鸡传染性支气管炎疫苗接种因素影响

共享精神

疫苗接种反应的水平和持续时间取决于许多因素，在疫苗接种过程中需要充分考虑这些因素。仅仅描述一种可以在特定情况下预防感染的特定IBV 疫苗是不够的，因为监管要求通常会受到挑战。

1.压力和疫苗接种

根据 Dantzer 的说法，应激是“对环境刺激的非特异性反应，是对鸟类适应的生理和行为体验提出极端要求的结果”。各种压力都会降低鸟类的免疫系统，这与温度波动、相对湿度高、营养不良、寄生虫感染和疾病状况等多种因素有关。疫苗接种应在条件良好的健康鸡群中进行，以避免应激。

一项研究表明，有证据表明压力和抗体对疫苗接种的反应之间存在负面印象，这是与胸腺相关的疫苗最表面的，是在接种后很长一段时间内计算的，由于皮质酮激素水平持续升高超过稳态负荷，一段时期的慢性应激被发现会显着减少 T 辅助细胞、T 淋巴细胞和 B 淋巴细胞的总数 。然而，幼鸡的长期应激会导致淋巴或免疫器官过早退化，例如胸腺、法氏囊和脾脏。对应激鸟类的身体代谢和免疫系统的综合影响不能耐受疫苗的接受；最终尚不清楚它们是否能适当地提供保护。

2.保护研究方法

保护研究并不是一种简单的应用方法，但在设计此类研究时考虑了几个因素。使用不同的方法进行体内保护研究，使用疫苗接种和挑战组的总体概念来评估疫苗是否可以防止局部菌株的特定挑战。

阿维森等人建立了一种不同的肺部病毒清除测试方法，通过气管进行特定的疫苗接种和攻击。这项研究允许确定超过 50% 的保护分数指数作为保护水平，而 90% 的环具有定期活动 。通过在体外纤毛停滞试验中滴定肺匀浆来评估，疫苗的效价阻止了攻击病毒在肺部的复制。研究使用肺部样本而不是气管来最大限度地降低检测残留效应的风险，因为肺组织支持 IBV 生长至与气管中相似的水平。疫苗接种后第 21 天，针对三组强毒力 IBV 菌株挑战的 IBV 疫苗接种计划刺激了纤毛保护，如图所示图3。


图3传染性支气管炎病毒 (IBV) 疫苗接种计划在疫苗接种后第 21 天针对三种强效 IBV 菌株挑战刺激了纤毛保护。

3.疫苗和免疫程序

在疫苗接种之前，需要根据流行病学研究、强毒病毒的流行情况、零星爆发的数据、准确的诊断、单一或联合IBV疫苗、疫苗效力以及监测家禽卫生系统来修订计划。

免疫通常取决于确定其针对多种病毒变种的有效性的挑战；特定时间有利于病毒、减毒活疫苗或灭活疫苗的繁殖以及监测滴度水平或测定基线。重要信息详细说明了鸟类免疫是保护性的还是挑战。因此，如果存在某些滴度限制或病毒挑战正在现场传播，则不建议评估当前的免疫计划。由于IBV有多种血清型，单一血清型的IBV疫苗不能提供超过50%的保护（纤毛评分≥20），因此根据一些临床研究，它不足以抵御异源攻击。

“多/单价”疫苗的替代类型，至少有两种 IBV 疫苗血清型，或根据农场和邻近地区的高挑战应用新的血清型，通过相同的血清型进行流通。因此，可以通过血清分型测定来鉴定鸡群中出现的 IBV 强毒血清型，并确认特定的疫苗接种计划以预防新的 IB 分离株。

与重组疫苗、灭活疫苗和活疫苗相比，强毒活疫苗更有效，并且能够减少现场挑战病毒的脱落，这些疫苗与现场挑战病毒的同源性不高。大多数疫苗在感染阶段没有活性，禽类在接种疫苗时已被感染。由于急性感染，免疫器官不能充分发挥免疫系统的激活作用，因为鸡不能产生令人满意的抗体滴度水平。


