存待用。
二、使用方法 1、无菌检查 将灭活后的自家组织苗接种普通琼脂培养基上，37℃培养24-72h，未见有细菌生长。 2、先用自家苗注射一两窝小猪，观察两天，看有无发生过敏反应、注射部位发生炎症。如果没有上述反应说明自家苗制作成功。 3、效力试验 采集１０头注射自家苗１５天仔猪的血清，用猪蓝耳病抗体ＥＬＩＳＡ检测试剂盒检测效果。 4、临床观察 假定健康的若干头仔猪、母猪和育肥猪注射自家苗后，若未再发生类似的临床症状，则表明效果明显。 5、使用量 母猪产前４周注射１０ml／头，乳猪：７－９日龄肌注１ml/头，１５－１８日龄注射２ml/头，小猪（３０－３５日龄）３ml／头，中大猪５－１０ml／头。
6、加双抗液：自家苗在临用时需加Ｓ．Ｐ．液或双抗液。其配制方法：青霉素（４０万Ｕ）５支，链霉素（２００万U）１支，共同溶于２００ml灭菌无离子水中，混合后分装小瓶，置－１０℃～－２０℃冰箱保存备用（１万单位／ml）。临用时，按１％的量加入营养液或其他溶液中，最后浓度是青霉素100U/ml，链霉素１００U／ml。
三、讨论与体会 1、在高致病性猪蓝耳病发病期间，我县制备使用的自家苗，注射生猪达数万头之多,通过临床观察有预防和治疗的双重作用,对控制我县高致病性猪蓝耳病的流行起到了一定作用。如水田坝乡在高致病性猪蓝耳病发病期间，采用自家苗普注的方法，据水田坝乡畜牧兽医服务中心观察发病数减少，有明显的预防控制作用；对病猪注射自家苗后有一定的治疗作用。如水田坝乡辛家坪村李某猪场发生高致病性猪蓝耳病已死亡7头，剩下存栏 65 头全部是病猪，用自家苗每头注射10－１５ml后，放弃治疗，不再用其它任何药物，只是每天用口服补液盐让其自饮，数天后患病猪逐惭恢复，除死亡3头外，其余全部痊愈。相当部分管片兽医反映有类似情况。
2、影响自家疫苗质量和效果的因素很多：１）取自活体病程长的猪的病料效果要好；2）使用来自本地、本场猪病料制作的自家苗效果要好；3）自家苗适宜的浓度效果要好；4）对假定健康猪防疫效果要好；5）病料采后迅速降温冷冻保存不腐败制作的自家苗效果要好；6）制作中充分灭活的自家苗效果要好。
3、自家苗治疗作用的机理不明，可能性是自家苗中的特异性抗体的作用，也可能是异体蛋白的刺激激活了免疫系统而提高了机体免疫力。其机理尚须研究。 |
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