中华苦荬菜治疗鸡肾型传染性支气管炎的试验研究

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                          中华苦荬菜治疗鸡肾型传染性支气管炎的试验研究  

摘 要：  用鸡肾型传支病毒(IBV)分离株的鸡胚尿囊液接种16日龄蛋雏鸡，并随机分为对照组、中药治疗组和卵抗治疗组。中药治疗组用中华苦荬菜水煎剂(0.2 g生药/ml)自由饮用治疗，卵抗治疗组用卵黄抗体注射治疗(1 ml/只)。试验结束时，对照组、中药治疗组、卵抗治疗组的死亡率分别为89.5%、71.4%、71.8%，中药治疗组和对照组差异极显著(P ＜0.01)。中药治疗组和卵抗治疗组差异不显著(P ＞0.05)。另试验表明中华苦荬菜对鸡肾型IB有一定治疗效果。? 关键词：中华苦荬菜；肾型传支；卵黄抗体

鸡肾型传染性支气管炎是由IBV肾病变型毒株引起的一种鸡的急性、高度接触性传染病。肾型IB可见于各种鸡，以3～26日龄未成年鸡最常发生。本病传播迅速，1～3 d可波及整个鸡群且防治困难，是养鸡业一大威胁。近年来，关于本病的报道较多，目前我国对鸡肾型IB的防治以油乳剂灭活苗、化药及中药的综合措施为主。由于IBV有较多血清型和变异株，且不同血清型毒株间的抗原性不交叉或不完全交叉，经常发生免疫失败，中药治疗IB虽有效，但多为复方。?中华苦荬菜 (Ixeris chinensis) 广泛分布于中国很多省区，全草入药，是一种民间草药，作为清热解毒药用，在山东、河南、新疆等省区甚至作“败酱”用，故人们对其研究还很少。有报道本品的水煎剂有抑制在体兔心脏以及降低麻醉兔与狗的血压作用；李万波等报道，本品的水煎液对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、绿脓杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、痢疾志贺氏杆菌2型、福氏痢疾杆菌、宋内氏痢疾杆菌有抑制作用。另据台湾中兴大学陈三多教授?报道，中华苦荬菜对肾小球肾炎的治疗效果比较好。因此，笔者等针对鸡肾型IB尚无特异治疗药物，特别是肾型IB死亡率较高的这一情况，通过本试验来研究中华苦荬菜对肾型IB的疗效。?
1            材料与方法
2            1.1  材料?
1.1.1 实验动物  150只1日龄蛋雏鸡由重庆永川一品实业有限公司提供。?
1.1.2 毒种  肾型IBV毒株由四川畜牧兽医学院微生物教研室提供。肾型IBV经鸡胚接种传代后取其尿囊液供试验用。?
1.1.3 试验用药物 中华苦荬菜采自荣昌郊外。抗肾型IB卵黄抗体由四川畜牧兽医学院组织胚胎教研室提供。?
1.1.4饲料 由四川畜牧兽医学院饲料厂提供。?
1.2  方法?
1.2.1  肾型传支模型复制预试1 日龄蛋雏鸡在实验室喂至一周龄时，从鸡群中随机抽取6只，每只肌肉注射肾型IBV毒株经鸡胚传代后提取的尿囊液0.1 ml，并滴鼻一滴。鸡只3 d后开始发病，两周内全部死亡。剖检见输尿管膨大，充满尿酸盐结晶，肾脏肿大明显，呈典型的“花斑肾”病变特征。预试证明用该毒株和攻毒剂量可使雏鸡发病且死亡率达100%。1.2.2 中药制剂水煎剂 将晾干的中华苦荬菜洗净、剪碎、水煎1～2 h，共两次，合并滤液，浓缩成0.2 g/ml的煎剂。注射剂：水煎剂(浓缩成1 g/ml)以5 000 r/min离心20 min，取上清液，高温高压灭菌。?
1.2.3 肾型传支人工感染治疗试验  蛋雏鸡在实验室喂至16日龄，随机抽取100只，肌肉注射肾型IBV毒株经鸡胚传代后的尿囊液0.1 ml/只，并滴鼻一滴。然后随机分为对照组(20只)、中药治疗组(40只)、卵抗治疗组(40只)，分笼饲养。中药治疗组于次日停供饮水，并让其自由饮用中华苦荬菜水煎剂。卵抗治疗组于攻毒4 d后胸部皮下注射1 ml/只的卵黄抗体。对照组不用任何药物，任其自由采食饮水。每天记录各组鸡只的采食量、饮水量、死亡数，对病死鸡立即剖检，记录病变。?
1.2.4 自然发病鸡的治疗试验 大足某鸡场45日龄的土杂鸡患肾型IB，剖检病理变化呈典型肾肿、花斑肾等，发病鸡只的死亡率达70%。从其中抽取发病症状明显的鸡6只，用中华苦荬菜注射液进行治疗实验。较严重的3只鸡每只肌注中华苦荬菜注射液1?5 ml，其余3只每只1 ml，每天1次，连续3 d，并通过口服中药煎剂配合治疗，记录结果。?