图4、0-30 周血清学图中九个肉种鸡舍的几何平均滴度（IDEXX，美国）。雏鸡在小母鸡阶段接种传染性支气管炎 (IB) 减毒活疫苗，然后接种 IBV 变种疫苗和灭活 IBV 灭活疫苗 20 周。在 9 个鸡舍中，House-1 和 House-4 与其他鸡舍相比，接种后的滴度非常低。GMT滴度仍低于标准，表明接种过程中各种相关因素的接种不当（X轴，周；Y轴，几何平均滴度（GMT））。

4.小组规模和样本数量

样本采集对于病毒感染期间和病毒感染后的诊断和鉴定的确认非常重要。在IBV急性感染中，大多数禽类都有相似的典型临床症状；那么，可以减少样本数量。至少五只鸟足以获得通过分子测定成功检测感染的更高可信度。

血清学方面，感染后检测到的鸟类采集样本较多，特异性较高；然而，应考虑假阳性结果的成本和风险。在免疫禽类的慢性感染中，存在少量病毒，患病率较低，但需要更多的禽类来检测感染。在农场中，疫苗接种后应从该组或每个农场鸡群中至少采集 20-25 只禽类样本，否则结果无法提供良好的统计数据分析。

一些研究人员演示了纤毛停滞保护评分系统 (CPSS) 的采样，该系统用于使用五级（分数 0-4）评分系统从每组 10 只鸡收集 10 个气管器官培养物 (TOC) 。欧洲官方出版物的原则报告称，IB 疫苗的效率需要对每组不少于 20 只鸡的 10 个 TOC 使用 CT 的二项式解释，正如许多研究中所使用的那样。鸟类受到保护，因为 10 个环中不少于 9 个呈现出正常的纤毛活动 。

5.疫苗接种/感染时的免疫力

获得性免疫力的水平取决于许多因素，特别是在接种疫苗或接触感染时。疫苗与免疫系统合作产生与鸟类自然感染相同的免疫反应。与自然感染相比，体液免疫反应在刺激某些水平的免疫反应方面具有显着作用。

一些研究人员报告说，疫苗接种是身体因先前接种疫苗或早期感染而产生的免疫发展过程。接种疫苗的鸡感染后，体液反应通常会增加，但根据农场当前的感染暴露情况，体液反应可能会逐渐下降或延迟。因此，与未接种疫苗的鸡相比，接种疫苗的鸡的抗体测试敏感性可能要低得多。

一项研究报告了对接种疫苗和未接种疫苗的鸡进行实验性 IBV 感染，结果表明，与未接种疫苗的鸡相比，接种疫苗的鸡受到同源病毒攻击的时间短得多，数量也少得多。

感染 4 周或疫苗接种后 6 周后，可以通过血清学检测来鉴定不同水平的体液反应。中和抗体（抗IBV IgA）反应似乎会随着攻击而发生，并且随着疫苗接种和攻击之间时间的推移而变得更加增强。例如，疫苗需要一定的时间来产生机体免疫力，随后仔细研究初次免疫和后续加强免疫的最佳时期，以期在禽类中产生最佳的免疫反应。

免疫者要么过早或过晚进行二次疫苗接种，否则可能无法充分加强免疫刺激，导致免疫保护效果不佳。为了延长建立的免疫力，初次免疫后间隔2至4周进行二次免疫；那么，可能需要额外的灭活疫苗来形成完整的免疫保护，如图5所示。

此外，每年需要进行加强注射，以确保免疫系统仍然正常运转并增强免疫力。虽然早期接种 IBV 对循环母体抗体有负面影响，直到 4 周，但局部抗体可以补贴呼吸道上皮细胞免受同源 IBV 攻击的局部保护。因此，初次疫苗接种（活疫苗和灭活疫苗）可以克服免疫差距，因为它们需要在母源抗体（MDA）下降期间而不是在后期疫苗接种中保持平衡以产生主动免疫（图5B）。


