佐君畜牧 发表于 2009-11-27 13:05:46

谈谈干扰素的应用与注意事项


                                                                                 谈谈干扰素的应用与注意事项
      我接触干扰素产品的时间是在2001年的上半年,当时的这类生物制剂刚刚面世不久,社会上的用量还很少。因为在大学里上学时老师提过这个概念,有点印象,所以当推销人员推荐这个产品时,我就觉得是一种很有意义的产品,只是怕属于炒作,所以没有大量使用。但当我在临床上用于一些病毒性病时,取得的一些成绩却使我认识了这种产品的效果。当时主要用于肾传支的治疗,那时的肾传支发病造成的危害并没有像现在这样严重,所以,我先把干扰素用来使用,经过几次的应用发现其疗效的确不错,在我按照以前的治疗措施的基础上又加上了干扰素,发现加干扰素的鸡群恢复的远比不加的好,所以,便在当地地区推广使用,的确为大家挽救了很多的损失,所以直到现在,仍在继续应用。首先说明我不是在为某些厂家做广告,我是实实在在的说一些问题,相反我还要告诫大家不要随意使用干扰素,还必须正确选择好干扰素的产品才行,如果你选用了低值产品或假货,则不但不会使你的鸡群产生作用,甚至会耽误治疗,造成损失。通过这些年的不断应用我对干扰素及其使用方法有了一定的认识,在这里我向大家介绍一下,以供参考。
      干扰素是一种蛋白质,确切来说是一种粘蛋白,它能干扰病毒、细菌的复制和增值,使得复制后的病毒和细菌发生结构上的变化,从而失去对特定组织和器官的侵袭和伤害能力,干扰素的这种作用是因为干扰素能够透过细胞膜同病毒和细菌的单位膜上的特殊位点直接结合而发挥作用的。干扰素的这种作用为我们控制病毒性病对动物机体的进一步伤害产生了积极的效果。干扰素的使用使我们在抵抗病毒性病方面又增加了一条路子,是很有意义的。但是,我们在使用干扰素时,由于干扰素的质量有问题、使用方法不当、使用时机不好、用量不足或不当等存在很多问题,所以在临床上的效果也表现得良莠不齐,所以在临床上使用中发生很多不好的评论。
      一、 干扰素的使用时机问题。干扰素的使用越早越好!由于干扰素只是干扰病毒和细菌的复制和增值,并不会杀灭病毒,所以在病毒刚侵入机体时使用是最好不过的,进入机体的病毒细菌越少,效果越好,如果在身体里面的病毒已经到达了全身,试想使用干扰素还有意义吗?
      二、 干扰素没有清理身体内病毒细菌的作用,所以当已经进入细胞的病毒并引起相应发热、发炎、出血以及器官的功能性障碍时仍然需要身体自身免疫功能的发挥和相关药物的支持,所以,干扰素的使用必须配合其他药物的使用方能达到理想的效果。有些人过高地渲染干扰素的威力,说能治疗任何病毒病,单独使用即可杀灭病毒,还有些厂家声称可以预防病毒性病,等都是夸大了干扰素的功效。
      三、 干扰素是一种生物制品,具有生物制剂的一些特点,在运输、保存、使用条件等环节都会对其活性发生一定的影响,其效果相应就有一定的区别。所以应该引起注意,在从事这些方面的操作时要密切注意按照规定的保存条件进行保存和运输,以确保干扰素的效果。干扰素切忌反复冻融、剧烈震荡、还要注意避光保存和温度要求。
      四、 干扰素的使用量。当疾病发病刚刚开始或病情很轻时,我的使用量是两倍量,两用两天。当疾病已经发生一段时间,病情较重时,使用三倍量连用两天。当发病严重但发病率还不是很高时,使用三至四倍量连用三天。当然还必须根据干扰素保存的时间长短来增减用量。
         五、 干扰素是一种生物制剂,一般单独使用,不要与其他药物混合使用,干扰素的稀释最好使用生理盐水,以防止因为渗透压的关系而使干扰素活性降低或失效。一般情况下,干扰素的冻干制剂产品好于水剂产品。在使用时应保持先用现配的原则,且在解冻时,应越快越好,解冻后一旦达到26-30度温度立即使用为好,以确保干扰素的生物活性。
         六、 干扰素对于已经产生的抗体并不会发生什么作用,但是,由于干扰素是通过同病毒和细菌的单位膜上的特殊位点直接结合使得复制后的病毒和细菌发生结构上的变化,从而失去对特定组织和器官的侵袭和伤害能力。复制后的病毒还会继续产生抗体,而这种抗体是否能够抵御疫病病毒的侵袭现在还很难确定,所以一般干扰素使用三天内不能进行免疫以防这种现象产生。并且,不能过于依靠干扰素的效果,干扰素使用过后最好对没有进行过有效免疫的疫病进行相应的疫苗接种以使机体产生主动免疫作用,这是很重要的。当然,如果在使用干扰素前已经进行过很好的免疫,且已经产生较高的抗体,则可以考虑不免。
      现在市场上的干扰素产品,名类繁多,国家缺乏明确的关于这类产品的质量核查标准和规定,因此对干扰素缺乏有效的监察、监督机制,所以产品质量相差很大,因此正确选择干扰素产品是我们实际应用中一个最大的问题,希广大兽医工作者和养殖工作者谨慎对待并正确使用

