如何做好禽病的早期防疫监测~~~！？？

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禽病检测专题

一、禽病抗体快速检测：

1 禽病防疫为什么要进行抗体监测

   细菌、病毒、寄生虫等异源性蛋白质分子能刺激畜禽机体产生毒性反应而导致疾病。但是，机体为了清除它们，能产生一种能够与这些微生物（或失去活性的蛋白质）反应的免疫球蛋白（Ig）称为抗体。这种抗体主要存在于家禽体液中，所以又称为体液免疫。抗体能使动物在有外来野毒和细菌侵袭时，不发生疾病。这就是人们所说的抗感染性。每一种抗体对导致它产生的细菌或病毒具有特异性。因此，一种或多种蛋白质分子能形成一种或多种抗体，多种抗体分子有共同协同作用，共同清除异己抗原物质。

人们利用抗体产生的原理，在家禽体内人工接种疫苗后，使其产生抗体物质，预防疾病的发生，保护家禽，这就叫人工免疫。家禽在人工接种或自然感染病原微生物后，产生抗体的时间决定于病原微生物的种类、数量和毒力及机体的状况（有无应激）。有些需要几小时，有些则需要几天。

免疫持续的时间是由抗体的水平来决定的。抗体对保护机体免受同种病原微生物再次侵袭有很大的价值。有些免疫力可持续很长时间，有些可以终身存在，有些仅持续数周或数月。在正常的过程中，抗体产生达到高峰然后逐渐减少，最后可降为零。足够免疫力的持续期，是该种抗体数量的函数，不同的疾病有不同的差异。

家禽体内存在的抗体是可以在实验室用各种监测方法测定的，能测定出免疫效果和母源抗体的高低及家禽是否被野毒感染。如鸡新城疫微量红细胞凝集抑制试验（HI）、鸡传染性法氏囊病（IBD）免疫扩散试验等。都是用家禽的血清来测定抗体的滴度是否达到或超过免疫的范围，以掌握疫苗免疫对鸡群的保护力。这些测定涉及到滴度的算，滴度越高，表示抗体量越多。滴度能决定抵抗力，在某些疫病爆发或疫苗免疫后，随着时间的延长，抗体水平会缓慢下降，家禽就逐步失去其抵抗病原微生物侵袭的能力。如果抗体下降到很低水平，就会发生感染，家禽仍会发病。人们常把鸡群50%能够抵抗病原侵袭的抗体水平称为免疫临界线。

例如当鸡体内鸡新城疫HI抗体为4log[sub]2[/sub]时，鸡群有50%抵抗鸡新城疫强毒侵袭的能力。人们就把4log[sub]2[/sub]的HI抗体滴度称为鸡新城疫的免疫临界线。病原微生物二次侵袭的严重程度决定于鸡体内的抗体量。在4log[sub]2[/sub]以上的鸡群保护率达90%-100%；在4log[sub]2[/sub]以下时经过免疫的鸡群保护率为43%；非免疫鸡群为9%。鸡群抽检样品的血凝抑制滴度用几何平均值表示，如平均水平在4log[sub]2[/sub]以上时，表示该鸡群为免疫鸡群。另外，鸡群若有10%以上的鸡出现11log[sub]2[/sub]以上的高血凝抑制滴度时，说明鸡群已受到鸡新城疫强毒的感染。

近年来，我国养鸡业发展较快，但有多种疾病束缚着养鸡业的发展，随着引进国外新品种和集约化养鸡业的发展，疾病需要免疫的种类已达10多种以上，给养殖户带来严重的经济损失。所以，搞好禽病抗体监测意义重大。

 

2 我公司检测技术的优势

血清学检测的对象是从禽类体内采集血液析出血清后,检测血清中抗体的有无和滴度变化。目前传统的血清学诊断方法有琼脂扩散试验（AGID）、血凝抑制试验（HI）和酶联免疫吸附试验(ELISA) 、病毒中和试验（VNT）等，AGID优点是特异性强，其缺点是灵敏性较低；HI用于鉴定疫苗免疫后或病毒感染后抗体水平的高低，敏感性也不高；ELISA 方法敏感性大于AGP及HI。这些经典方法普遍耗费时间长(如琼脂扩散试验需24～48小时；血凝抑制试验需2～3小时；ELISA试验需3～5小时等)，有的需要昂贵的仪器设备和繁琐的操作步骤，只能在实验室完成，不便于适时和快速诊断。