2  试验结果?
2.1 对肾型传支人工感染的治疗试验
人工染毒肾型IBV两天后鸡只开始出现饮食减少、精神沉郁、挤堆、打瞌睡等临床症状。7 d后鸡只开始出现死亡，对死亡鸡立即剖检，主要以输尿管膨大，充满尿酸盐结晶，肾脏肿大明显，呈“花斑肾”特征。有的鸡只心包膜、肝脏、肌胃表面也有尿酸盐沉积。各组鸡均从攻毒7 d后开始死亡，至攻毒后16 d试验结束时对照组的死亡率为89.5%，中药治疗组为71.4%，卵抗治疗组为71.8%，详见表1(略)。
2.2         自然发病鸡治疗试验?用中华苦荬菜治疗6只自然发病鸡，结果如表2(略)。
表2   中华苦荬菜治疗自然肾型传支疗效?用药前临床症状  精神沉郁，羽毛蓬松，躲在一角，怕冷挤堆，饮食减少。用药6 d后  精神明显好转，食欲大增，饮水状况良好。剖检特点   输尿管膨大，充满尿酸盐结晶，花斑肾、肾脏肿大明显。 花斑肾不明显，肾脏肿大不明显。
3  讨论与小结?人工感染治疗试验表明：中华苦荬菜对鸡肾型IB有一定效果。从试验结果来看，中药治疗组的死亡率(71.4%)最低，其次为卵抗治疗组死亡率(71.8%)，对照组死亡率(89.5%)最高。中药治疗组死亡率比对照组低18个百分点，两者差异极显著(  P ＜ 0.01)。中药治疗组死亡率略低于卵抗治疗组，两者差异不显著( P ＜ 0.05)。由此可见中华苦荬菜对鸡肾型IB疗效与卵黄抗体相当。在对临床自然发病鸡的治疗试验中，在鸡场未经治疗的病鸡死亡率高达70%，而我们从中〖JP1〗抽取的病鸡用中华苦荬菜治疗后的死亡率仅为16.7%(1/6)，康复鸡肾型IB的临床症状基本消失，捕杀后剖检可见肾型IB的特征病变也基本消失。这也说明中华苦荬菜对鸡肾型IB确有治疗效果。
3.1 在人工攻毒肾型传支模型治疗试验中，中药治疗组和卵黄抗体治疗组死亡率偏高，原因主要在以下方面：(1)病毒毒力和攻毒剂量：本次试验所采用的IBV毒株系采自临床病例的野毒，毒力强；另外，攻毒量也过大。中华苦荬菜对肾型传支治疗尚属首次，笔者有意识加大了攻毒剂量，预试中攻毒的鸡死亡率高达100%也可以说明这一点。(2)外界天气因素变化及实验条件的影响：试验期间气温偏低，再加上实验室保暖措施跟不上，导致鸡只因非试验控制因素死亡。在攻毒后11～13 d期间，由于降雨，气温突然下降，其间的鸡只死亡数明显增多，对照组、中药治疗组、卵抗治疗组的死亡数分别为8、15、11只，分别占各组总死亡数的47%(8/17)、60%(15/25)、39.3%(11/28)，这一组数据表明低气温导致了本次试验鸡的死亡。(3)高饲料蛋白的影响：据黎晓敏?等报道，在肾脏机能不健全的情况下，饲料中蛋白含量过高，会加速尿酸的产生，导致鸡肾脏损害。本次实验所用的饲料为肉鸡饲料(而非蛋鸡饲料)，蛋白含量偏高，所以可能加重肾脏损害程度，造成死亡率偏高。(4)中药制剂方法有待完善：本次实验只是采用粗略制备的水煎剂，制备过程中可能发生较多有效成分的损失。(5)给药途径的影响：本试验通过自由饮用进行口服给药，由于水煎剂口感不好，影响试验鸡的饮药量。鸡只饮水不足，增加了鸡只的死亡数。从人工攻毒肾型传支模型治疗试验中药治疗组死亡率(74.2%)和自然发病鸡治疗试验的死亡率(16.7%)的对比看，由于自然发病鸡治疗试验采用中华苦荬菜注射剂肌肉注射，其治疗效果较好。?
3.2  由于药源的限制，本次试验的规模偏小，特别是临床发病鸡治疗试验只用了6只鸡，其结果说服力不强。还需要进一步深入研究：一方面需要扩大试验规模，另外在药物有效成分方面，本试验只研究了其水溶性成分，还需进一步研究该植物的挥发成分和脂溶性成分对鸡肾型IB效果。此外，其作用机理也有待进一步的研究。［ 作者：张晓瑜，马 跃，李兴霞 ］