不同剂型氟苯尼考对实验性鸡大肠

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氟苯尼考是由先灵保雅（Schering Plough)公司研制成功的新一代氯霉素类动物专用广谱抗生素，具有抗菌谱广、抗菌活性强、吸收良好等优点，且无致再生障碍性贫血作用，相对比较安全[1-2].该药20世纪90年代陆续在日本、欧美及中国等上市以来，主要用于牛、猪及水产类动物的细菌性感染[3].氟苯尼考的抗菌谱及抗菌活性与氯霉素相似，如大肠杆菌、克雷伯菌、溶血性巴氏杆菌、多杀性巴氏杆菌、奇异变形杆菌、金黄色葡萄球菌、胸膜肺炎放线杆菌及沙门氏菌等均敏感，且对耐氯霉素的细菌仍然敏感[3].由于氯霉素有严重的致再生障碍性贫血的不良反应，在多个国家已禁止用于食品动物。因此，在动物疾病防治上，尤其是食品动物，氟苯尼考具有广阔的应用前景。目前国内应用的氟苯尼考制剂主要为预混剂，通过混饲给药。但在严重感染等情况下，由于动物摄食减少，混饲给药往往难以保证疗效，常需要饮水给药或注射给药。为了比较氟苯尼考三种不同制剂的疗效，分别通过拌料内服给药、饮水给药和肌注给药，对人工诱发鸡大肠杆菌病进行了试验性治疗，以期为临床合理选择适宜的制剂提供依据。   

　　1.1 药品和试剂氟苯尼考预混剂（广东养宝生物制药有限公司）。   

　　氟苯尼考可溶性粉、氟苯尼考注射液由广东养宝生物制药有限公司技术中心按照下述方法制备。   

　　采用共沉淀法制备氟苯尼考可溶性粉：取氟苯尼考和聚乙烯吡咯烷酮（polyvinyl pirrolidone， PVP)适量加入无水乙醇中溶解，加热挥干乙醇，得到药物和PVP的共沉淀物，干燥粉碎后备用。分别制得理论药物含量250 g/kg和125 g/kg的氟苯尼考PVP固体分散体水溶性粉剂。   

　　采用丙二醇为主要溶媒，将氟苯尼考配制成理论含量为20 g/L的注射液。   

　　制剂中氟苯尼考含量测定采用HPLC.色谱条件为：流动相为0.01 mol/L的乙酸钠溶液与乙腈以2∶1比例混合，调节pH为4.4；色谱柱为LG C-18-ODS反相色谱柱，4.6 mm×250 mm，粒度5 μm；紫外检测波长254 nm；流动相流速1 mL/min；含量计算采用标准曲线法。   

　　1 材料与方法1.2 实验动物一日龄AA鸡由南海某禽场提供。饲养前对房舍、器具进行彻底消毒。先进行一周适应性饲养，然后进行常规免疫接种。饲喂至15日龄，鸡只体况无异常表现，随机分成5组（n=30），分别为健康对照组、感染对照组、氟苯尼考预混剂组、氟苯尼考可溶性粉组和氟苯尼考注射剂组。试验前饲养管理条件一致，饲喂不含抗菌药的全价饲料，自由饮水。   

　　1.3 MIC测定采用试管二倍稀释法[4]测定氟苯尼考对大肠杆菌（O78），中国兽药监察所提供的标准菌株)的MIC. 1.4 人工诱发大肠杆菌病将大肠杆菌（O78)菌株接种普通琼脂平板，37 ℃培养24 h后，挑选典型菌落接种于营养肉汤中，37 ℃培养18 h，将肉汤培养物肌肉注射接种于鸡。取感染致死鸡的肝脏进行细菌分离。挑选典型单个菌落接种于营养肉汤，37 ℃培养16 h，以营养肉汤适当稀释后作为接种菌液。除健康对照组外，其余各组每只鸡均肌肉注射稀释菌液0.5 mL. 1.5 试验性治疗预混剂组于接种前24 h按氟苯尼考剂量?100 mg/kg?混饲给药，可溶性粉组于攻毒后按氟苯尼考100 mg/L饮水，连续给药5 d；注射剂组于攻毒后4 h鸡只出现出现明显症状时，按氟苯尼考20 mg/kg?肌肉注射给药。每天观察记录鸡只的临床症状，剖检死亡鸡只，做细菌分离培养，以确定死因。分别以死亡率、有效率和平均增重评价不同制剂的疗效。   

　　2 结果2.1 制剂中氟苯尼考实际含量测定结果采用HPLC分别测定水溶性粉和注射剂中氟苯尼考含量。在本试验采用的HPLC试验条件下，所得典型色谱图中，氟苯尼考峰型尖锐对称，出峰时间为10.60 min，无其他干扰峰。根据样品液HPLC测定结果可计算出水溶性粉中药物的标示含量。经测定，理论含量为250 g/kg和125 g/kg的氟苯尼考水溶性粉，实测含量分别为244.5 g/kg和121.8 g/kg；理论含量为20 g/L的氟苯尼考注射液，实测含量为20.2 g/L. 2.2 体外抑菌试验结果经测定，氟苯尼考对大肠杆菌的MIC为4.0 μg/mL，与文献报道结果相近[5]. 2.3 试验性治疗的疗效感染对照组鸡接种大肠杆菌后呈急性经过，30只鸡24 h~72 h死亡22只，72 h后未见死亡。病死鸡病变主要表现为腹膜炎、气囊炎、肝周炎及心包炎。三种氟苯尼考制剂给药后，与感染对照组比较，能不同程度减轻临床症状、减少死亡。氟苯尼考预混剂组、氟苯尼考可溶性粉组、氟苯尼考注射剂组的死亡率分别为30%、10%和6.7%，与感染对照组比较差异极显著（P<0.01）。试验结束时，由于感染对照组死亡鸡只较多，未计算该组平均增重。健康对照组、预混剂组、可溶性粉组和注射剂组的平均增重分别为185 g±35 g、165 g±30 g、153 g±28 g和148 g±21 g，各组间差异不显著（P>0.05）。   

