【分享】JIA | 河南农业大学家禽研究团队揭示TFPI2在鸡卵巢卵泡中的表达及其在培养

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鸡卵巢在生殖系统是一个独特的、动态的器官，组织发育和重塑的程度迅速而广泛，并周期性地重复，而且卵巢的发育及排卵同样受到卵泡内膜细胞、颗粒细胞（Granulosa Cells，GCs）等相关分泌因子的共同调节。组织因子途径抑制剂-2（Tissue factor path way inhibitor-2，TFPI2）最初是从人胎盘组织中分离出来的30-36 kDa糖蛋白。早期的研究发现它在胎盘、精浆、精囊和卵泡液中大量存在，并且可以影响细胞外基质（Extracellular Matrix）金属蛋白酶（MMPs）使组织的重塑受到影响，这表明TFPI2在动物生殖发育过程中发挥着重要作用，但其在鸡卵巢GCs中的表达调控尚不清楚。

近期，河南农业大学家禽研究团队田亚东教授课题组完成的题为“Expression of tissue factor pathway inhibitor 2 in the follicles of chicken ovaries and its regulatory mechanism in cultured granulosa cells”的研究在Journal of Integrative Agriculture (《农业科学学报》(英文)，JIA)优先上线发表。



该研究以海兰褐商品蛋鸡为试验材料，根据卵巢发育完全期（15 W）和产蛋高峰期（30 W）两个不同生理阶段卵巢组织的RNA-seq数据，发现TFPI2基因在产蛋高峰期阶段表达差异显著，并对TFPI2在性成熟鸡不同发育状态卵泡中的表达模式及其在卵巢颗粒细胞中的调控机制进行了研究，从而解析了TFPI2对于鸡卵泡发育的分子机制。

该研究首先发现TFPI2在鸡卵巢中高表达，并获得了TFPI2全长序列1750bp；包含55bp的5?UTR，975 bp的3?UTR，720 bp的编码区；并成功地制备了TFPI2的兔多克隆抗体，验证了TFPI2基因和蛋白在不同发育状态下卵泡中的表达模式，且主要靶点位于颗粒层；此外，TFPI2分布于卵巢基质、初始卵泡、生长卵泡颗粒层和膜层等位置。采用过表达和干扰的方法验证TFPI2在颗粒细胞中的作用，表明TFPI2可以促进等级前颗粒细胞增殖，抑制颗粒细胞类固醇激素合成，通过Wnt信号通路影响等级前颗粒细胞中MMPs家族基因表达；垂体激素（FSH/LH）可以通过诱导不同的通路（PKA，PKC，PI3K和mTOR等）来调节TFPI2基因的表达，并表现出时效性。综上，该研究为明确TFPI2基因在鸡卵泡发育过程以及排卵的分子调控机制提供了理论和试验依据。



TFPI2基因在鸡卵巢中的表达分布及在卵巢颗粒细胞中的调控示意图河南农业大学田亚东教授和李东华讲师为该文章的通讯作者，李冲为第一作者，该研究得到了河南省高校科技创新团队支持计划(21IRTSTHN022) 和中原科技创新领军人才（214200510003）项目的资助。



河南农业大学家禽研究团队是教育部、农业部科研创新团队，由康相涛教授领衔，团队长期围绕地方鸡种质资源保护和利用开展研究，先后主持承担国家“863”计划、国家自然科学基金、神农种业实验室“一流课题”项目等国家和省部级科研项目；主持培育国审新品种2个，完成的《中国地方鸡种质资源优异性状发掘创新与应用》获国家技术发明奖二等奖、《地方鸡保护利用技术体系创建与应用》获国家科学技术进步奖二等奖，授权国家发明专利48项，制定国家和地方标准10项，发表中英文论文500余篇。


来源：农业科学微平台，作者：李冲 等