图5 ( A ) 初级和次级免疫反应的活动与鸡疫苗接种相关，通过在主动免疫下降期间每年重复加强免疫反应，在蛋鸡的整个周期中维持最大水平的免疫反应； ( B ) 评估被动免疫下降与主动或获得性免疫开始之间的免疫间隙或无保护期，导致鸟类不受保护和受到挑战，因为主动免疫在免疫间隙中得到保护

6.年龄和母源抗体

母体抗体可以为孵化中的雏鸡提供被动免疫，并暂时保护幼雏免疫系统免受病原体的侵害。年龄和母源抗体 (MDA) 是病毒攻击或疫苗接种期间检测抗体的两个重要原因。然而，幼鸡体内高水平的MDA会影响活疫苗病毒的增殖和发育，降低血清学滴度。研究表明，由于疫苗抗体，只有 DNA 疫苗（卵内或肌内注射）才能为日龄雏鸡 (DOC) 提供完全保护，但它们不能中和 MDA。被动免疫的持续时间相对较短，MDA水平在3-4日龄后显着升高，直至2-3周龄时看不见水平。鸟类在 2-3 周龄时更容易受到感染，而 MDA 保护作用下降，并且鸟类的免疫系统尚未完全发育以应对早期挑战。

免疫反应的程度取决于年龄或 MDA 变异，因为如果感染发生在年轻时，体液免疫反应会逐渐减弱。雏鸡在对抗原过程做出反应后产生自身抗体的能力是从孵化到 5-6 周龄。在 14 日龄时接种 S1、S2 和 N 蛋白的无特定病原体 (SPF) 鸡的抗体滴度明显高于 1 日龄或 7 日龄时接种的鸡。在此期间，DOC 肉鸡接种 MDA 疫苗后未检测到免疫球蛋白 (IgM)，而在 14 日龄接种疫苗后可观察到 IgM。

一些研究人员在当地受到良好保护的 DOC 孵化场对 SPF 雏鸡应用 IBV 减毒活疫苗，目前大多数肉鸡养殖场都采用这种疫苗。此外，一些疫苗接种研究报告称，在 2 周龄后对肉鸡进行测试 ，甚至 5 周龄后进行疫苗接种。不同年龄之间的结果比较太困难；尽管如此，肉鸡的反复免疫（一种或两种不同的变体）现在是 DOC 的常见做法，然后在 2 周龄时加强免疫。这些研究的结果表明，评估值对于变异 IBV 挑战更具生产力和保护性。

7.遗传基因

鸡育种系是疫苗接种遗传抗性的一个重要因素，因为感染IBV和大肠杆菌的近交系鸡系之间的变异可能在遗传上暴露并受到显着影响。库克等人。报道，在高抗和高感鸡系实验中，使用VNT和ELISA检测IB感染后血清抗体滴度没有显着变化。然而，另一项研究表明，使用近交系鸡仅挑战 IBV，这表明携带 MHC B2 单倍型的近交系比 15I 系（MHC B15 型）禽类更容易受到 IBV 影响 [99 ]。乔伊纳等人。应用相同的近交鸡品系表明，B2/B15 品系中 IBV 攻击的临床症状的发生率明显低于 B2/21 品系。MHC B15 单倍型被证明与 IBV 感染抵抗力密切相关。然而，尚未进行其他研究来检验当前的商业或 SPF 鸡品种。

8.疫苗剂量

通常根据推荐的制造商标签和说明来监测疫苗剂量，以便为每只鸡提供正确的剂量。在良好的免疫计划中，疫苗剂量是让每只鸡正确获得针对 IBV 挑战的保护的关键因素 。建立了有限的方法来确定含胚蛋保护研究中使用的疫苗效价，计算为 50% 鸡蛋感染剂量 (EID50)。然而，气管器官培养物（TOC）用于观察含胚卵中分离IBV的敏感性并提供可重复的测试结果。