　　3 讨论氟苯尼考已在国内批准用于猪、牛、禽等多种动物，预防和治疗细菌性疾病。氟苯尼考对兽医临床常见病原体均敏感，如对大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌的MIC在3.2 μg/mL~6.4 μg/mL之间，对猪胸膜肺炎支原体的MIC为0.20 μg/mL~1.56 μg/mL[1].对某些耐药菌株尤其是耐氯霉素菌株仍有效。该药在兽医临床的应用将会越来越广泛。目前国内应用的制剂主要为预混剂和注射剂，国外主要用注射剂。开发不同应用目的的氟苯尼考制剂，将有利于充分利用氟苯尼考这一优秀的药物资源。   

　　3.1 关于氟苯尼考制剂目前市场销售的氟苯尼考制剂主要为预混剂和注射剂。不同制剂的应用目的各异，疗效也有一定差异。就氟苯尼考而言，预混剂预防用药时给药方便、效果确实。但如果发生比较严重的感染，往往由于动物采食量严重下降甚至食欲废绝，通过混饲给药治疗效果较差。但此时动物的饮水量基本正常，饮水给药能保证疗效。由于氟苯尼考本身难溶于水，开发适宜的饮水剂具有实际意义。注射剂则在治疗严重细菌性感染方面有其独特之出，主要是起效快、吸收完全、血药浓度高。   

　　但目前市售的注射剂多为高浓度注射液，在家禽应用前需要进行适当稀释，实际应用不便。因此研制适合家禽给药的新制剂，将大大提高氟苯尼考在家禽细菌病治疗方面的应用效果。本试验所制备的氟苯尼考注射剂可方便家禽注射给药。   

　　按照本研究方法制备的氟苯尼考水溶性粉易溶于水，适宜用于发病动物饮水给药。制备方法经适当改进后可进行扩大生产。   

　　3.2 不同氟苯尼考制剂疗效的差异疗效试验结果表明，预混剂组、可溶性粉组及注射剂组的死亡率均显著低于感染对照组，而有效率显著高于感染对照组的自愈率（P<0.01)，说明氟苯尼考预混剂、可溶性粉及注射剂均对鸡大肠杆菌有较好疗效。但与注射给药和饮水给药相比，混饲给药的有效率为70%，显著低于前两组（P<0.05).由于本试验为人工诱发的鸡大肠杆菌病，发病急、病程短，发病时鸡只采食量大大减少，但仍能正常饮水。故饮水给药能保证鸡体内较高的血药浓度，混饲给药则由于鸡只采食量不足，给药剂量实际不足，导致两种内服制剂实际疗效出现一定差异。另外，本试验所用饮水剂为氟苯尼考的固体分散体，载体材料使氟苯尼考以分子状态均匀分散，增大了药物的溶解性和溶出速度，也有利于药物的吸收。与普通口服溶液相比，固体分散体便于贮存运输，应用时可根据情况采用饮水给药或混饲给药的方式，具有广阔的市场前景。注射剂的治疗效果比较理想，但给药不方便、治疗成本高、对动物有不良应激反应。今后可开发长效制剂。   

　　临床给药剂量的确定主要依据药物的体外抑菌试验和药动学研究结果。氟苯尼考一般推荐治疗剂量为肌肉注射20 mg/kg[6].关于内服给药剂量，各种文献报道有一定差异。曾振灵等报道，氟苯尼考按40 mg/kg体重直接内服，每天给药2次，连用3天，对人工诱发鸡大肠杆菌病疗效可达80%[5]；杨鸿等以氟苯尼考200 mg/kg饲料混饲给药，对人工诱发鸭大肠杆菌病疗效达95.3%[7].吴南洋等报道，对自然发病的鸭疫里氏杆菌病，早期混饲给药（50 mg/kg饲料)、以注射剂饮水给药（50 mg/L水)治疗，有效率分别可达85%和100%[8].本试验对人工诱发鸡大肠杆菌病，用氟苯尼考预混剂混饲给药（100 mg/kg)、氟苯尼考可溶性粉饮水给药（100 mg/kg)的有效率分别为70%和90%，试验中给药方案与临床实际给药情况相符。实际用药时，必须考虑用药的方便性与实际疗效，作者建议，对家禽大肠杆菌病，在发病早期或病情较轻时，可以采用氟苯尼考100 mg/kg混饲给药，发病较急或病情较重，动物采食量下降时，可用水溶性粉、口服液等制剂（100 mg/L)饮水给药，必要时采用注射给药（20 mg/kg）。   

　　有关不同制剂氟苯尼考在目标动物的药动学研究，将进一步揭示该药不同制剂疗效差异的实质，有待进一步研究

平淡不平凡

学习了

87529847

学习了

平安就好

学习了！

（昨夜星辰）

谢谢楼主。

沂南养鸡人

学习了谢谢楼主

jiashaobo123

学习了谢谢楼主

金鸡引凤

引用第1楼养鸡好难于2009-04-07 20:52发表的  :
学习了 [url=http://bbs.jbzyw.com/job.php?action=topost&tid=41759&pid=355026][/url]