鸡白痢的检疫

少林寺

一、             快速全血平板凝集反应



    1．主要材料：   

    (1)鸡白痢全血凝集反应抗原，由农业部中国兽药监察所购得，或其他来源的合格产    品。抗原为福尔马林灭活的细菌悬液，每毫升含菌100亿。  

    (2)用具：玻璃板、注射针头、带柄不锈金属丝环(环直径约4.5mm)、巴氏滴管。

    2．操作方法  先将抗原瓶充分摇匀，用滴管吸取抗原，垂直滴一滴(约0.05ml)于玻    片上，然后使用注射针头刺破鸡的翅静脉或冠尖，以金属环沾取血液一满环(约0.02ml)混    入抗原内，随即搅拌均匀，并使散开至直径约2cm为度。

    3．结果判断：

    (1)抗原与血清混合后在2min内发生明显颗粒状或块状凝集者为阳性。

    (2)2分钟以内不出现凝集，或出现均匀一致的极微小颗粒，或在边缘处由于临干前    出现絮状者判为阴性反应。

    (3)在上述情况之外而不易判断为阳性或阴性者，判为可疑反应。

    4．注意事项：

    (1)抗原应在2～15℃冷暗处保存，从杀菌之日算起有效期6个月。

    (2)本抗原适用于产卵母鸡及1年以上公鸡，幼龄鸡敏感度较差。

    (3)本试验应在20℃以上室温中进行。

二、血清凝集反应

    1．血清试管凝集反应   

    (1)主要材料   

    鸡血清样品：以20或22号针头刺破鸡翅静脉，使之出血，用一清洁、干燥的灭菌试    管靠近流血处，采集2ml液，斜放凝固以析出血清，分离出血清，置4℃待检。

    抗原：试管凝集反应抗原，必须具有各种代表性的鸡白痢沙门氏菌菌株的抗原成分，对    阳性血清有高度凝集力，对阴性血清无凝集力。固体培养中洗下的抗原需保存于0.25％～    0．50％石炭酸生理盐水中，使用时将抗原稀释成每毫升含菌10亿，并把pH调至8.2～8.5，    稀释的抗原限当天使用。

    (2)操作方法  在试管架上依次摆3支试管，吸取稀释抗原2ml置第1管，吸取各lml

分置第2、3管。先吸取被检血清0.08ml注入第1管，充分混合后再吸取lml移入第2管，充分混合后吸取lml移人第3管，混合后吸出混合液lml舍弃，最后将试管摇振数次，使抗原—血清充分混合，在37℃温箱中孵育20h后观察结果。   

    (3)结果判断  试管1、2、3的血清稀释倍数依次分别为1：25、1：50、1：100，凝集阳性者，抗原显著凝集于管底，上清液透明，阴性者，试管呈均匀混浊；可疑者介于前两者之间。在鸡1：50以上凝集者为阳性。在火鸡1：25以上凝集者为阳性。

    2．血清平板凝集反应

    (1)主要材料  血清采集同试管凝集法；抗原与试管凝集反应者相同，但浓度比试管    法的大50倍，悬浮于含0.5％石炭酸的12％氯化钠溶液中。

    (2)操作方法  用一块玻板以蜡笔按约3cm2画成若干方格，每一方格加被检血清和抗    原各1滴，用牙签充分混合。

(3)结果判定  观察30～60s，凝集者为阳性，不凝集者为阴性。试验应在10℃以上室    温进行。