免疫层析方法的核心技术是以条状纤维层析材料为固相，通过毛细管作用使样品溶液在层析条上泳动，并同时使样品中的待测物与层析材料上针对待测物的受体（如抗原或抗体）发生高特异性、高亲和性的免疫反应。胶体金免疫层析分析(GICA)是应用胶体金标记技术，以胶体金作为示踪物，应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。层析过程中，金标记物与事先固相化于层析材料上的抗原或抗体发生特异性的免疫反应而被截留，进一步富集，形成肉眼可见的紫红色条带，从而得到直观的实验结果，达到快速检测的目的。这种方法对所使用的抗原抗体的要求较高，要求具有好的特异性和高纯度。

依据这种原理，已经研制出了很多胶体金免疫层析快速检测试纸条。在人医应用方面，国内外已在激素、传染病病原的抗原和抗体、性病病原、细菌、寄生虫、肿瘤标记物、心血管病标志物、药物以及其他一些蛋白质等方面应用了金标免疫层析试纸条。在兽医应用方面，例如在猪瘟、犬细小病毒病等方面也应用了金标免疫层析试纸条。在鸡疫病诊断和检测方面，我国公开了一种畜禽疫病快速诊断试纸条的制备及应用，但该发明的要点是针对畜禽疫病病原的检测，并未涉及抗体的诊断检测。

本公司利用胶体金免疫层析分析技术研制出多种具有简便、快速、特异性强的禽病抗体检测试纸条，这些发明生物安全性高，不存在病毒逃逸、扩散的潜在危险；检测快速（10分钟）；不需要任何特殊仪器、设备，可用于现场操作；操作简便，只需一步反应，不需由专业人员操作；检测成本低；检测过程对人体无危害，对环境无污染；适合在大规模推广应用。

3 本公司禽病抗体快速检测产品

3.1 禽流感抗体检测卡

禽流感(Avian influenza, AI)是由A型流感病毒(AIV)引起的一种禽类传染病。世界上许多国家都有禽流感发病的报道,其中高致病性禽流感主要是由H5N1 等病毒株引起的,发病率和死亡率很高,是世界动物卫生组织(OIE) 规定的A 类传染病之一。近年来禽流感给我国养禽业造成了极大经济损失，而且给我国公共安全构成了极大的威胁。当前我国采取的是在较长的时间内实行强制性免疫和封锁扑杀相结合的禽流感控制政策。对免疫效果的监测,特别是鸡、鸭等活禽贸易的抗体监测及对哺乳动物和人类感染情况的调查,急需特异、灵敏、简便的高致病性禽流感监测方法。

目前，对禽流感的诊断主要有血清学诊断和病毒学诊断两种。分离禽流感病毒需2-3周；禽流感核酸荧光RT-PCR需要昂贵的实验仪器及熟练的操作技术，不适合于现场适时诊断的要求。用检测抗体来诊断禽流感的方法目前主要有琼脂扩散试验、血凝抑制试验和ELISA法，但这些方法亦需要专业人员和专门设备，耗时长，成本高，不便于在基层推广应用。

本公司的鸡禽流感病毒抗体的胶体金免疫层析检测卡，可以直接从鸡血清、鸡卵黄液、鸡肉组织浸液中查出特异性的禽流感病毒抗体，整个反应15分钟内完成，各个亚型的病毒抗体均能测出，与新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊炎等呼吸道病毒及其他无关病毒的抗体无任何交叉反应，敏感性与血凝抑制试验结果相当，检测结果可用肉眼直接判断，不需要任何仪器设备，也不需要熟练的操作技术，具有很高的实际应用价值，是目前禽流感快速诊断最有效的方法。

3.2禽流感疫苗免疫与病毒野毒感染胶体金鉴别诊断卡

近年来,用灭活疫苗免疫接种已成为我国控制禽流感的一种主要策略,但免疫禽类不能与自然野毒感染的禽类从血清学水平上进行鉴别,并常导致贸易安全性障碍，而在生产实践中为了控制禽流感,更要进行血清学监测。