山东小谢 发表于 2009-11-27 13:12:40

楼主讲的很好,不知您对转移因子和植物血凝素的观点是什么样,很想了解一下

风味 发表于 2009-11-27 13:29:45

回 楼主(佐君畜牧) 的帖子

“现在市场上的干扰素产品,名类繁多,国家缺乏明确的关于这类产品的质量核查标准和规定,因此对干扰素缺乏有效的监察、监督机制,所以产品质量相差很大,因此正确选择干扰素产品是我们实际应用中一个最大的问题,希广大兽医工作者和养殖工作者谨慎对待并正确使用”
楼主写的真好,力挺一下。
在论坛里很多同行说用什么什么干扰素,什么什么转移因子,还有什么职务血凝素。。。。从事兽医行业的技术员都应该清楚,这类产品的效果应该不错,可这类生物制品生产所需要的技术含量和一般的兽药相差太大,再加上现在这类作为生物制品的产品,国家的监管力度不够,也给了很多厂家钻空子的机会,拿生物制品做宣传,不能不让人寒心,希望各位同行在以后的使用过程中,实事求是一点。

独一o0o无二 发表于 2009-11-27 13:35:34

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楼主能人!!! :handshake

兽医老王 发表于 2009-11-27 13:58:02

说的很不错很详细,顶一个。学习了。呵呵

爱学习 发表于 2009-11-27 14:05:42

近年来,随着病原菌新毒株、变异株的不断出现,我国动物疾病的防制面临严峻的挑战,目前的预防和治疗措施已经不能经济而有效地控制疫病的发展,尤其是病毒性疾病的危害日益严重,因此迫切需要一种有效的防治措施。
  从1957年Isaacs和Lindenmann发现干扰素以来,干扰素已经显示出了极强的抗病毒、抗肿瘤以及免疫调节活性和应用前景。因而,干扰素的研究越来越受到人们的广泛关注。目前动物干扰素主要停留在基础研究和临床试验阶段,且大多数集中于猪、鸡、等少数动物,但近年来也取得了不小的进步,目前已有商品化的猪、犬、鸡等重组干扰素产品面市。本文就近年来国内动物干扰素的研究进展综述如下。
  一、概况
  干扰素 IFN 是一类具有广泛生物学活性的蛋白质,具有调节机体免疫功能、抗病毒、抗肿瘤等多种作用,是机体防御系统的重要组成部分。IFN的抗病毒活性是通过宿主细胞而间接完成的,并具有严格的种属特异性及选择性。根据其来源和结构,IFN可分为α、β、γ三种类型,近年来,还发现了ω、τ等类型的干扰素。IFN—α主要由单核细胞产生;IFN—β主要由纤维母细胞产生,血管内皮细胞也可产生;IFN—γ由抗原及PHA等有丝分裂原刺激T细胞后产生,此外,NK细胞也可产生。IFN—τ是反刍动物孕体附植时滋养层细胞分泌的特有的妊娠识别信号因子,在妊娠识别中发挥着重要的作用。
  IFN—α、IFN—β尽管结构不同,但有许多相似之处,它们来自同一个祖先基因,结合相同的细胞表面受体,并发挥相似的生物学效应,因而将它们一起划归为Ⅰ型干扰素。其中IFN—α是20个结构相关的分子量约为 18kDa的多肽家族,每个由独立的基因编码;IFN—β是个单基因产物,是分子量20kDa的糖蛋白。IFN—γ属Ⅱ型干扰素,由大约21~24kDa的亚基组成的以同源双体形式存在的糖蛋白。IFN一γ对56℃、pH2和0.1% SDS敏感。
  二、干扰素的生物学活性
  干扰素在1957年被发现时,抗病毒活性被认为是其唯一特性,但随后研究发现干扰素除具有抗病毒增殖作用外,还有一系列其他生物学活性,如抗肿瘤、免疫调节作用等。大量研究表明,干扰素的生物学活性的发挥有赖于其诱导的多种效应蛋白质的合成。干扰素并不直接作为反式作用因子对其效应分子的基因组进行调控,而是通过受体介导的信号转导系统引发一系列特定的生化反应,最终达到效应分子的表达目的。此外,干扰素活性很高,并且其活性呈明显的多样性。现将其主要活性分述如下。
(一)Ⅰ干扰素的主要生物学活性
  抑制病毒复制,主要是通过诱导细胞合成多种酶 2’—5’寡聚腺苷酸合成酶等 和旁分泌作用。
  抑制细胞的增殖 如肿瘤细胞等)。
  加强NK细胞杀伤病毒感染细胞的能力(NK细胞具有干扰素受体 。
  改变 MHC分子的表达,增强MHCⅠ类分子的表达而抑制MHCⅡ类分子的表达。

