花花0415 发表于 2009-11-18 10:56:18

【求助】急!黏膜免疫如何取组织粘液检测IgA?

我最近要做黏膜免疫的实验,在鸡体进行滴鼻免疫,使用的是DNA疫苗以及用生物材料包裹DNA所制备的纳米粒进行免疫

回头的检测指标要检测IgA抗体,我有IgA的ELISA试剂盒

但是因为我不是学免疫学的,对这个方面了解欠缺,所以不知道如何取鸡体内的组织粘液进行检测

迫切希望广大友人多加指点,除了血清,我还可以取什么的组织液啊??????要怎么获取这些组织液???

花花0415 发表于 2009-11-18 11:04:31

没有人知道大概的么??欲哭无泪啊~~~~
为了这个试验设计,已经绞尽脑汁,焦头烂额好久了……
拜托大家~~~~

fei2176 发表于 2009-11-18 14:11:34

取实质器官研磨后取其上清液

花花0415 发表于 2009-11-18 16:16:03

回 2楼(fei2176) 的帖子

意思就是比如我想要肠粘液,就是取小肠,进行研磨,离心要上清呗?

花花0415 发表于 2009-11-18 17:02:27

回 2楼(fei2176) 的帖子

我后来又想了一下,这把组织研磨了,得到的是组织块啊,我只想要外边的粘液,莫非剪一段小肠然后浸泡在PBS中?

问心无愧 发表于 2009-11-18 19:47:03

首先,使用的ELISA试剂盒必须是进口的,价格昂贵,中国目前没有这个。
第二,检测IgA属于专家教授的科学研究才做,单凭一个一般水平的实验室根本做不到。
第三,即便是搞研究的中国著名专家也是常常检测失败。
第四,如果你非要做,那就只能刮去肠道和呼吸道的粘膜。才能检测IgA.
第五,检测IgA对于评价家禽的抗体没有意义。IgA在抗体中起到多大作用,目前没有确定。

所以,劝你放弃,没有意义。

兵王一代 发表于 2009-11-19 18:42:41

引用第5楼问心无愧于2009-11-18 19:47发表的:
首先,使用的ELISA试剂盒必须是进口的,价格昂贵,中国目前没有这个。
第二,检测IgA属于专家教授的科学研究才做,单凭一个一般水平的实验室根本做不到。
第三,即便是搞研究的中国著名专家也是常常检测失败。
第四,如果你非要做,那就只能刮去肠道和呼吸道的粘膜。才能检测IgA.
第五,检测IgA对于评价家禽的抗体没有意义。IgA在抗体中起到多大作用,目前没有确定。
.......

大家风范,学习!!!!!!!!

noah 发表于 2010-2-24 15:05:31

个人观点:1 DNA疫苗免疫效果不是很好,它通过在体内转录翻译为蛋白片段来进行免疫,而且蛋白量的多少不好说,进而免疫效果也不好说,更说明一下,此免疫以体液免疫为主。
2 不知道你用的国产还是进口的盒子,你要确定它的检测限,国外会好一些,但是也不定能检出,建议最好用流式细胞仪检测。
3 获得IGA最好给鸡注射一种刺激哈德氏腺和上呼吸道黏膜分泌的药物。然后获取粘液来进行检测。
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