国内公开了几种检测禽流感病毒抗原或抗体的检测的制备方法，但未涉及胶体金免疫层析技术鉴别诊断禽流感疫苗免疫与病毒野毒感染。本产品利用胶体金免疫层析技术及禽流感病毒非结构蛋白NSl和一种抗鸡IgG Fc单克隆抗体制备了一种鸡禽流感疫苗免疫与病毒野毒感染的胶体金免疫层析快速鉴别诊断试剂盒，该试剂盒能特异灵敏地检测出禽流感病毒野毒感染抗体，而疫苗免疫抗体检测不出，从而实现鸡禽流感病毒野毒感染和疫苗免疫的鉴别诊断。而且本产品检测结果不受禽流感血清型的限制，适于所有禽流感亚型，直接通过肉眼观察判断结果。

本产品的研发是不仅要区分禽流感疫苗免疫和野毒感染, 更重要的是必须鉴别疫苗接种后的家禽是否感染了禽流感。本产品属于免疫应用领域，涉及动物分子生物学、免疫学等相关领域。具体地讲是一种借助胶体金标记显色的免疫层析反应，用于鸡禽流感疫苗免疫与病毒野毒感染的快速鉴别诊断。

表1  本产品与ELISA方法的比较

ELISA方法	本产品
特异性强，灵敏度高	特异性强，灵敏度高
检测时间长（2-4小时）	检测快速（10分钟）
需要酶标仪等设备，不适合现场操作	不需要任何特殊仪器、设备，可用于现场操作
操作烦琐，需要多步反应，需由专业人员操作；	操作简便，只需一步反应，不需由专业人员操作；
检测成本较高	检测成本低
检测过程中需多种试剂，尤其是联苯二胺(TMB)，有害人体，污染环境。	检测过程中只需一种试剂（8% NaCl）,对人体无危害，对环境无污染。
储存于4℃，室温保存期很短。	储存方便，对温度要求不高，在4～8℃下有效保存期可达一年；在室温下可保存六个月。

 

3.3 鸡新城疫抗体检测卡

新城疫(ND)也称亚洲鸡瘟或伪鸡瘟，是由新城疫病毒(NDV)引起的一种禽类急性、高度接触性传染病，常呈败血症。主要特征是呼吸困难、下痢、神经紊乱、粘膜和浆膜出血。该病发病急、致死率高，对养禽业的发展构成严重威胁，因此被国际兽医局定为1类传染病。新城疫病毒在火鸡、鸽、鹤、鹤鹑和数种其它鸟类中能引起100%发病和死亡。

在防制新城疫的措施中，加强综合性防疫措施、严格执行检疫制度和合理的疫苗接种是预防新城疫行之有效的重要手段。新城疫疫苗可分为新城疫活疫苗与新城疫灭活疫苗两大类。中等毒力活疫苗(Ⅰ系)由中等毒力株制成的,主要用于8周龄以上鸡群的加强免疫和新城疫发病后的紧急接种,免疫途径以肌内注射和饮水为主，接种后3~4天产生免疫力,免疫期可持续1年；Ⅱ系苗毒株是一个天然弱毒株,适用于7日龄以上的雏鸡及不同日龄的各品种鸡，可经各种途径如点眼、滴鼻、气雾、饮水和注射接种,接种后7~9天产生抗体,免疫期3个月； Lasota系疫苗是一个天然弱毒株,毒力比Ⅱ系苗的毒株稍强,适用于雏鸡及不同日龄的各种鸡，可采取点眼、滴鼻、气雾、饮水和注射接种,接种后6~7天产生抗体,免疫期4个月；油乳剂灭活疫苗是用Lasota株制出的效力良好的油乳剂灭活疫苗,可用于任何年龄的鸡，可以产生较高水平循环抗体。

但是多年来，虽然有疫苗进行免疫接种，免疫鸡群仍频频发病，致使病情延绵不绝，给我国养禽业生产造成了巨大的经济损失，而新城疫的免疫保护水平受母源抗体水平、疫苗的种类、性质等因素的影响，因此应考虑具体的情况来制定免疫程序。而抗体检测不仅可以考核免疫效果，确定免疫时机，而且还可以随时发现鸡场中的潜在疫情。