(二)Ⅰ型干扰素的主要生物学活性
  IFN—γ抗病毒活性较Ⅰ型低,但它的免疫调节和抗细胞增殖的作用较强,所以又称免疫干扰素,它是一种强的巨噬细胞、NK细胞、血管内皮细胞活化剂,能激活巨噬细胞并促进其活性;能直接作用于T和B淋巴细胞,促进分化;能增强MHCⅠ类分子和MHCⅡ类分子的表达。
三、禽类干扰素的研究进展
  当前家禽肿瘤和病毒感染引起的鸡马立克病、新城疫、传染性法氏囊病、传染性支气管炎、传染性喉气管炎、脑脊髓炎、流感等给养禽业带来了每年数十亿元的经济损失,是当前养禽业发展的大敌。如何有效治疗家禽肿瘤和病毒感染性疾病一直是困扰禽病防治的重大难题之一。干扰素为这些疾病的防治提供了新的手段。
  在鸡干扰素的研究方面,近年来,夏春、程坚、吕英姿等人采用PCR技术先后成功报道了丝羽乌骨鸡IFN、惠阳胡须鸡IFN—α、鸡γ—干扰素、石岐杂鸡α、γ—干扰素,鸭Ⅰ、Ⅱ干扰素等基因的克隆和序列分析,克隆得到的鸡IFN—α、γ基因的开放阅读框架 ORF 分别由约579和492个核苷酸组成;同时对禽类IFN基因的同源性进行了分析,确定了一些新的亚型;序列比对发现,不同品种鸡的同类IFN核苷酸同源性在90%以上,与相应的鸭IFN同源性在70%左右,提示同种不同品系禽类之间 IFN基因序列变异不大。
  对鸡α、γ—干扰素基因成功地进行了体外重组表达、纯化和活性测定,这些研究为我国禽类的基因文库构建和品种进化分析,以及基因工程干扰素的批量生产奠定了基础。
  张桂红等利用鸡白细胞、脾细胞、鸡胚成纤维细胞以有机锗 Ce—132 、新城疫弱毒株NDV—F 、植物血凝素 PHA 、聚肌胞 PolyI:C 为诱生剂,对外源性IFN诱生条件如诱生剂量、诱生时间及培养条件进行了比较分析和探讨,结果发现诱生能力差异极显著 P<0.01 ,且以Ce—132诱生IFN的能力为最强,其他依次为 NDV—F、PolyI:C、PHA;且鸡脾细胞和鸡白细胞产生的IFN效价高于鸡胚成纤维细胞;并且最佳诱生剂量依次为:Ce—132为70微克 辽 患Γ龋模?span>—F为128HAU/毫升;PolyI:C为 50微克/毫升;PHA为40微克/毫升,这为干扰素的生产提供了参考资料。
  用兽用干扰素诱生剂 由黄芪、党参、灵芝等中药精制而成 进行了抗病毒效果的试验研究,结果表明对传染性喉气管炎病毒 ILTV 、传染性法氏囊病毒 1BDV 等的临床防治效果显著。
  对于目前市场上的鸡基因工程干扰素的临床应用情况进行了调查和研究,表明鸡干扰素在治疗ND、AE、ILT、IBD等疾病时疗效显著,并可广泛应用于其他病毒性和肿瘤性疾病,应用前景良好。他同时指出,科学的生产和应用有待深入研究。
  目前在国外, Schltz等曾使用鸭重组Ⅰ型干扰素抗新城疫、禽流感和水泡性口炎病毒,取得了良好效果;尤其IFN对鸭乙型肝炎病毒感染有十分显著的治疗效果,15天内IFN可抑制鸭乙型肝炎病毒在肝细胞中繁殖。
四、猪干扰素的研究进展
  猪干扰素是研究最早的动物干扰素之一,20世纪80年代就有猪干扰素的相关报道。近年来,对猪干扰素的诱导条件和理化活性有了进一步的研究,同时对猪白细胞干扰素进行了大量的临床试验。研究表明,它对猪的许多病毒性传染病如流行性腹泻、猪瘟、传染性胃肠炎等,以及对牛病毒性腹泻、小鹅瘟,羔羊腹泻等都具有不错的疗效,试验证实猪干扰素与牛羊等动物之间存在交叉活性。最近几年,猪干扰素α、β、γ基因的分子克隆与序列分析获得成功,谢海燕等采用PCR技术克隆得到的IFN—α基因由501个核苷酸组成,共编码166个氨基酸;夏春等克隆得到的猪β干扰素 IFN—β 基因片段长668个核苷酸,编码186个氨基酸。曹瑞兵等从经ConA诱导培养的猪外周血白细胞中扩增出猪IFN—γ基因,经改造后插入原核表达载体pRLG,并实现了在大肠杆菌中的高效表达,表达产物以包涵体形式存在,经变性、复性、脱盐、凝胶层析纯化处理,重组猪IFN—γ具有较高的干扰素活性。同时,万建青、陈涛等分别成功地在毕赤酵母表达系和大肠杆菌表达系统中表达出重组干扰素基因,表达产物占菌体总蛋白的比率在20%~35%之间,表达产物的具有抗病毒活性,为基因工程干扰素的规模化生产和应用提供了可能。
五、中草药干扰素诱生剂方面
  由于中草药诱生干扰素具有广谱、高效、无毒性、作用时间长、价格便宜、易操作等特点,因此,诱生干扰素中草药对防治畜禽疾病有着独特的优势和广阔的前景。中药抗病毒合剂 由黄芪、板蓝根、大青叶、连翘、佩兰、射干、柴胡、地榆、槐花等10余种药材组成 ,甘草甜素、小柴胡汤、人参汤、八味地黄丸、十全大补汤、知柏地黄丸、桃红四物汤、大黄、牡丹皮汤、玉屏风散、银耳多糖、茯苓多糖、刺五加多糖、人参多糖等在人医上广泛使用的抗病毒药物,均可以作为诱生剂诱生干扰素。这些中草药可以作为添加剂增强动物体内干扰素的表达,从而提升动物对疾病的抵抗能力。
六、前景与展望
  总的来说,目前干扰素在基础理论和实践应用上仍需要进行大量的研究,但相信随着干扰素进入分子生态学研究阶段,动物干扰素的分子结构、理化特性、生物学特性、产生和作用机理不断得到阐明,各种动物干扰素基因得到克隆和表达,基因工程产品的问世,将给目前严重危害畜牧业生产的疾病,特别是病毒性和肿瘤性疾病的防治带来新的希望。此外,由于γ干扰素具有较强的免疫调节功能,可以开发用于体质弱、免疫功能低下的病畜。目前应用干扰素诱生剂和人工干扰素产品治疗病毒性疾病取得了一定进展,今后一段时间内要加快基因工程干扰素产品的商品化研制 制剂类型、途径、剂量、毒副作用等 。相对而言,由中草药等诱生剂诱导产生IFN,因纯化工艺复杂,产量少、作用缓和等诸多因素影响而极大限制了在临床和科研上的应用。如在规模化生产中推广使用干扰素,必须建立高效生产干扰素体系,利用基因工程技术生产重组干扰素是一条有效的途径。目前,基于延长干扰素在体内的代谢半衰期的长效干扰素研究已经获得了初步成功,干扰素的聚乙二醇化 Pegylated Interferon 和干扰素与载体脂质体 Liposome—IFN 的结合被认为是两种很好的延长干扰素在体内的半衰期、增加其稳定性、降低免疫源性的有效手段,这扩大了干扰素的应用范围,同时减少了刺激和毒副反应的发生。

