鸡胚培养灭活疫苗的生产工艺

张桂芝

<FONT size=3>鸡胚培养灭活疫苗的生产工艺
1、 合格鸡胚的准备：鸡胚入孵之前要先进行清洗和熏蒸消毒，然后进行接种病毒前的孵化（前孵），前孵结束后要进行照蛋，挑出无精蛋、弱胚和死胚。不同的疫苗接种部位不同，前孵的日龄也不同。常见的禽流感、新城疫病毒采用尿囊腔接种，接种的是9~11胚龄的鸡胚。
2、 接种病毒：将准备好的剂量的种毒接种到合适的部位（尿囊腔、卵黄囊、羊膜腔、绒毛尿囊膜等）。接种时需要先在蛋壳上消毒、打孔，接种后一般要把接种孔封好。
3、 后孵化：接种好种毒后，鸡胚进入后孵化室进行孵化。孵化24小时后照蛋，剔除死胚和细菌污染胚，继续进行孵化，后孵化3天后即可收集病毒。后孵化的过程就是病毒在鸡胚中大量增殖的过程。
4、 收获病毒：在病毒收获之前，要先将后孵化的鸡胚降温到4℃。比较先进的厂家病毒的接种和收获都已经实现机械化。病毒收获后要进行中间检验，主要目的是确定病毒的滴度。
5、 去除杂质：第4步收集的病毒液不可避免的会带有鸡胚组织碎片、血液等杂质，如果不去除杂质，会造成疫苗注射困难、易引起过敏和免疫应激，这一步一般是采用超滤的方法将杂质过滤掉。然后将病毒液冻存在-15℃，以备下一步使用。
6、 浓缩病毒液：这一步骤并不是所有的厂家都在使用。浓缩的目的是将病毒液的体积缩小，病毒滴度提高，进一步减少杂质的含量，但并不是必需的。浓缩的好处是，病毒液进行灭活时，可以大大减少灭活剂（一般是甲醛）的用量，即使做联苗，也可以达到并轻易超出所需要的病毒浓度。所以一般经过浓缩的苗，引起的应激反应相对较小，抗体效价较高。
7、 乳化配苗：这是技术要求非常高的一步。配制之前，要将优质白油、乳化剂等进行灭菌。按照一定顺序和剂量在乳化罐中加入病毒液、水、白油和乳化剂，进行乳化。
8、 分装：盛放疫苗的塑料瓶、胶塞、铝盖要经过粗洗、精洗、灭菌后才能使用。
9、 成品检验：做好的疫苗2~8℃保存，并要按一定比例进行抽检，并送中检所进行检验，等待批签发。
10、 贴签、装箱、发货：检验合格，批签发下来后，疫苗就可以销售了。
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张智慧

谢谢张老师，我们只会用，还真不知道怎末生产的呢

瑞雪迎春

你是哪儿毕业的怎么懂得疫苗的生产工艺。有机会想和你多交流

张桂芝

俺学的预防兽医啊！多少知道一点

问心无愧

有关浓缩的详细步骤，建议张老师再仔细谈谈，可以让养殖户了解浓缩和不浓缩的大致区别

张桂芝

现在生产上广泛使用的是超滤浓缩方法，实验室中也采用离心浓缩和吸附浓缩等方法。超滤浓缩装置由膜组件、压力泵和管道系统组成，其中滤膜是最为关键的，不同大小的微生物使用的滤膜孔径不同。其原理是在压力的作用下，将病毒液压入滤膜一侧，由于压力的作用，将比较小的水压倒膜的另一侧，而微生物不被滤过去。其原理与做饺子时用纱布包着挤去馅料里的水分差不多，不过这里用的滤膜非常致密，没有足够压力的话，水也是渗不过去的。每次浓缩要使用8到10张的滤膜，据说价格要好几千美元。所以很多厂子没有这一步骤。
能画个图就好了，我说不明白。