国内绝大多数鸡场在进行了新城疫疫苗的免疫后，进行抗体监测的很少，主要是因为没有简便快捷的方法。而本产品采用胶体金标记抗鸡IgG的Fc段单抗作为金标垫，基因工程方法表达的蛋白作为检测线，有着其他方法不可比拟的优点。

表 2  本产品与市场上检测产品的比较

 	本发明的检测方法	其他同类产品
胶体金标记物	金标记抗鸡IgG的Fc段单抗	新城疫病毒
检测线包被物	重组HN蛋白	新城疫病毒
特异性	特异性较好	特异性较差
生产性能	生产容易标准化，批间、批内差异较小	生产不容易标准化，批间、批内差异较大
生物安全性	高　无散毒危险	低　有散毒危险

3.4鸡法氏囊抗体检测卡

鸡传染性法氏囊病（IBD）是由法氏囊病毒（IBDV）引起的一种免疫抑制性、高度接触性传染病。传染性法氏囊病毒侵蚀的靶器官是法氏囊, 一方面IBD造成鸡只死亡，饲料利用率下降，增加淘汰率，影响增重直接的经济损失；另一方面可引起严重的免疫抑制,诱发多种疫苗(如新城疫疫苗、传染性支气管炎疫苗)的免疫应答失败,增加鸡对大肠杆菌、沙门氏菌、球虫等病原菌的易感性,给养禽业带来严重危害和巨大损失。为了能够快速的诊断该病和采取合理有效的防制措施，控制疫情发生，我们必须就鸡传染性法氏囊病的诊断和防制方面进行研究。

传染性法氏囊疫苗有活疫苗和灭活苗两类。活疫苗有三种类型：弱毒苗用于母源抗体水平较低或母源抗体消失后的雏鸡免疫，对法氏囊没有损害，免疫后产生抗体较慢，效价低接种弱毒苗的鸡遇到强IBDV时保护率较低；中等毒力疫苗用于有一定母源抗体的雏鸡，对法氏囊产生轻度可逆性损伤，接种至7d产生较高水平的中和抗体，有良好的免疫原性，不产生免疫抑制，雏鸡经2次中等毒力疫苗免疫后，对于Ⅰ型血清IBDV的攻击接种鸡有较高的保护率；高毒力的疫苗对雏鸡有一定的致病力和免疫抑制限制使用。

常见有些鸡群法氏囊疫苗免疫后,仍然可能发病,分析原因:一是免疫在感染后,鸡群处于法氏囊病潜伏期,结果引起鸡群法氏囊病。二是疫苗被较高的母源抗体中和,引起免疫失败,有较长免疫空白期,受到法氏囊野毒和变异毒株的侵袭,导致鸡群发生法氏囊病。

　  因此，在做鸡传染性法氏囊病的免疫程序时必须对鸡传染性法氏囊血清抗体的监测和检测，现有的方法耗费时间长，有的需要昂贵的仪器设备和繁琐的操作步骤，只能在实验室完成，不便于适时和快速诊断。

本产品选用亲和层析纯化的鸡传染性法氏囊病毒重组血清型特异性抗原蛋白作为检测线，抗鸡IgG Fc片断单克隆抗体作为胶体金标记的抗体，利用间接法来检测被检血清中是否含有鸡传染性法氏囊抗体，克服了现有技术的缺点，适合推广应用。

表3  本发明的试剂盒与已公开的ELISA方法的比较

ELISA方法	本产品
特异性强，灵敏度高	特异性强，灵敏度高
检测时间长（2～4h）	检测快速（10min）
需要酶标仪等设备，不适合现场操作	不需要任何特殊仪器、设备，可用于现场操作
操作烦琐，需要多步反应，需由专业人员操作	操作简便，只需一步反应，不需由专业人员操作
检测成本较高	检测成本低
检测过程中需多种试剂，尤其是联苯二胺(TMB)，有害人体，污染环境。	检测过程中只需一种试剂（8% NaCl）,对人体无危害，对环境无污染。
储存于4℃，室温保存期很短。	储存方便，对温度要求不高，在室温下有效保存期可达一年。