此外，滴度根据 EID50 或中位纤毛抑制剂量的表达而显着变化。另外，在许多实验中应用的实际疫苗剂量的不同研究中观察到很大的差异。另一项研究表明，疫苗剂量通常约为 log10 3.0 EID50/只，但很难计算每只雏鸡实际接受的剂量 。特别注意的是疫苗混悬液的早期配制；校准滴管的使用和使用方向对每只雏鸡实际接种的疫苗剂量有很大影响。经确定，IB Mass 菌株的喷雾（孵化场或农场）和滴眼剂疫苗的剂量遵循制造商推荐的剂量（1×），随后 99%–100% 的禽类对疫苗病毒呈阳性。疫苗接种后 7-10 天，除了在孵化场喷雾柜中测试的 ArkDPI 疫苗株剂量高出 100 倍，这在经济上是不可接受的。此外，对于IB病毒，更优选喷雾疫苗，特别是在早期接种疫苗时，通过粘附在鸟眼和上呼吸道的粘膜细胞上来进行局部保护。

9.疫苗接种时间表

由于某些接种鸡场中流行病毒的发生率，IBV 疫苗接种的时机受到高度关注。肉鸡由于寿命短，需针对 IBV 免疫 1 或 2次 。目前，来自孵化场的 DOC 肉鸡在运往农场之前会大规模接种 1-3 种血清型 IBV 减毒活疫苗，以实现局部保护[ 106 ]。在一些肉鸡养殖场，由于肉鸡寿命较短（≤35-45 天），IBV 仅首选单次疫苗接种。

对于寿命较长的肉鸡（≥49 天），需要在 14 至 18 天之间频繁施用加强剂，以增强免疫力持续时间。对于 IBV 变种，可在第 1 天对雏鸡和第 7 天对老鸡通过喷雾、鼻内或眼部或通过饮用水施用疫苗（3.6 log10 EID50/剂量）。

对于蛋种鸡和产蛋鸡群，更长的周期需要从 DOC 开始接种减毒活疫苗和灭活疫苗，然后在小母鸡龄 18-20 周内进行免疫寿命延长。

根据疫苗计划，禽类在孵化场第一天接种的 IBV 减毒活疫苗将持续到农场的 2-3 周龄，然后是 4 周龄和 6 周龄。该疫苗接种计划在鸡群基地中得到了适当的标准化，以密切监测已接种鸡场的血清学状况。一旦禽类开始产蛋，大多数灭活 IBV 疫苗都会接种更长的免疫持续时间，直到开始产蛋。如果农场地区出现任何病毒感染，一些农民偶尔会在产蛋阶段每 6 周注射一次减毒活加强疫苗。通常，灭活 IBV 疫苗与其他灭活疫苗（例如新城疫病毒 (NDV)、Reo 病毒和 IBD 疫苗）联合使用，以增强层间变异性并减少肌肉注射期间的应激。

10.血清型之间的交叉反应

全球记录了不同类型的血清型或 IBV 基因型，但不同血清型的病毒并未完全交叉保护。尽管如此，新的、更具传染性的变体已经出现，但刺突蛋白（S1）和基因组的氨基酸序列没有改变。交叉反应在鸡中尤其受到保护，因为包含一种以上血清型的多种疫苗接种之间存在相互作用。

鸡群受到与选择疫苗血清型不同的新血清型的挑战，因此它们不能完全免受流行血清型的影响。在血清学分析的基础上，血清型特异性测试中的异源交叉反应可以与同源反应区分开来。周期性地，老年禽类的血清学交叉反应性较高，具体取决于禽类之前是否曾感染过感染或多次使用不同血清型进行免疫接种。很少有异源疫苗可以在感染挑战期间降低生产力并减少现场病毒的脱落，从而引发周围环境中病毒的大量繁殖并导致对疫苗的免疫反应较差。因此，在这种情况下，血清学数据可能很难分析，从而影响诊断质量。如果特定的 IB 血清型包含在测试的 IBV 组中，则可以识别该血清型；否则，最大交叉反应应该被低估。

未完待续......

来源：鸡保姆，作者：Md. Safiul Alam