防治禽流感复方中药的安全性实验

xxt_xxt2008 · 发表于 2009-10-18 19:47:05

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    近年来随着对中药及其制剂的广泛应用和对其毒性研究的深入，人们发现许多认为是“无毒”的中药具有一定的毒副作用，本复方中药是用于防治禽流感的一种药物，为了对其安全性做出科学评价，为临床用药提供保证，进行了安全性实验研究。  

　　1  材料与方法   

　　1.1  昆明小鼠  昆明小鼠80只，雌雄各半，体重18～22 g，由哈尔滨兽医研究所实验动物中心提供。在人工照明12 h、通风良好情况下饲养观察3天，随机分成8组，10只/组。给药前18 h和给药后4 h内禁食，但不禁水。  

　　1.2 复方中药自行研制的复方中药为黄褐色透明澄清液体，由贯众、板蓝根、黄芪、柴胡、连翘、黄连、金银花、黄芩及甘草9味中草药组成。  

　　1.3 试验环境室温18～25℃，相对湿度60%，室内无对流风。  

　　1.4 半数致死量（LD50）的测定采用简化机率单位计算法计算LD50。采取口服和腹腔注射两种给药途径。口服剂量为1 600 mg/kg体重，每只0.5 ml，口服组组间剂量比为1∶0.8，试验共分7组，其中1组为对照组，10只/组；腹腔注射组注射剂量为1000 mg/kg体重，每只0.5 ml，组间剂量比为1∶0.75，试验共为6组，其中1组为对照组，10只/组。腹腔注射后，及时剖检死亡动物并取心、肝、脾、肾、肺及肠做病理切片，观察其病理变化。  

　　1.5  最大耐受量的测定试验共分5组，口服给药剂量分别为5 000 mg/kg体重、4 000 mg/kg体重、3 200 mg/kg体重、2 600 mg/kg体重，每只1 ml，3次/天，观察10天内昆明小鼠的最大耐受量。最后一组为空白对照组。  

　　2  结果  

　　2.1 急性毒性的测定腹腔注射复方中药10 min后，昆明小鼠表现出兴奋不安，痉挛，缩成一团，呼吸困难，死亡时间在给药后0.5 h。用简化几率单位计算法（也称和尔恩法）计算LD50，试验结果见表1。  

      表1  急性毒性试验  

　　经计算LD50=425.6±126.4 mg/kg哑铃分子结构，促使红细胞形成“缗钱状聚集体”，从而使血液黏度升高，因此可以认为，降低血浆纤维蛋白含量以减少红细胞“缗钱状聚集体”的形成，也是电针降低血液黏度的一个方面。  

　　除上述因素外，血小板的聚集性也是影响血液黏度的重要因素。血小板保持一定的聚集性，通过聚集形成血小板血栓，对于防止出血是必要的。但当体内血小板聚集性过强时，会形成大量的血小板血栓，而使血液黏度增高，流动性降低，对血液循环产生不良影响。在本试验中，电针后绵羊的血小板聚集性显著降低，说明降低血小板的聚集性，使之处于分散状态，防止或减少血小板血栓的形成，是电针降低血液黏度的又一途径。  

  　2.2  对数死亡几率单位直线绘制  利用表1的结果，在Excel中绘制直线，得出剂量对数死亡几率单位的关系。剂量对数死亡几率直线：y=0.2674x+1.3041(y为对数剂量，x为死亡几率)。  

　　2.3 对昆明小鼠的体重影响  

　　2.3.1 口服复方中药对昆明小鼠体重的影响  口服复方中药后，连续7天观察昆明小鼠的临床变化并记录体重。昆明小鼠未出现任何临床变化。第Ⅰ组(1 600 mg/kg)7天内体重增加5.49 g；第Ⅱ组（1 280 mg/kg）7天内体重增加4.24 g；第Ⅲ组（1 024 mg/kg）7天内体重增加4.56 g；第Ⅳ组（819.2 mg/kg）7天内体重增加3.61 g；第Ⅴ组（655.36 mg/kg）7天内体重增加6.87 g；第Ⅵ组（524.2 mg/kg）7天内体重增加7.19 g。对照组7天内体重增加6.53 g。  

　　2.3.2  最大耐受量的测定  

　　最大耐受量倍数=每只小鼠的耐受药量/小鼠平均体重×鸡平均体重/鸡每次用量经计算，该药的最大耐受量倍数为400。给药后7天，连续观察昆明小鼠的精神状态并称量体重，了解体重的变化。昆明小鼠精神状态良好，在7天内体重增加5.49 g，而对照组昆明小鼠在7天内体重增加6.34 g。  

　　2.4 昆明小鼠各脏器的病理变化给昆明小鼠腹腔注射不同剂量的复方中药10 min后，高剂量组昆明小鼠表现出兴奋不安、抽搐等现象，并在0.5 h发生死亡。马上对其剖检，发现死亡鼠的肝脏体积稍肿大，被膜紧张，边缘钝圆，表面呈暗紫红色，切面呈暗红色，质地变软；脾、肾脏体积均增大。随着剂量的减少，昆明小鼠的死亡率随之降低，脏器病变也随之减轻。病理组织学检查表明，各脏器的病理变化与剂量呈一定的关系，高剂量组昆明小鼠的心、肝、脾、肺、肾和肠出现较严重的病理变化。具体检查结果如下。  

