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免疫操作连载(二)----疫苗准备 疫苗在使用前要进行详细检查和登记工作,是形成可追溯体系的重要一环。 疫苗出库前应按照免疫程序要求的品种、毒株进行核实,并检查疫苗包装是否破损、物理性状是否发生变化;包装破损或泄露、标签不清的应该弃用。并对疫苗生产厂家、批号、有效期等进行详细登记,过期疫苗应该弃用。对于保存条件不佳的疫苗,应咨询专业人员谨慎使用。 活疫苗使用前应选择温度接近的专用稀释液进行无菌稀释,没有专用稀释液时,可以选用蒸馏水或生理盐水进行稀释。 表:不同用水对疫苗效价有不同程度的影响。 稀释液或水样 | | 专用稀释液 | 106.2EID50/羽份 | 0.2% | 0.01MPBS(PH7.0) | 106.1EID50/羽份 | 5% | 蒸馏水 | 105.9EID50/羽份 | 20% | 孵化场水样 | 103.2EID50/羽份 | 99.9% | 城市自来水 | 104.2EID50/羽份 | 99% | 饲养场水样 | 105.3EID50/羽份 | 87% | 饲养场水样+0.2%鲜奶 | 106.1EID50/羽份 | 10% | 饲养场水样+疫苗保护剂 | 106.1EID50/羽份 | 2% |
表:不同免疫方法对水质要求 用途 | 标准 | 备注 | 饮药用水 | 不含氯离子、消毒剂、重金属离子及其他任何有机、无机污染物,PH=5.5=7.5 |
| 注射用水 | 蒸馏水、专用稀释液 |
| 点眼滴鼻 | 中性水、去离子水、蒸馏水、生理盐水、磷酸盐缓冲液、专用稀释液 |
| 喷雾免疫 | 中性水、去离子水、蒸馏水、稀释液用蒸馏水或去离子水(不得使用生理盐水) | 最好加5%甘油 | 饮水免疫 | 不含氯离子、消毒剂、重金属离子及其他任何有机、无机污染物,PH=5.5=7.5 18-22℃ |
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冻干活疫苗大多数疫苗瓶内部为真空状态,直接打开疫苗瓶后活疫苗会应压力骤然变化而部分失活,也会应气流造成疫苗冻干粉飞散。所以冻干活疫苗应该严格按照无菌稀释进行操作,用一次性无菌注射器抽取3-5毫升稀释液后注入疫苗瓶内轻微摇晃使冻干粉完全溶解后抽出稀释液,再反复3次冲洗疫苗瓶(同时还可以检查疫苗是否失真空)。饮水免疫时可以选择在水面以下打开疫苗瓶反复冲洗溶解稀释。 稀释后活疫苗应尽快用完,不应超过2个小时,一般建议在30分钟内用完,避免稀释后时间过长或温度过高,造成疫苗效价的下降。(尤其传支活疫苗值得注意)
稀释后未用完的活疫苗应进行无害化处理(焚烧和灭菌),不能重新冷冻使用。
油乳剂灭活疫苗使用前应进行预温,使整瓶疫苗温度均匀在25-30℃,以减少因粘稠度大和过低的温度造成注射费力、不易吸收、鸡群应激大免疫效果不理想的现象。常用方法有三种。一是提前8小时放置在20℃以上室内;二是将疫苗瓶浸入35-40℃温水中1小时以上;三是使用恒温箱或恒温水浴锅、足浴盆,温度设定35℃。预温过程中及使用前一定轻轻上下晃动30秒,使温度和疫苗均匀分布。预温不能使用过高温度和日光照射的办法,过高温度和日光照射后会使佐剂理化性质发生变化,碳链降解,抗原蛋白降解或变性,导致副反应大、免疫效果下降或失效。 未使用完的灭活疫苗应立即销毁(焚烧或深埋)。在确认无污染情况下,也可以封闭针孔冷藏保存24小时内使用。
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