3.5 鸡传染性支气管炎抗体快速检测卡

鸡传染性支气管炎(IB) 是由传染性支气管炎病毒(IBV)引起鸡的一种高度接触性、致死性呼吸道疾病,是严重危害我国乃至世界养鸡业的重要疾病之一，临床上主要呈现呼吸道、生殖道、肾脏病变和腺胃肿大等。IBV 属于冠状病毒属的冠状病毒,具有高度变异性,血清型众多,且各血清型之间的交叉较少,因而临床上很难控制。

该病呈全球性分布，鸡不分年龄、性别和品种均易感，但主要侵害l~4周龄的幼鸡。它可导致鸡的增重和饲料报酬降低，蛋的产量、质量和孵化率下降，死亡率升高等，造成很大的经济损失，阻碍养禽业的发展。

日前, 常用IB 活苗、灭活苗、鸡胚适应毒H120和H52弱毒苗通过饮水、点眼、滴鼻进行疫苗接种。活苗主要用于肉鸡、种鸡和产蛋鸡的首次免疫接种, 油乳剂灭活苗对育成母鸡加强免疫后可预防由IBV感染所引起的产蛋下降, 由于IBV 的血清型众多,因此必须根据当地流行病学选择适合本地区的疫苗或使用联苗, 随着分子生物学技术的不断发展和完善, IBV 基因工程疫苗、转基因疫苗在防治IB 上发挥了巨大的潜力。虽然有疫苗进行免疫接种，但免疫鸡群仍频频发病，给我国养禽业生产造成了巨大的经济损失。

目前实验室的诊断方法多用于检测IBV抗原，但是这些方法耗费时间长，而且由于IBV的血清型众多,各血清型之间存在交叉反应,故难以区别疫苗毒株和流行毒株。因此我们必须对IBV抗体进行检测和监测，来对免疫系统状态进行评价，对鸡是否感染了IB的进行鉴别诊断和监控。国内很多学者先后建立了ELISA 方法检测IB 抗体均取得理想结果,但仅限于实验室检测，而且时间需要3～5小时,在基层推广应用还有一定困难。

本公司的鸡传染性支气管炎抗体免疫胶体金快速检测卡选用亲和层析纯化的鸡传染性支气管炎核衣壳蛋白（NP蛋白）作为检测线，抗鸡IgG Fc片断单克隆抗体作为胶体金标记的抗体，利用间接法来检测被检材料中是否含有鸡传染性支气管炎抗体，安全性高，特异性强，检测快速、方便，适合推广应用。

表4 本发明的试剂盒与已公开的ELISA方法的比较

ELISA方法	本产品
特异性强，灵敏度高	特异性强，灵敏度高
检测时间长（2～4h）	检测快速（10～15min）
需要酶标仪等设备，不适合现场操作	不需要任何特殊仪器、设备，可用于现场操作
操作烦琐，需要多步反应，需由专业人员操作；	操作简便，只需一步反应，不需由专业人员操作；
检测成本较高	检测成本低
检测过程中需多种试剂，尤其是联苯二胺(TMB)，有害人体，污染环境。	检测过程中只需一种试剂（2 Mol/L NaCl 溶液）,对人体无危害，对环境无污染。
储存于4℃，室温保存期很短。	储存方便，对温度要求不高，在4℃下有效保存期可达一年；在室温下可保存六个月。

3.6 鸡毒霉形体抗体快速检测卡

霉形体(Mycoplasma)是是一类缺乏细胞壁、能独立繁殖的最小的单细胞原核微生物，属于原核生物中软壁菌门软皮体纲。鸡毒霉形体通常称为鸡慢性呼吸道疾病，主要引起呼吸道感染（如呼吸罗音、咳嗽、鼻漏）及免疫抑制。MG主要感染鸡和火鸡,易感染与感染了的带菌鸡或火鸡直接接触会引起此病的暴发。此病通常可通过鸡蛋或火鸡蛋垂直传递感染或间接接触水平传播,亦可由空气所带的尘埃或飞沫、污染的器具、饲料、饮水而传播。鸡的自然感染最早见于6日龄鸡,潜伏期一般为6~21天。

