普通干扰素复合干扰素与的区别

赵思凯

生产工艺

•复合干扰素

•复合干扰素产品是通过昆虫细胞表达，活性高
•     PCR扩增IFNα基因→构建重组穿梭载体→构建重组转座载体→转昆虫细胞→构建重组病毒→制备种毒→重组病毒的毒价测定→在细胞内的表达IFN→收获培养物→干扰素的提取。
       原核和真核表达系统所表达的IFN结构和活性差异

   原核（大肠杆菌）表达系统，表达所形成的包含体内的IFN，以及用变性液处理过的IFN，没有生物学活性，必须进行复性，即使复性其结构也只能是线性结构，它不能形成天然干扰素那样的空间结构。
       工艺难度

•原核表达的重组菌的构建较为容易，表达时可用发酵罐进行大批量生产，

•昆虫细胞表达系统的重组病毒的构建比较复杂，昆虫细胞非常嫩，只能用静置的小细胞瓶进行贴壁生长，操作人员也有较高要求，否则，细胞受损和死亡严重，因此，要消耗大量的高级技术人力和时间；
       成本差异

•细菌培养基  蛋白胨和酵母抽提物为英国OXOID公司产品，蛋白胨每500克210-250元人民币，酵母抽提物每500克110-130元人民币，折合后细菌培养基为100元/10升
•昆虫细胞培养基  TNM-FH完全培养基每瓶1246元人民币进口胎牛血清6元多-7元多/ml，折合后昆虫细胞培养基为7120元/10升。
产出比差异

•原核表达时在发酵罐进行大批量生产，直接培养增殖，无需传代，不仅省时省事，也没有培养基的额外消耗（其培养基已非常低廉），有就是说，用多少细菌培养基，就可得到多少细菌培养产物。

•而在昆虫细胞进行传代扩增时，不仅要消耗人力，还要消耗掉大量的含血清的培养基，也就是说，共计用掉1000 ml的昆虫培养基，估计能得到400 ml的培养产物。

对IFN-γ 的表达

•用原核（大肠杆菌）表达系统只能表达各种IFNα 不能表达IFN-γ；
•而用真核（昆虫细胞）表达系统不仅可表达出高活性的IFNα ，也可表达生产出高活性的IFN-γ ，并真正配比形成高活性的复合干扰素。

                                                                                                                 天津汉普森技术部