少林寺 发表于 2008-8-11 08:41:56

鸡马立克氏病的诊断

一般采用琼脂扩散的血清学方法,检测鸡血清中的 MDV特异抗体或鸡羽髓中的MDV抗原。其操作方法如下:

    (1)1%琼脂糖平板制备用含8%氯化钠的PBS(0.01mol,pH7.4)配制1%琼脂糖溶液,水浴加温使充分溶化后,加入培养皿,每皿约20ml;平置,在室温下凝固冷却后,将琼脂板放在预先印好的7孔形图案上,用打孔器按图形准确位置打孔,中央孔孔径为4mm,周边孔孔径为3mm,孔距均为3mm。   

    (2)检测血清抗体(被检鸡血清)向中央孔滴加标准琼扩抗原,向周边孔滴加待检血清和至少有一孔加阳性血清,均以加满而不溢出为度;将加样后的琼脂平皿加盖后平放于加盖的湿盒内,置37℃温箱中孵育,8~24h内观察并记录结果。

    (3)检测羽髓中MDV抗原向中央孔加MD阻性血清,向周边1、4孔加标准MD琼扩抗原,向周边2、、5、6孔加待检羽髓浸液(加1~2滴蒸馏水在试管内挤压),或直接插羽髓。加样后将琼脂平皿置湿盒内,于37℃温箱孵育,8~24h内观察结果。

    (4)上述方法可用于20日龄以上鸡羽髓MDV抗原检测和1月龄以上鸡的血清抗体检测,试验需用标准的MD琼扩抗原和抗血清。被检样品孔与中心孔之间形成清晰的沉淀线,并与周边已知抗原或阳性血清孔的沉淀线互相融合者,判为阳性,不出现沉淀性的判为阴性;已知抗原与阳性血清之间所产生的沉淀线末端弯向被检样品孔内侧时,则该被检样品判为弱阳性。有的被检材料可能会出现两条以上沉淀线,其中一条与已知抗原——阳性血清的沉淀线融合者,仍判为阳性。

feelyang 发表于 2009-11-29 12:01:15

很    实    用

疯狂的公鸡 发表于 2009-12-2 12:29:05

还在学习中,不知有用不?

李恩昭 发表于 2010-1-1 21:56:38

材料很全面,对养殖户来说此帖实用性不大,根据发病日龄和症状就可确诊,在生产中若发生该病就是确诊对养殖户来说也无意义了。
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