用这个方法看病能好点
药敏试验方法一、药敏片的准备
1、药敏片的制备:取定性滤纸,用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片,取圆纸片每100片为一包,放入烧杯中,用报纸封口,放在高压灭菌锅内121℃灭菌15-20分钟后,放在电热恒温箱中,使完全干燥。
2、药液的制备(用于商品药的试验):按商品药治疗量20倍比例配制药液;如治疗量为100g药兑水200kg,配制药液时就是0.01g药加1ml水。取药品0.01g放入平皿内,加入1ml水,使药品全部溶解,然后放入100片药敏片,使各纸片充分浸透药液,翻动纸片时不能将纸片捣烂,用摄子把药敏片平铺于平皿内,放入培养箱内置37℃烘干,然后放入灭菌的空青霉素瓶内,在瓶上记录药物名称,放在冰箱内冷藏备用,有效期3-6个月。
备注:2项操作全过程应在酒精旁操作。
二、普通营养琼脂培养基的制备
市场上有配制好的普通营养琼脂培养基粉,按说明取用适量的培养基粉,加入蒸馏水,边加热边搅拌,使之溶化,溶化后,用电炉子加热至煮沸,倾注到洗净干燥后的空吊瓶中,放入高压灭菌锅内121度灭菌15—20分钟,取出使用或放入4℃冰箱中备用。琼脂平板的制备:把制备好的营养琼脂(如已凝固的应先熔化)倾注到灭菌的平皿内,厚度约5—6mm,冷却使凝固。
三、细菌培养物的制备
对病死畜禽解剖时,用镊子、手术刀等在酒精火焰上烧烙,切取肝、脾、心脏等器官一小块,使用新鲜创面在培养基上涂满,倒置。
四、药敏纸片的粘贴
将镊子于酒精灯火焰上灭菌后略停,取市购的药敏片贴到培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴,可用镊子轻轻按压几下药敏纸片。每个培养皿所用药敏纸片的数量和分布可根据培养皿的大小确定,一般采用中央贴一片,周围等距离贴5—6片,每种药敏片的名称要记住。
五、恒温培养
将平皿培养基倒置放于37℃温箱中培养12—24小时后,观察效果。
六、结果观察
在涂有细菌的琼脂平板上,抗菌药物在琼脂内向四周扩散,其浓度呈梯度递减,因此在纸片周围一定距离内的细菌生长受到抑制。过夜培养后形成一个抑菌圈,抑菌圈越大,说明该菌对此药敏感性越大,反之越小,若无抑菌圈,则说明该菌对此药具有耐药性。其直径大小与药物浓度、划线细菌浓度有直接关系。
七、判定标准:
药敏实验的结果,应按抑菌圈直径大小作为判定敏感度高低的标准。
药物敏感实验判定标准
抑菌圈直径(毫米) 敏感度
20以上 极敏
15-20 高敏
10-14 中敏
10以下 低敏
0 不敏
药物敏感实验判定标准参考表1,抑菌圈直径在15毫米以上为高敏,10毫米以下为低敏,无抑菌圈为不敏。 药敏知能做参考啊,做过一段时间不准啊,消化道PH药物吸收都会有影响的 :D 不错 有参考总比没参考要好 好东西,大家看 我们也经常做,还可以,为合理、准确用药打下基础。建议大家都试试。 学习一下
还是有用处的 了解一下,现实中用的不多呀,只在实验室有的多
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