鸡传染性肿瘤病的诊断

rencai

          在鸡群常见的肿瘤性疾病中有马立克氏病（Marek's disease,MD），淋巴细胞白血（Lymphocyte Leukosis,LL）和网状内皮细胞增殖症（Reticuloendotheliosis,RE）。由于这3种肿瘤病在临床症状及病理变化上很相似，仅靠肉眼观察和光学显微镜下观察很难将这3种病准确快速地鉴别开来，特别是诊断者临床诊断经验不够丰富时常常给疾病的诊断及防治工作带来困难。因此,如何诊断和防制肿瘤性疾病就显得极为重要。北京市一父母代艾维茵肉种鸡场鸡在160日龄左右死亡情况显著上升，病因不清。为进行准确、快速的鉴别诊断，并为场主以后的饲养、免疫和防治工作提供参考依据，笔者3次到场剖检取病料，然后进行血清学ELISA试验、病理切片HE染色观察及病理学免疫组织化学染色观察。
1  材料与方法 ?

1.1 病料  第1、2次的病料组织样品（肝、脾、肾、心、肠、腺胃、肺等器官）共5头份，血样10头份；第3次的病料组织样品（所取组织同前）9头份，血样18头份。
1.2 试剂  待检抗原（网状内皮细胞增殖症病毒，REV；淋巴细胞白血病病毒，ALV）的阳性血清（一抗），由山东农业大学刘思当教授惠赠；羊抗鼠IgG?HRP(酶标二抗)，购自华美生物工程公司；其他分析纯试剂均购自商业公司。?
1.3 现场进行大体剖检检查并取病料及采血样。?
1.4 血清学ELISA试验。?
1.5 组织切片处理  所有组织均经福尔马林固定10天后进行常规组织处理，石蜡包埋，5μm切片，备用。?
1.6 进行HE染色和免疫组织化学染色，光镜下观察。?

2  结果?

2.1 大体剖检结果 鸡群除陆续出现精神欠佳、冠背色泽浅之外，大部分鸡眼观发育尚好，但每天都能从鸡群中挑出食欲减退、精神欠佳、排稀便、不好动等症状的病鸡。剖检眼观病变：几乎每只鸡均有肝、脾肿大；绝大多数腺胃肿、壁增厚；脾脏高度肿大，最大的同乒乓球大小、质脆，亦有点状弥散性坏死灶；肝高度肿大褪色、被膜紧张、质脆，有弥散性黄白色坏死灶；大部分鸡肾肿大、质脆、褪色（图1、2略）。?
2.2 血清学ELISA试验结果  第1、2次的血样10份中有9份为RE阳性；第3次血样中18份全部为RE阳性（表1略）。
2.3 组织切片H.E.染色镜检观察结果 （1）肝：基本结构消失，肝细胞变性，网状内皮细胞结节状增生，可见有少量的淋巴细胞增生。（2）肾：肾小管管壁增厚，集合管内可见蛋白管型。间质内大量网状内皮细胞增生。（3）脾：正常结构消失，瘀血，淋巴细胞明显减少，以网状内皮细胞增生为主，有炎性细胞浸润。（4）腺胃：基本结构尚存。固有膜内以网状细胞增生为主。（5）肠：肠腺数量急剧减少，固有膜全部被网状细胞填充。肌层与浆膜之间多型淋巴细胞弥散性增生（图3，4，5，7略）。?
2.4  病理切片免疫组织化学染色结果为REV阳性（图6，8略）。


3  讨论与小结 ?

  从剖检病变看难以区别是MD、LL和RE。但第3次剖检时鸡普遍存在腺胃肿大的现象，肝脾病变与腺胃病变同时存在，加上流行病学调查等结果，初步怀疑为RE。从病理组织学观察看，以RE为主，同时混有LL；从血清学检测看，全部为RE阳性。仅凭这些结果仍很难确定是RE，还是RE兼有LL。从免疫组织化学染色结果看为RE阳性。综合这几方面的结果，特别是免疫组织化学染色结果（因免疫组织化学染色结果具有特异性）我们认为：该鸡群患的是RE。因现在MD、RE、LL病毒的变异和鸡群中其他传染性疾病的存在，使这3种肿瘤病的发病时、病史、症状及大体剖检变化非常相似，甚至有时多种肿瘤混合发生。如果没有非常丰富的临床诊断经验很难做出准确的鉴别诊断，这就对基层的兽医工作者提出了很高的要求。据报道，目前在这3种肿瘤病的鉴别诊断上只有何秀苗等进行的PCR法的测定。但因PCR方法需要设计引物及PCR仪等，在基层的兽医工作中不一定能适用。而我们所采用的免疫组织化学染色方法是根据病毒血清中一抗与切片中针对性的抗原发生特异性反应的特点进行的，具有试剂简单、便宜，操作简便、快速、结果准确的特点，较易在基层兽医工作中推广。?

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