峪口禽业录制的血清抗体值测定技术
血凝抑制试验包括HA病毒抗原效价测定和HI血清抗体值测定。本期我们主要介绍HI血清抗体值测定。一、材料与设备
1、仪器设备
配制好的4单位抗原、1%红细胞悬液、生理盐水、96孔V型板、吸头盒、积液槽、定时器、100ml量筒、10-200ul单道移液器及配套吸头、5-50ul八道移液器及配套吸头。
二、HI血清抗体值测定
1)用微量移液器向96孔V型板每个孔加入生理盐水25微升;
2)用微量移液器取被检血清25微升,放入第1孔后倍比稀释至第11孔,弃去25微升,最后一孔不稀释,为红细胞对照;
3)每孔加入4单位抗原25微升至第11孔,第12孔为红细胞对照,不加抗原;
4)置振荡器上振荡30秒,放室温静置20分钟。
5)每孔加入1%红细胞悬浮液25微升,放振荡器上振荡30~60秒,置室温反应30分钟后,记录监测结果。
6)结果判定:
以完全抑制红细胞凝集的血清的最大稀释度为该血清的HI滴度,以2的指数表示:如8*log2
①、抗体有效
鸡群产生的抗体均值在保护值以上,且低于保护值的个体所占比例小于20%,鸡群能够抵御外界病原感染。
②、抗体均匀
免后鸡群个体间抗体值差异小、集中,抗体离散度在4个滴度以内。
例如:存栏4000只的蛋鸡舍监测新城疫(ND)抗体,监测20份样品,抗体值如下。
分析:以上鸡群抗体均值9.2(8*3+9*10+10*7/20),抗体离散度为3个滴度(8、9、10),低于抗体保护值9的个体比例为15%(3/20)。检测结果评定为“优”,能够确保鸡群健康。
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