多年来鸡毒霉形体一直在各类鸡群中广泛存在，目前国内外虽有一些疫苗在用，但至今仍不能进行有效防控，致使鸡群长期带毒，给养鸡业生产造成了很大的经济损失。发达国家对鸡毒霉形体病十分重视,如美国“全国家禽改进计划”中规定的MG控制方案要求:作为正常的无MG鸡群的子代群,在大于4月龄时必须对全群中至少10%的鸡(不少于300只)进行血液检查,若血清学检查MG为阴性,则证实无MG感染。随后在不超过90天的时间内,对鸡群至少随机抽样150只进行血清学检查,阳性者不留作种用。

根据血清学调查，霉形体病在我国感染率很高，大部分鸡群的感染率超过50%，有的甚至高达70%-90%，而且经常继发其它疾病，尤其是与大肠杆菌或新城疫、传染性支气管炎等病原并发感染，造成鸡群大量死亡。而清除这种疫病的最有效的方法是淘汰带毒鸡群，保留健康不带毒的鸡群，要做到这一点，就要有一种快速简便的检测方法来确定感染鸡群。

而已有的研究中，没有合适的快速检测鸡毒霉形体的新方法。传统的血清平板凝集试验判定结果的时间2~3小时，但其主观性比较强，没有一定的经验很难做出准确的判定。

本产品用亲和层析纯化的鸡毒霉形体重组血凝素蛋白作为检测线，抗鸡IgG Fc片断单克隆抗体作为胶体金标记的抗体，利用间接法来检测被检材料中是否含有鸡毒霉形体抗体，灵敏度高，特异性好，结果容易判定；检测过程中只需一种试剂（蒸馏水）,对人体无危害，对环境无污染，适合推广应用。

表 5 本发明的试剂盒与血清平板凝集试验（SPA）方法的比较

本发明的试剂盒	血清平板凝集试验（SPA）
特异性强，灵敏度高	特异性差，灵敏度低
检测过程仅需一种蒸馏水，生物安全性高	检测过程中需用到，处理过的鸡毒霉形体活毒，如果处理不干净,存在散毒的危险，有一定的生物安全隐患
储存方便，对温度要求不高，在4℃下有效保存期可达一年；在室温下可保存六个月	只能储存在2～8℃，有效期三年

 

二、禽流感检测专题

本公司研制的禽流感检测产品除了禽流感抗体检测卡、禽流感疫苗免疫与野毒感染的鉴别诊断卡外，在禽流感病原的检测方面也研发除了领先于国内的快速检测产品。

1 通用型禽流感病毒胶体金快速检测试纸条

禽流感（AI）是禽流感病毒（AIV）引起的一种禽类传染病。该病毒属正粘病毒科、流感病毒属、A型流感病毒。根据其核蛋白（NP）和基质蛋白（MP）抗原性的不同，可将流感病毒分为A、B和C三个血清型。根据病毒囊膜糖蛋白血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)氨基酸组成及抗原性的不同，可将AIV分为不同亚型，目前已报道的HA有16种亚型，NA有9种亚型。其中，AIV H5亚型为高致病性毒株，不仅可以感染禽类，引起大批死亡，还可以感染人类甚至引起死亡。AIV H9亚型为低致病性毒株，致死率虽然较低，但可引起呼吸道症状、头肿、产蛋率降低等，临床上很难与禽类其它呼吸道疾病区分开，同样给养禽业生产造成了巨大的经济损失。

  目前，禽流感常用的检测方法主要有病毒分离、血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验、酶联免疫吸附实验（ELISA）以及RT－PCR等。但是这些方法都存在耗时、费力、需要特殊的仪器设备和实验技术人员等缺点，不能适应现场快速诊断的要求。而胶体金免疫层析技术具有简单、快速、灵敏、可现场操作等优点，目前已在人医方面得到了广泛应用并逐渐应用于动物疫病的快速检测。本公司在成功研制出禽流感抗体胶体金免疫层析快速检测试纸条的基础上，以抗禽流感病毒核蛋白单克隆抗体为基础，应用胶体金免疫层析技术，研制了禽流感病毒免疫层析快速检测试纸条，为禽流感病毒的快速诊断及流行病学调查提供特异性强、灵敏度高、方便快捷的检测手段。