　　肝脏，中央静脉可见有红细胞，少量肝细胞发生变性坏死，肝细胞体积增大，胞浆内有大小不等的空泡，核偏位。肠，肠黏膜固有层血管充血、白细胞浸润和水肿，黏膜上皮中杯状细胞显著增多。脾脏，呈急性脾炎变化，被膜下有多量红细胞，淋巴滤泡结构不明显，淋巴细胞发生变性坏死，淋巴细胞数量减少。中央动脉内皮增生，数量增多，向管腔内凸出。肺脏，小支气管黏膜上皮细胞发生变性坏死，管腔内有少量脱落的炎性细胞和一定量的红细胞。淋巴细胞和巨噬细胞等炎性细胞浸润，有少量的脱落的上皮细胞、炎性细胞和红细胞。肾脏，肾小管上皮细胞空泡变性，严重的发生坏死。变性细胞内有大小不等的空泡，严重的胞核溶解，消失，肾小管间有一定量的炎性细胞浸润。心脏，即纤维表面不平坦，成凸凹状，肌浆内着色不均匀，有红色着染的点状或块状物质，心肌纤维核数量减少，肌纤维断裂、崩解、溶解、消失。肌纤维间有一定量的红细胞。中、低剂量组小鼠各器官出现的病理变化较高剂量组明显减轻，与对照组相比差异不明显。  

　　3  讨论   

　　3.1  复方中药对昆明小鼠的急性毒性  口服组和腹腔注射组的半数致死量值差异较大，说明小鼠对于腹腔给药途径敏感。可能经口服给药后，在消化道内经过各种消化酶的作用，有毒物质被降解为无毒物质进入血液循环。而腹腔注射后，腹腔面积大，吸收快，药物直接以原型的形式进入血液循环，引起全身中毒的症状。  

　　3.2  昆明小鼠各脏器的病理变化  腹腔注射复方中药Ⅱ后，昆明小鼠在0.5 h内出现死亡。死亡率随着剂量的加大有增加的趋势。心、脾、肺、肾、肠的病理变化也随着剂量的加大而加强。注射药物后，该药在腹腔内快速吸收，几乎不受吸收相的影响，分布全身。观察心、肺、肝、肾的病理变化，均可以看出静脉性充血即瘀血的现象。静脉性充血(简称瘀血)是指组织或器官因静脉回流受阻，血液流出量减少，使血管内静脉血液量过度充盈的现象。可能是因为该复方中药的有毒产物，侵害心脏，引起心肌变性，心肌收缩力减弱，使心输出量减少而形成心脏积血，当心舒张时，静脉血流就不可能完全回到心脏而淤积在静脉内，引起各器官的瘀血  

　　3.3  口服复方中药Ⅱ对昆明小鼠体重的影响  口服复方中药Ⅱ后不同剂量对小鼠的增重情况不同，在第Ⅰ组(1 600 mg/kg)至第Ⅳ组（819.2 mg/kg）体重增加幅度比对照组慢，而第Ⅴ组（655.3 mg/kg）和第Ⅵ组（524.2 mg/kg）体重增加幅度比对照组快，说明该复方药物在适宜剂量时，有增加体重的作用。故该药在临床应用时，不仅有抗病毒、增强机体免疫力，还有增加体重的作用。（中国兽医杂志）

xxt_xxt2008 · 发表于 2009-10-18 19:48:52

都说说，。。。

林泉 · 发表于 2009-10-18 20:01:15

迷糊迷糊

萧萧风 · 发表于 2009-10-18 21:00:08

好帖子，难以理解

坤旺 · 发表于 2009-10-18 21:19:28

帖子好是好不知道怎么理解

缘梦红尘 · 发表于 2009-10-18 22:19:02

唉，文化低了，看不大明白

╭鈊姷所属の · 发表于 2009-10-19 07:51:47

不知其所亦然。

老蒋 · 发表于 2009-10-19 08:34:23

什么都有一个{量}。

路振林 · 发表于 2009-11-4 14:24:43

不明白啊，理论是实践的基础，理论不够啊

小卒子 · 发表于 2009-12-19 04:49:35

中药的使用有一个量的问题，多了不好，少了没用。多少合适呢？我们应多多借鉴类似的论文，做到心中有数，以便于调整自己的用药量。谢谢楼主的热心。希望今后多多发转发类似的文章。

chuych_1968 · 发表于 2009-12-27 19:48:55

我有几个疑问
1.所制的上清液是否达到注射级别
2.按公斤体重计算，10ml数量很大。足以导致脏器受压迫而出现病理变化，能否说证明中药作用结果
3.中药治疗疾病应该按照理法方药进行组方，而不应该以方统病
4.不同时间、不同地域、不同日龄，即使是相同的病毒类型也会出现不同症状，组方应根据临床表现制定，而不应说***方子就是治疗禽流感的。现在临床多出现这样的误区。至少一个配方在不同季节进行适当调整。但现在多数兽药厂没有专门能够调整配方的中兽医专家。
先简单说这几点，不对处请批评指正

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Re:都来看

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