sdmykyb 发表于 2009-11-27 14:49:48

邓县兽医师 发表于 2009-11-27 15:00:25

搂住说的真是专业,很值得学习,但目前哪几个公司的质量有保证,希望给以指导!

方云霞 发表于 2009-11-27 15:02:13

回 楼主(佐君畜牧) 的帖子

写得太好了很详细详细介绍了注意事项!

方云霞 发表于 2009-11-27 15:03:05

回 楼主(佐君畜牧) 的帖子

大哥哥说的太好了又看一遍@!

太阳系 发表于 2009-11-27 15:19:13

回 6楼(sdmykyb) 的帖子

你有依据吗?

kefengqinye 发表于 2009-11-27 15:21:36

谢谢楼主说的使用方法一般都没注意到。收藏了,也谢谢5楼。

sdmykyb 发表于 2009-11-27 15:23:48

bian123 发表于 2009-11-27 15:56:58

现在市场上的干扰素产品,名类繁多,国家缺乏明确的关于这类产品的质量核查标准和规定,

炒作概念偏大,假货居多。

佐君畜牧 发表于 2009-11-27 15:58:11

Re:回 10楼(太阳系) 的帖子

引用第12楼sdmykyb于2009-11-27 15:23发表的 回 10楼(太阳系) 的帖子 :
请问现在你见过干扰素有过批号吗?

现在唯一有批准文号的是四川世红的白细胞干扰素,听说大连三仪的干扰素也正在审批中,是否已有批号,尚未得知。
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