本产品是利用胶体金为示踪物，采用抗禽流感核蛋白单克隆抗体和鸡抗AIV IgG双抗体夹心法研制而成。经过对阳性样品的比较测定，本产品所测得的滴度比血球凝集滴度要高4倍以上，与已知禽流感病毒H5、H7、H9亚型标准血凝抗原呈强阳性反应，而与阴性对照及禽类其它病毒无交叉反应。攻毒实验结果表明，本产品可在3天后从气管和泄殖腔拭子检出病毒，真正达到了早期检测的目的。从有呼吸道症状的病鸡喉头采集样品，阳性检出率为39.2%，与禽流感病毒ELISA检测试剂盒符合率为100%，并对其中10份阳性样品及30份阴性样品进行了病毒分离鉴定，结果证明无一误检。由此可见，本产品具有特异、敏感、稳定等特点，也粗略说明目前我国患呼吸道疾病鸡群中禽流感感染的普遍性。

本产品快速、准确、灵敏、可凭肉眼在10分种内判定结果，操作简单，一般的检验人员均可在现场使用。而且检测成本低廉，更适合于大批量、大范围的流行病学调查。本产品还可以从肌肉及多种内脏器官中检出禽流感病毒，这说明适用检测样品范围较广，可以用于市场上禽类肉产品等的检测，在食品安全检测方面也重要的应用价值。

2 H9 亚型禽流感病毒胶体金快速检测试纸条

   禽流感被国际兽疫局定为A类传染病。其中，H9亚型禽流感病毒属于低致病力、低致死率的亚型流感病毒,但在禽群中长期存在，引起轻微呼吸道症状，产蛋量下降，给养禽业造成巨大的经济损失。我国自1994年在广东省首次分离到H9N2亚型禽流感病毒以来,全国各地均有禽流感发生的报道。目前，H9亚型禽流感病毒已在家禽中建立稳定的种系,广泛分布在世界各地，研究证实禽流感病毒H9N2能直接感染人，严重威胁居民身体健康、畜牧业生产和畜产品国际贸易。

自1997 年香港禽流感事件以来，世界各国持续大量使用了禽流感疫苗，使高致病性禽流感得到了控制。然而，流行病学调查发现，低致病性禽流感，尤其是H9 亚型低致病性禽流感广泛存在并且愈来严重，在许多国家已呈地方流行态势。另外，由于H9 亚型禽流感病毒感染常引起轻微呼吸道症状，产蛋鸡产蛋量下降等，这些症状都和新城疫、传染性喉气管炎、传染性支气管炎等禽类疾病极为相似，在临床上很难区分。因此，研制和开发一种方便快捷的H9亚型禽流感病毒的检测及鉴别诊断方法具有重要的意义。

本产品是利用胶体金为示踪物，采用禽流感H9 亚型血凝素单抗和鸡抗AIV IgG 双抗体夹心法研制而成。经过对阳性样品的比较测定,本产品所测得的滴度比血球凝集滴度要高4 倍以上，与已知H9 亚型禽流感病毒呈强阳性反应，而与禽流感其它亚型以及禽类其它病毒无交叉反应。对临床采集样品阳性检出率为35%，与禽流感病毒ELISA 试剂盒总符合率为92%，并对其中10份阳性样品进行了病毒分离鉴定，均为H9 亚型禽流感病毒。由此可见，本产品具有特异、敏感、稳定等特点。

现有的EIISA方法还不能对禽流感H9 亚型作鉴别诊断，RT-PCR 方法虽然可以对H9 亚型禽流感病毒准确检测，但是由于其操作复杂，需要特异的引物、昂贵的实验仪器和设备和专业的实验人员而不能适应现场快速检测的要求。与上述这些方法相比，本产品快速，准确，灵敏，可凭肉眼在10 分种内就可判定结果，操作简单，普通的养殖户都可现场自己使用，可应用于大批量，大范围的推广使用。

 


 检测卡附说明书，有兴趣者可电话联系           
                              章先生   15071445166 

鸡晓岚

好资料，又学习了一回。

answer1224

顶个~~~！！！！！！！

chenzx

在那里能购到检测新城疫快速试纸