药物敏感实验(药敏试验)
药物敏感实验实验的目的:
了解抗生素和抗菌药物的杀菌或抑制作用,为临床上选用抗菌素打下基础。
仪器及材料;
接种环 酒精灯 镊子 恒温箱 琼脂板 药敏片 实验药物病料 记号笔
方法与步骤:
药敏片的制作,用直径6毫米的滤纸。实验药物的配制可以根据药物的预防量的比例来制作药液,一般常用药物的比例是,青霉素100单位/毫升,链霉素 氯霉素和其他抗菌药物的比例为2毫克/毫升。成品药物一般按照预防量来制作。一般每毫升药液装滤纸100片,浸泡1-2小时后干燥备用,药片可以维持1-2个月。
无菌采取病料如血液,肝脏,肺脏等。用接种环在琼脂板上均匀的划线并标记好。(此时可以直接贴药敏片。一般的平皿直径为9厘米,可以贴药敏片10-12个不可以多贴以免结果互融难以分辨。)放入恒温箱中培养6-12小时,观察菌落生长的情况。大肠杆菌在营养琼脂上生长的 较大菌落表面光滑呈半透明状,沙门氏菌生长的大肠杆菌小,要仔细观察。挑取菌落接种另一个平板粘贴药敏片。恒温箱培养12-24小时观察结果。
结果观察:
用直尺测量抑菌圈(细菌在药物的周围生长受到抑制,在药敏片的周围形成一个无菌区)的直径。
一般抑菌圈的直径小于10毫米(药敏片的1.7倍)的为不敏感,在11-20毫米(1.8-3.3倍)的为敏感,大于20毫米(3.3倍)的为极敏。在实际中中敏以上对实际工作有指导意义。
备注:
在实际中抑菌圈中有杂菌原因:药敏片失效,该菌对此药物不敏感,培养时受污染等原因。
有时在实验中高度敏感的药物在实际中作用不明显的原因是,本来药敏是在机体体外做的实验直接作用与细菌,而机体用药物时需要口服等用药途径此时跟药物的吸收,机体的体质,疾病的程度有很大关系的。毕竟不是直接作用与细菌所以效果回有一些偏差。
因本人技术有限 不足之处还望在回帖中指出qq729902185 多多交流 不错,学习了。滤纸是中性的,药敏片的制作方法,不是太详细,不知道你说的预防量,在你实际应用中是否有抑菌圈。 多问一句,同楼上问题差不多,药敏片的配药计量应该怎么算,量少了看不出来,量多了都会有抑菌圈,这样杀菌效果都很强,更难看出来了,懂我的意思吗?谢谢, 你太死板了!要有创意!
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