新城疫实验室诊断

斌哥哥 · 发表于 2008-5-8 19:34:01

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对于该病的实验室诊断，传统的方法是进行病毒分离，然后用血凝和血凝抑制进行鉴定。尽管NDV只有一种血清型，但是不同毒株间的毒力差异很大。加上近年来新城疫弱毒活疫苗的广泛应用，仅从具有临床症状的病禽分离出病毒进行鉴定，还不能对ND作出确诊，因此需要对分离株的致病性进行评估，OIE根据公认的病原毒力与病原分子结构间的关系建立的体外毒力鉴定技术，已经用于世界范围内新城疫病毒的调查。世界动物卫生组织(OIE)对报告ND暴发作丁下述定义：ND是由血清1型禽副黏病毒(APMV-1)引起的禽类感染，该APMV—1在毒力上符合下列两个标准中的一个：

①该病毒在1日龄雏鸡的脑内接种致病指数(1CPl)大于0.7；
②该病毒P1蛋白的N端(即117位残基)为苯丙氨酸(F)，而F2蛋白的C端有多个碱性氨基酸(直接测序或从核苷酸序列推导)。所谓多个碱性氨基酸是指在113位和116位之间至少有3个精氨酸或赖氨酸残基。不能显示上述氨基酸残基的特征结构则需要对分离的病毒作ICPl试验。

根据OIE对NDV的这一定义，目前OIE确诊ND有两种方法：
一是分离鉴定NDV并进行生物学试验，测定分离NDV的MDT、ICPt和IVPI以确定其毒力；
二是采用基于RT-PCR的分子生物学方法，确定病原为NDV并确定其毒力。

因常规的病毒分离鉴定和用生物学试验确定毒力费时、费力、费钱，又要使用动物，已越来越不被人们所接受。在这种情况下，经过几年探索而日趋成熟的分子确诊方法，可以用来取代常规的确诊方法。近年来，随着分子生物学和免疫学技术的快速发展，越来越多的快速诊断方法在新城疫的检测方面得到广泛的应用，如RT-PCR技术、荧光RT-PCR技术、EIASA技术和胶体金标记的诊断技术等。