张桂芝 发表于 2010-12-24 19:45:35

鸡胚培养灭活疫苗的生产工艺

<FONT size=3>鸡胚培养灭活疫苗的生产工艺
1、 合格鸡胚的准备:鸡胚入孵之前要先进行清洗和熏蒸消毒,然后进行接种病毒前的孵化(前孵),前孵结束后要进行照蛋,挑出无精蛋、弱胚和死胚。不同的疫苗接种部位不同,前孵的日龄也不同。常见的禽流感、新城疫病毒采用尿囊腔接种,接种的是9~11胚龄的鸡胚。
2、 接种病毒:将准备好的剂量的种毒接种到合适的部位(尿囊腔、卵黄囊、羊膜腔、绒毛尿囊膜等)。接种时需要先在蛋壳上消毒、打孔,接种后一般要把接种孔封好。
3、 后孵化:接种好种毒后,鸡胚进入后孵化室进行孵化。孵化24小时后照蛋,剔除死胚和细菌污染胚,继续进行孵化,后孵化3天后即可收集病毒。后孵化的过程就是病毒在鸡胚中大量增殖的过程。
4、 收获病毒:在病毒收获之前,要先将后孵化的鸡胚降温到4℃。比较先进的厂家病毒的接种和收获都已经实现机械化。病毒收获后要进行中间检验,主要目的是确定病毒的滴度。
5、 去除杂质:第4步收集的病毒液不可避免的会带有鸡胚组织碎片、血液等杂质,如果不去除杂质,会造成疫苗注射困难、易引起过敏和免疫应激,这一步一般是采用超滤的方法将杂质过滤掉。然后将病毒液冻存在-15℃,以备下一步使用。
6、 浓缩病毒液:这一步骤并不是所有的厂家都在使用。浓缩的目的是将病毒液的体积缩小,病毒滴度提高,进一步减少杂质的含量,但并不是必需的。浓缩的好处是,病毒液进行灭活时,可以大大减少灭活剂(一般是甲醛)的用量,即使做联苗,也可以达到并轻易超出所需要的病毒浓度。所以一般经过浓缩的苗,引起的应激反应相对较小,抗体效价较高。
7、 乳化配苗:这是技术要求非常高的一步。配制之前,要将优质白油、乳化剂等进行灭菌。按照一定顺序和剂量在乳化罐中加入病毒液、水、白油和乳化剂,进行乳化。
8、 分装:盛放疫苗的塑料瓶、胶塞、铝盖要经过粗洗、精洗、灭菌后才能使用。
9、 成品检验:做好的疫苗2~8℃保存,并要按一定比例进行抽检,并送中检所进行检验,等待批签发。
10、 贴签、装箱、发货:检验合格,批签发下来后,疫苗就可以销售了。
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张智慧 发表于 2010-12-24 20:04:28

谢谢张老师,我们只会用,还真不知道怎末生产的呢

瑞雪迎春 发表于 2010-12-24 20:08:53

你是哪儿毕业的怎么懂得疫苗的生产工艺。有机会想和你多交流

张桂芝 发表于 2010-12-24 20:12:52

回 2楼(瑞雪迎春) 的帖子

俺学的预防兽医啊!多少知道一点

问心无愧 发表于 2010-12-25 15:35:49

有关浓缩的详细步骤,建议张老师再仔细谈谈,可以让养殖户了解浓缩和不浓缩的大致区别

张桂芝 发表于 2010-12-25 19:05:00

回 4楼(问心无愧) 的帖子

现在生产上广泛使用的是超滤浓缩方法,实验室中也采用离心浓缩和吸附浓缩等方法。超滤浓缩装置由膜组件、压力泵和管道系统组成,其中滤膜是最为关键的,不同大小的微生物使用的滤膜孔径不同。其原理是在压力的作用下,将病毒液压入滤膜一侧,由于压力的作用,将比较小的水压倒膜的另一侧,而微生物不被滤过去。其原理与做饺子时用纱布包着挤去馅料里的水分差不多,不过这里用的滤膜非常致密,没有足够压力的话,水也是渗不过去的。每次浓缩要使用8到10张的滤膜,据说价格要好几千美元。所以很多厂子没有这一步骤。
能画个图就好了,我说不明白。
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