【分享】鸡传染性支气管炎科学诊断：现场剖诊+RT-PCR+测序+血清学抗体诊断
在前面陆续发布了关于用SPF哨兵鸡系统监测部分肉鸡和蛋鸡鸡场传染性支气管炎病毒（IBV）感染的状况以及大数据监测IBV流行情况，因感染毒株、日龄、品种不同，鸡传染性支气管炎临床症状多样，主要有呼吸型、生殖型、肾型和腺胃型等，如何在临床中进行诊断，下面我们来系统地看。1、呼吸道型传支
呼吸型传支一般白羽肉鸡、黄羽肉鸡多发，而且多在2-4周龄发生，容易和禽流感H9、支原体及细菌混合感染。
感染的鸡只主要表现为：
畏寒扎堆、精神沉郁、食欲饮欲下降、羽毛脏乱、不愿活动；
眼角有泪、呼吸困难，甚至张口伸颈呼吸，呼吸有啰音；
剖检可见气管分泌物增多，支气管堵塞，造成较高的死亡率。
图1 呼吸型传支症状表现A.鸡只伸颈呼吸B.眼角狭长C.支气管堵塞D.死亡率高
2、 肾型传支
商品蛋鸡、白羽肉鸡、黄羽鸡均易感，易感日龄3-12周龄；
病鸡精神沉郁、食欲下降、口渴喜饮水、畏寒扎堆，同时伴有腹泻症状；
排出混有尿酸盐的水样白色稀粪，时常污染肛门周围的羽毛，死亡率可达30%；病鸡肾脏肿大、颜色变淡；
肾小管和输尿管有白色尿酸盐沉积，呈花斑样，俗称“花斑肾”，见图2。
图2.肾型传支症状表现：A.羽毛杂乱，精神沉郁B.水样白色稀便C.肾脏、输尿酸盐沉积D.肾脏、输尿管尿酸盐沉积
3、腺胃型传支
肉鸡、蛋雏鸡易感，7-30日龄多发；
腺胃壁增厚、肿胀，乳头融合、出血，个别肾脏出血肿胀；
粘膜固有层部分区域有大小和形态较一致的淋巴细胞渗出与增生，见图3。
图3. 腺胃型传支症状表现A.腺胃壁增厚、肿胀 B.腺胃壁增厚、肿胀，乳头融合、出血
4、生殖型传支
根据感染日龄和临床症状不同，又将生殖型分为“企鹅型”、“软蛋型”和“降蛋型”三种。
企鹅型：常见于1-3周龄感染，主要表现为开产后产蛋无高峰，产蛋率低；病鸡表现为“大肚子”鸡，走路呈“企鹅状”；剖检表现为卵泡发育正常，输卵管积液，见图4。
图4. 生殖型传支“企鹅型”症状表现A.大肚子鸡，走路呈“企鹅状”B.大肚子鸡，走路呈“企鹅状”C.输卵管积液D.输卵管积液
软蛋型：多见2-6周龄感染，主要表现为开产后产蛋无高峰，产蛋率低，软蛋率高，蛋清正常；剖检表现为输卵管子宫部出血、水肿、有钙化沉积物不易剥离，见图5。
图5. 生殖型传支“软蛋型”症状表现A.软壳蛋B.输卵管外观基本正常C.输卵管子宫部水肿、有血粒D.输卵管子宫部有钙化沉积物
降蛋型：产蛋期间感染传染性支气管炎病毒导致，表现为产蛋率下降20-30%，恢复较慢；蛋壳质量变差，软皮蛋、畸形蛋、嵴状蛋增多，蛋清稀薄，见图6。
图6. 生殖型传支“降蛋型”症状表现A.蛋壳质量变差B.嵴状蛋C.软皮蛋、畸形蛋、嵴状蛋增多D.蛋清稀薄
5、 国内多发IB基因型的临床特点、组织嗜性等见表
上述是基于鸡传染性支气管炎感染鸡群外在表现与解剖进行分类，除了上述分类，实验室进行更深一步研究，将临床表现与基因型对应，发现基因型一样的传支病毒，临床可表现多种症状，但是，基因型QX型和GVI型传支危害程度更大。
实验室诊断
1、分子生物学诊断之PCR检测和测序
鸡传染性支气管炎分子生物学诊断方法主要包括反转录PCR（RT-PCR）并基因测序、荧光定量PCR（qPCR）等，多用于传支的快速诊断和后续分子分析。
RT-PCR是当前传支最常见的分子生物学诊断技术，可对气管拭子和组织中的传支病毒进行快速检测。进一步对病毒进行分析时，常需对PCR阳性样品进行测序和序列比对，以确定病毒基因型。
2、血清学诊断
鸡传染性支气管炎血清学诊断方法主要有酶联免疫吸附试验（ELISA）、血凝抑制实验、血清中和试验等。酶联免疫吸附试验由于其敏感性高且具有快速、简便的特性，是当前最常用的方法。
采集鸡群发病前、发病后血清进行抗体检测，若抗体滴度异常升高，反应鸡群可能有传支的感染。
有条件的鸡场，可通过定期检测抗体以建立属于自己场区的传支抗体基准线，当检测抗体结果与基准线相差较大时，说明鸡群可能有传支病毒的感染。
表12 各品种传支抗体参考基准线
白羽肉鸡
周龄
1W
2W
3W
4W
5W
6W
抗体滴度
800
170
340
1200
2200
2600
种鸡
周龄
3W
5W
8W
11W
14W
17W
20W
26W
32W
蛋（种）鸡
500
2200
4000
5000
6000
7000
6500
7000
7000
肉（种）鸡
1000
3800
4000
4500
4000
6500
6500
7500
7500
注：该数据仅供参考，不同鸡场免疫程序不同，抗体基准线有一定差异。
3、病毒分离
病毒分离可分离到的传支病毒，便于进行后续血清交叉、免疫攻毒等深度研究。
活鸡可采集气管拭子（死亡或致死的鸡只可采集气管、肾脏和盲肠扁桃体），通过实验室处理（具体见实验室手册），接种于9-11日龄SPF鸡胚中，每日照蛋，弃去24h内死亡的鸡胚，继续在鸡胚内传代。典型的野毒株通常在鸡胚中传代2-3次，可见胚体卷曲和发育迟缓。
鸡胚发育图
因为目前鸡群一旦发生呼吸道多是混合感染，为了确定最终病原，我们可以根据自己鸡场的需要，从现场的发病与剖检，再到实验室病原检测以及抗体系统监测，从而科学的对疾病做出诊断，防控好鸡传染性支气管炎。
文章出处：鸡传染性支气管炎防控技术论文集（精选）
来源：禽世界
谢谢分享 感谢分享，很好的文章 如果近期没做过疫苗，做个RT－pCR或qPCR足以。 写的很详细http://app.jbzyw.com/public/emotion/face_075.png
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